Контрольная работа 10 класс. Г.Я. Мякишев, Б.Б. Буховцев
1.Самолёт летит горизонтально со скоростью 720 км/ч на высоте 490м. Когда он пролетает над точкой А, с него сбрасывают пакет. На каком расстоянии от точки А пакет упадёт на землю?
2. Шкив диаметром 40 см делает 600 оборотов за 2 мин. Определить период вращения, угловую и линейную скорости точки на ободе шкива.
3. Поезд в течение 5 с увеличил скорость с 36 км/ч до 54 км/ч. В течении следующих 9 с он двигался равномерно. Определить перемещение и среднюю скорость поезда. Построить график скорости.
4. Как двигался мотоциклист, график скорости движения которого изображён на рисунке?
Вариант 2
1.Автомобиль движется по круговой траектории с ускорением 2 м/с², имея постоянную по модулю скорость 10 м/с. Определите радиус круговой траектории.
2.Первую половину пути машина двигалась со скоростью 40 км/ч, а вторую половину – со скоростью 60 км/ч. Какова была средняя скорость машина на этом пути?
3.Во время половодья скорость течения реки достигает значения u= 30 км/ч. С какой по модулю скоростью υ будет двигаться относительно берегов быстроходный катер, пересекающий реку по кратчайшему пути? Скорость катера в стоячей воде υ= 34 км/ч.
4.Камень брошен из окна второго этажа с высоты 4 м и падает на землю на расстоянии 3 м от стены дома. Чему равен модуль перемещения камня?
Контрольная работа №2 по теме «Законы Ньютона»
Определите массу мяча, который под действием силы 0,05 Н получает ускорение 10 м/с
Автомобиль движется равномерно и прямолинейно со скоростью V. Какое направление имеет равнодействующая всех сил, приложенных к автомобилю? (указать все силы, действующие на тело)
3 . С каким ускорением двигался при разбеге реактивный самолет массой 60 т, если сила тяги двигателей 90 кН?
4. На сколько удлинится рыболовная леска жесткостью 400 Н/м при равномерном поднятии вертикально вверх рыбы массой 400 г?
V
Вариант 2
1.Вагонетка массой 500 кг движется под действием силы 125 Н. Определите её ускорение.
Указать все силы, действующие на тело
3. Какая сила сообщает ускорение 3 м/с2 телу массой 400 г?
4. Со дна водоема поднимается пузырек воздуха. Объясните причину его равномерного движения.
10 класс Контрольная работа №3 «Динамика»
Вариант 1
1. Книга лежит на столе. Назовите и изобразите силы, действие которых обеспечивает ее равновесие.
2. Какая сила сообщает ускорение 3 м/с2 телу массой 400 г?
3. Деревянный брусок массой 5 кг скользит по горизонтальной поверхности. Чему равна сила трения скольжения, если коэффициент трения скольжения 0,1?
4. Снаряд массой 15 кг при выстреле приобретает скорость 600 м/с. Найдите среднюю силу, с которой пороховые газы давят на снаряд, если длина ствола орудия 1,8 м. Движение снаряда в стволе считайте равноускоренным.
5. Космический корабль массой 8 т приблизился к орбитальной космической станции на расстояние 100 м. Чему равна масса станции, если сила притяжения станции и корабля 1 мкН.
Вариант 2
1. Со дна водоема поднимается пузырек воздуха. Объясните причину его равномерного движения.
2. С каким ускорением двигался при разбеге реактивный самолет массой 60 т, если сила тяги двигателей 90 кН?
3. На сколько удлинится рыболовная леска жесткостью 400 Н/м при равномерном поднятии вертикально вверх рыбы массой 400 г?
4. С какой силой упряжка собак равномерно перемещает сани с грузом массой 300 кг, если коэффициент трения скольжения 0,05?
5. Средний радиус планеты Меркурий 2420 км, а ускорение свободного падения 3,72 м/с2 . Найдите массу Меркурия.
10 класс Контрольная работа №4 «Законы сохранения»
Вариант 1
1. Человек массой 60 кг, бегущий со скоростью 5 м/с, догоняет тележку массой 40 кг, движущуюся со скоростью 2 м/с, и вскакивает на неё. С какой скоростью они продолжат движение?
2. Человек поднимает равномерно из колодца глубиной 10 м ведро воды массой 15 кг. Какую работу совершает человек? Сила тяжести?
3. На высоте 15м над поверхностью Земли строительный блок имеет потенциальную энергию 1500 кДж. Чему равна его масса?
4. Две тележки движутся навстречу друг другу по гладкой дороге. Для расчёта модуля скорости их движения после сцепки можно воспользоваться:
законом сохранения механической энергии
законом сохранения импульса
и законом сохранения механической энергии и законом сохранения импульса
среди приведённых нет правильного ответа.
Вариант 2
1. Тележка массой 1 кг движется со скоростью 8 м/с навстречу тележки массой 2 кг, движущейся со скоростью 3,5 м/с. После столкновения тележки соединяются и продолжают движение как одно целое. Какова скорость этого движения?
2. Определите работу сил трения, если автомобиль массой 2 т перемещается по горизонтальной дороге на 500м. Коэффициент трения равен 0,02.
3. Пружина имеет жёсткость 2500 Н/м. Какую энергию имеет пружина сжатая на 10 см?
4. Ученик провёл опыт с двумя разными пружинами, измеряя силы упругости при разных её деформациях. Результаты эксперимента даны в таблице:
Δх, см
Контрольные и самостоятельные работы по физике. 10 класс
Сборник самостоятельных-контрольных работ 10 класса Громцевой по физике соответствует новому ФГОС. Предназначен для проверки знаний уч-ся. Ориентирован на работу с любым учебником по физике из ФПУ. Содержит контрольные работы по темам, изучаемым в 10 классе, самостоятельные работы в 2 вариантах. Контрольные работы приведены в пяти вариантах. Каждый вариант включает задания 3 уровней, что соответствует формам зад-ний, применяемым в ЕГЭ. Способствует оперативному выявлению пробелов в знаниях. Учителям, учащимся.
— Содержание —
КИНЕМАТИКА
САМОСТОЯТЕЛЬНЫЕ РАБОТЫ 11
КОНТРОЛЬНАЯ РАБОТА 24
Вариант № 01 24
Вариант № 02 26
Вариант № 03 28
Вариант № 04 30
Вариант № 05 32
ДИНАМИКА
САМОСТОЯТЕЛЬНЫЕ РАБОТЫ 35
КОНТРОЛЬНАЯ РАБОТА 51
Вариант № 1 51
Вариант № 2 53
Вариант № 3 55
Вариант № 4 57
СТАТИКА. ГИДРОСТАТИКА 60
САМОСТОЯТЕЛЬНЫЕ РАБОТЫ , 61
КОНТРОЛЬНАЯ РАБОТА 69
Вариант № 1 69
Вариант № 2 71
Вариант № 3 73
Вариант № 4 75
Вариант № 5 77
ЗАКОНЫ СОХРАНЕНИЯ — МЕХАНИКЕ 78
САМОСТОЯТЕЛЬНЫЕ РАБОТЫ 79
КОНТРОЛЬНАЯ РАБОТА 89
Вариант № 1 89
Вариант № 2 91
Вариант № 3 93
Вариант № 4 95
Вариант № 5 97
МЕХАНИЧЕСКИЕ КОЛЕБАНИЯ — ВОЛНЫ 98
САМОСТОЯТЕЛЬНЫЕ РАБОТЫ 99
КОНТРОЛЬНАЯ РАБОТА 106
Вариант № 1 106
Вариант № 2 108
Вариант № 3 , 110
Вариант № 4 112
Вариант № 5 114
МОЛЕКУЛЯРНАЯ ФИЗИКА 115
САМОСТОЯТЕЛЬНЫЕ РАБОТЫ 116
КОНТРОЛЬНАЯ РАБОТА 125
Вариант № 2 127
Вариант № 3 129
Вариант № 4 131
Вариант № 5 133
ТЕРМОДИНАМИКА 143
САМОСТОЯТЕЛЬНЫЕ РАБОТЫ 135
КОНТРОЛЬНАЯ РАБОТА 148
Вариант № 1 148
Вариант № 2 150
Вариант № 3 152
Вариант № 4 154
Вариант № 5 156
ЭЛЕКТРОСТАТИКА 157
САМОСТОЯТЕЛЬНЫЕ РАБОТЫ 159
КОНТРОЛЬНАЯ РАБОТА 168
Вариант № 1 168
Вариант № 2 170
Вариант № 3 172
Вариант № 4 174
Вариант № 5 176
ОТВЕТЫ 177
Размер файла: 1,5 Мб; Формат: djvu
Вместе с «Контрольные и самостоятельные работы по физике.
Итоговая контрольная работа по физике 10 класс
Итоговая контрольная работа по физике
в 10А классе
Вариант I.
Часть 1.
По графику зависимости модуля скорости тела от времени, представленного на рисунке, определите путь, пройденный телом от момента времени 0 с до момента времени 2 с. (Ответ дайте в метрах).
Ответ: ______________ м.
2. При равноускоренном движении автомобиля на пути 25 м его скорость увеличилась от 5 до 10 м/с. Чему равно ускорение автомобиля? (Ответ дайте в метрах в секунду в квадрате.)
Ответ: ______________ м/с2.
3. Модуль силы гравитационного взаимодействия двух точечных тел, расположенных на расстоянии трёх метров друг от друга, равен 5 Н. Каков будет модуль силы гравитационного взаимодействия этих тел, если расстояние между ними уменьшить на 1 м? (Ответ дайте в ньютонах.)
Ответ: ______________ Н.
4. 4. В баллоне объёмом 1,66 м3 находится 2 кг молекулярного кислорода при давлении 10
Ответ: ______________ К.
5. На графике (см. рисунок) представлено изменение температуры Т вещества с течением времени t. В начальный момент времени вещество находилось в кристаллическом состоянии. Какая из точек соответствует началу процесса отвердевания?
А. 5; Б. 6; В. 3; Г. 7.
6. Рассчитайте общее сопротивление электрической цепи, представленной на рисунке.
Ответ: ______________ Ом.
7. Сила тока в проводнике 0,12А, а приложенное напряжение на его концах 12В. Как изменится сила тока на этом проводнике, если напряжение увеличить в 4 раза?
А. Увеличится в 2 раза; Б. Уменьшится в 4 раза; В. Увеличится в 4 раза; Г. Не изменится.
Часть 2. (Решите задачи)
8. Двигаясь равнозамедленно с начальной скоростью 72 км/ч, автомобиль за 10с прошел путь 150м. С каким ускорением двигался автомобиль и какую скорость он приобрел в конце пути?
9. Тепловая машина, работающая по циклу Карно, за один цикл совершает работу, равную 2,5 кДж, и отдает холодильнику количество теплоты, равное 2,5 кДж. Определите КПД тепловой машины.
10. К источнику тока с ЭДС 9 В и внутренним сопротивлением 1,5 Ом присоединена цепь, состоящая из двух проводников по 20 Ом каждый, соединенных между собой параллельно, и третьего проводника сопротивлением 3,5 Ом, присоединенного последовательно к двум первым. Чему равна сила тока в неразветвленной части и напряжение на концах цепи?
Итоговая контрольная работа по физике
в 10А классе
Вариант II
Часть 1.
1. На рисунке представлен график зависимости модуля скорости тела от времени. Какой путь пройден телом за вторую секунду? (Ответ дайте в метрах)
Ответ: ______________ м.
2. Автомобиль трогается с места и движется с постоянным ускорением 5 м/с2. Какой путь прошёл автомобиль, если его скорость в конце пути оказалась равной 15 м/с? (Ответ дайте в метрах.)
Ответ: ______________ м.
3. Модуль силы гравитационного взаимодействия двух точечных тел, расположенных на расстоянии четырёх метров друг от друга, равен 5 Н. Каков будет модуль силы гравитационного взаимодействия этих тел, если расстояние между ними увеличить на 1 м? (Ответ дайте в ньютонах.)
Ответ: ______________ Н.
4. В резервуаре находится 20 кг азота при температуре 300 К и давлении 10
Ответ: ______________ м3.
5. На графике (см. рисунок) представлено изменение температуры Т вещества с течением времени t. В начальный момент времени вещество находилось в кристаллическом состоянии. Какая из точек соответствует началу процесса плавления?
А. 5; Б. 2; В. 3; Г. 6.
6. Сила тока в проводнике 0,12А, а приложенное напряжение на его концах 12В. Как изменится сила тока на этом проводнике, если напряжение уменьшить в 4 раза?
А. Увеличится в 2 раза; Б. Уменьшится в 4 раза; В. Увеличится в 4 раз; Г. Не изменится.
7. Рассчитайте общее сопротивление электрической цепи, представленной на рисунке.
Ответ: ______________ Ом.
Часть 2. (Решите задачи)
8. Двигаясь равноускоренно с начальной скоростью 18км/ч, автомобиль за 5с прошел путь 75м. С каким ускорением двигался автомобиль и какую скорость он приобрел в конце пути?
9. Температура нагревателя идеальной тепловой машины 227 °С, а температура холодильника 47 °С. Чему равен КПД тепловой машины?
10. К источнику тока с ЭДС 16 В и внутренним сопротивлением 0,2 Ом присоединена цепь, состоящая из двух проводников по 10 Ом каждый, соединенных между собой параллельно, и третьего проводника сопротивлением 5 Ом, присоединенного последовательно к двум первым. Чему равна сила тока в неразветвленной части и напряжение на концах цепи?
Тесты и контрольные работы
Электронное тестирование по теме «Термодинамика» 10 класс. Выполнено на основе Web технологий. В архиве html файл и flash ролик. Для проигрывания нужен Flash плеер. Запускаем html файл и отвечаем на поставленные вопросы. По окончании выполнения заданий, программа покажет результат и учитель может оценить работу.
Контрольная работа по теме «Кинематика» 10 класс
Контрольная работа № 1 по теме «Основы кинематики» — 10 класс. Содержит 24 варианта.
Данные материалы по теме «Электромагнитные явления» позволяют определить уровень усвоения обучающихся содержат различные по сложности и форме задание: выбор ответа из предложенных вариантов, подстановка формул, заполнение таблицы, запись определений, дат и имён ученых, решение задач.

Тест состоит из 50 вопросов с ответами, на тему Электромагнитные колебания. Данную работу может использовать не только учитель в школе для работы на уроке физики или на факультативах, но и ученик дома для самопроверки собственных знаний и самоподготовки к государственному экзамену по физике. Каждый вопрос теста имеет 5 вариантов ответа,причем и вопросы и варианты ответа выдается в случайном порядке, и повторение варианта невозможно. Это сделано для того, чтобы ученик не мог механически запомнить правильные ответы. После прохождения теста появляется статистика и оценка.Результат тестирования учитель может сохранить в электронном варианте или распечатать, а ученик может проверить в каких вопросах сделал ошибки.
Контрольные Работы По Физике 10 Класс Мякишев – Telegraph
➡➡➡ ПОДРОБНЕЕ ЖМИТЕ ЗДЕСЬ!
Контрольные Работы По Физике 10 Класс Мякишев
Home Физика Физика 10 класс Контрольные работы
Физика 8 Перышкин Самостоятельные работы с ответами по физике в 8 классе (2 варианта). Цитаты из…
Физика 11 класс Контрольные работы по физике с ответами (5 вариантов). Цитаты из пособия для учащихся…
Физика 10 класс Контрольные работы по физике с ответами (5 вариантов). Цитаты из пособия для учащихся «Тематические…
Физика 10 класс Контрольные работы с ответами по УМК Мякишев, Буховцев, Сотский (5 вариантов). Цитаты из пособия «Физика. Самостоятельные и контрольные работы. 10 класс : базовый и углубленный уровни / Е.С. Ерюткин, С.Г. Ерюткина — М.: Просвещение» использованы в учебных целях. Ответы адресованы родителям.
При постоянном использовании контрольных работ по физике в 10 классе рекомендуем купить книгу: Ерюткин, Ерюткина: Физика. 10 класс. Cамостоятельные и контрольные и работы. Базовый и углубленный уровни , в которой кроме контрольных работ есть ещё и самостоятельные работы.
Контрольная работа 3 К-3 «Законы сохранения в механике»
Контрольная работа 4 К-4 «Молекулярная физика и тепловые явления»
Контрольная работа 5 К-5 «Электростатика. Законы постоянного тока»
Контрольные работы могут быть использованы для осуществления контроля знаний учащихся по всем темам курса физики, изучаемым в 10 классе, и для формирования навыков решения задач при подготовке к экзамену.
Вы смотрели: Физика 10 класс Контрольные работы с ответами по УМК Мякишев и др. (5 вариантов). Цитаты из пособия «Физика. Самостоятельные и контрольные работы. 10 класс : базовый и углубленный уровни / Е.С. Ерюткин, С.Г. Ерюткина — М.: Просвещение» использованы в учебных целях. Ответы адресованы родителям.
© 2018-2020. Центр НПИ. Контакты: [email protected]
Физика 10 класс Контрольные работы с ответами
Контрольные работы к УМК Мякишева Г. Я. 10 -11 кл. Контроль…
Контрольные работы по физике 10 класс | Контрольные …
Тесты — « Физика (базовый уровень)», Мякишев … — Infourok
Физика . 10 класс . Самостоятельные и контрольные работы …
Сочинение Осеннее Утро Из 5 Предложений
Сочинение По Роману Обломов Любовь
Сочинение На Тему Почему Дубровский Стал Разбойником
Реферат Гугл Диск
Курсовая По Дефектологии Взаимодействие С Родителями
10 класс — Сайт учителя физики Григорьевой Светланы
Физика. 10 класс. Учебник. Механика, термодинамика и молекулярная физика. Анциферов Л.И. (2004, 415с.)
Физика. 10 класс. В 2 ч. Ч. 1. Учебник (базовый уровень). Генденштейн Л.Э., Дик Ю.И. (2009, 352с.)
Физика. 10 класс. В 2 ч. Ч. 2. Задачник (базовый уровень). Генденштейн Л.Э. и др. (2009, 127с.)
Физика. 10 класс. Профильный уровень. Громов С.В., Шаронова Н.В. (2007, 415с.)
ГДЗ — готовые домашние задания. Физика. 10 класс. Громов С.В. (2002, 155с.)
Физика. 10 класс. Профильный уровень. Касьянов В.А. (2013, 432с.)
Физика. 10 класс. Базовый уровень. Касьянов В.А. (2012, 272с.)
ГДЗ — готовые домашние задания. Физика. 10 класс. Касьянов В.А. (2006, 208с.)
Дидактические материалы. Физика 10 класс. Марон А.Е. (2005, 157с.)
Иллюстрированный Атлас по физике. 10 класс. Касьянов В.А. (2010, 144с.)
Контрольные работы в новом формате. Физика. 10 класс. Годова И.В. (2011, 96с.)
Физика. 10 класс. Поурочные планы к учебникам Мякишева Г.Я., Громова С.В. и Касьянова В.А. (2007, 397с.)
Физика. 10 класс. Учебник. Мякишев Г.Я., Буховцев Б.Б., Сотский Н.Н. (2010, 366с.)
ГДЗ — Физика. Решебник. 10 класс. Мякишев Г.Я. и др. (2011, 144с.)
Тематические контрольные и самостоятельные работы по физике. 10 класс. Громцева О.И. (2012, 192с.)
Физика. 10 класс. Тетрадь для лабораторных работ. Парфентьева Н.А. (2012, 48с.)
Физика. Механика. 10 класс. Учебник для углубленного изучения. Под ред. Мякишева Г.Я. (2010, 496с.)
Физика. Молекулярная физика. Термодинамика. 10 класс. Учебник для углубленного изучения. Мякишев Г.Я., Синяков А.З. (2010, 352с.)
Физика. Электродинамика. 10-11классы. Учебник для углубленного изучения. Мякишев Г.Я., Синяков А.З., Слободсков Б.А. (2010, 480с.)
Сборник задач по физике. 10-11 классы. Парфентьева Н.А. (2010, 206с.)
Физика. Контроль знаний, умений и навыков учащихся. 10-11 классы. Заботин В.А., Комиссаров В.Н. (2008, 64с.)
Физика. 10 класс. Профильный уровень. Под ред. Пинского А.А., Кабардина О.Ф. (2011, 431с.)
Физика. 10 класс. Учебник. Базовый уровень. Пурышева Н.С., Важеевская Н.Е., Исаев Д.А. (2012, 256с. )
Физика. 10 класс (базовый и профильный уровни). Тихомирова С.А., Яворский Б.М. (2012, 304с.)
Физика. Задачник. 10-11 классы. Гольдфарб Н.И. (2012, 400с.)
Физика. Задачник. 10-11кл. Рымкевич А.П. (2013, 192с.)
ГДЗ — готовые домашние задания. Физика. Задачник. 10-11кл. Рымкевич А.П. (2012, 320с.)
Физика. 10 класс. Учебник для классов с углубленным изучением физики. Чижов Г.А., Ханнанов Н.К. (2010, 480с.)
Физика. 10 класс. Разноуровневые самостоятельные и контрольные работы. Кирик Л.А. (2012, 192с.)
Физика. Экспресс-диагностика. 10 класс. 60 диагностических вариантов. Соколова С.А. (2012, 128с.)
▶▷▶ контрольные работы по физике 10-11 класс профильный уровень
▶▷▶ контрольные работы по физике 10-11 класс профильный уровеньИнтерфейс | Русский/Английский |
Тип лицензия | Free |
Кол-во просмотров | 257 |
Кол-во загрузок | 132 раз |
Обновление: | 05-11-2018 |
контрольные работы по физике 10-11 класс профильный уровень — Yahoo Search Results Yahoo Web Search Sign in Mail Go to Mail» data-nosubject=»[No Subject]» data-timestamp=’short’ Help Account Info Yahoo Home Settings Home News Mail Finance Tumblr Weather Sports Messenger Settings Yahoo Search query Web Images Video News Local Answers Shopping Recipes Sports Finance Dictionary More Anytime Past day Past week Past month Anytime Get beautiful photos on every new browser window Download Физика Контрольные работы Профильный уровень 10 11 класс gigabazaru/doc/64666html Cached Ф и з и к а Контрольные работы Профильный уровень 10-11 класс Бакалы 2011 МОБУ СОШ – 2 2011 г «Тетради для контрольных работ по физике 10-11 класс eduznateru/docs/89/index-1144106html Cached 10-11 класс (базовый уровень ) в статье содержатся по два варианта контрольных работ по курсу «Алгебра и начала математического анализа 10-11 (базовый уровень )» Контрольные Работы По Физике 10-11 Класс Профильный Уровень — Image Results More Контрольные Работы По Физике 10-11 Класс Профильный Уровень images контрольные работы 10 класс профильный уровень — Биология pedportalnet/starshie-klassy/biologiya/ Cached Контрольные работы по алгебре и началам математического анализа 10-11 класс ( профильный уровень ) Рузанова Ирина Михайловна 11 КЛАСС ПРОФИЛЬНЫЙ УРОВЕНЬ — ЛАБОРАТОРНЫЕ РАБОТЫ ПО ФИЗИКЕ супертинейджерырф/publ/laboratornye Cached Главная » Статьи » ЛАБОРАТОРНЫЕ РАБОТЫ ПО ФИЗИКЕ » 11 КЛАСС ПРОФИЛЬНЫЙ УРОВЕНЬ ПРОФИЛЬНЫЙ УРОВЕНЬ В категории материалов : 9 Решебник по физике за 10 класс, ответы онлайн gdzguru 10 класс ГДЗ: Онлайн Готовые Домашние Задания по физике за 10 класс , решебник и ответы спиши на ГДЗ ГУРУ, gdzguru Контрольные работы по физике 10-11 класс xojesamawoikaikacodes/cf3df Cached Контрольные работы по физике 10-11 класс , Марон Е Досрочный экзамен (Документ) Про евро я вообще молчу х) lili_barto Рабочая программа по физике 10-11 класс (профильный уровень infourokru/rabochaya-programma-po-fizike-klass Cached › Рабочие программы › Рабочая программа по физике 10-11 класс ( профильный уровень ) УМК Касьянова ВА Рабочая программа по физике 10-11 класс ( профильный уровень ) УМК Касьянова ВА Физика, Контроль знаний, 10-11 класс, Заботин ВА nasholcom … Экзамены по Физике Контрольные работы включают расчетные, качественные и графические задачи, определенные стандартом среднего (полного) общего образования по физике (базовый и профильный уровни), примерной ГДЗ по алгебре 10 класс задачник (профильный уровень megareshebaru/publ/reshebnik/algebra/reshebnik Cached ГДЗ по алгебре 10 класс задачник ( профильный уровень ) Мордкович АГ Базовый и углубленный уровень часть 2 Алгебра 11 класс Контрольные работы профильный уровень Глизбург skachaj24ru/algebra- 11 -klass-kontrolnye-raboty Cached Скачать учебники, учебные и методические пособия в электронном виде по гуманитарным, естественным и точным наукам всем, кто учится и учит — по русскому языку, литературе, математике, физике , истории, обществознанию Promotional Results For You Free Download | Mozilla Firefox ® Web Browser wwwmozillaorg Download Firefox — the faster, smarter, easier way to browse the web and all of Yahoo 1 2 3 4 5 Next 31,900 results Settings Help Suggestions Privacy (Updated) Terms (Updated) Advertise About ads About this page Powered by Bing™
- находящихся на 20 см ближе к центру
- опубликованный в 2007 году издательством «Мнемозина» и включенный в Федеральный перечень учебников с грифом «Рекомендовано»:
- так и профильного уровней и нацелен на контроль знаний Читать ещё Контрольные работы по физике 10 — 11 Физика : контроль знаний
22:30 К рабочей программе 10 класса (профиль) 1 2 Скрыть 5 Контрольные работы к УМК Мякишева Г Я 10 — 11 кл artfizru › ?p=3024 Сохранённая копия Показать ещё с сайта Пожаловаться Информация о сайте Контрольные работы по физике 10 — 11 Физика : контроль знаний
2004г
- естественным и точным наукам всем
- кто учится и учит — по русскому языку
- решебник и ответы спиши на ГДЗ ГУРУ
контрольные работы по физике 10-11 класс профильный уровень — Все результаты Физика Контрольные работы Профильный уровень 10 11 класс gigabazaru/doc/64666-pallhtml Похожие Профильный уровень 10 — 11 класс Текст контрольных работ составлен из опыта работы учителя физики в помощь учителям в организации контроля Картинки по запросу контрольные работы по физике 10-11 класс профильный уровень «id»:»0zoTyRqRzJUX9M:»,»ml»:»600″:»bh»:90,»bw»:59,»oh»:340,»ou»:» «,»ow»:220,»pt»:»img1labirintru/books/311083/bigjpg»,»rh»:»labirintru»,»rid»:»ReOM7_RYiNm0jM»,»rt»:0,»ru»:» «,»sc»:1,»st»:»Лабиринт»,»th»:104,»tu»:» \u003dtbn:ANd9GcRKwRhkR-aJBmcGJE6vyhJL74mN88kAt9i_8JgK3QysxvCmlLyofl45RQ»,»tw»:67 «id»:»OaYbSPVkdoKgCM:»,»ml»:»600″:»bh»:90,»bw»:72,»oh»:252,»ou»:» «,»ow»:200,»pt»:»staticmy-shopru/product/2/113/1125230jpg»,»rh»:»my-shopru»,»rid»:»SztmwoqXUt70sM»,»rt»:0,»ru»:» «,»sc»:1,»st»:»My-shopru»,»th»:94,»tu»:» \u003dtbn:ANd9GcQuj40DBRrSRMw_lxrugBim19hxRS3qoN-t2OHkxiez2wcKHCFbQYZdtAM»,»tw»:74 «id»:»rGot4M_bGRNWQM:»,»ml»:»600″:»bh»:90,»bw»:69,»oh»:700,»ou»:» «,»ow»:527,»pt»:»ozon-stcdnngenixnet/multimedia/1011838123jpg»,»rh»:»ozonru»,»rid»:»qXEq_DSG-g9MBM»,»rt»:0,»ru»:» «,»sc»:1,»st»:»Ozon»,»th»:96,»tu»:» \u003dtbn:ANd9GcT40MCIgQOERv169YUgymmEU87_86H8j56obKg9b1bEbeWFIoBXsqazeA»,»tw»:72 «id»:»Qws1AwnZjPnyKM:»,»ml»:»600″:»bh»:90,»bw»:70,»oh»:442,»ou»:» «,»ow»:340,»pt»:»cdnbook24ru/v2/DRF000000000416567/COVER/cover3d1″,»rh»:»book24ru»,»rid»:»1yf2fGsd_HC3NM»,»rt»:0,»ru»:» «,»sc»:1,»st»:»Book24″,»th»:95,»tu»:» \u003dtbn:ANd9GcQ22Owo0B6436FmDmUf3QMr5Vng2lz9u805i5HAh4JEl5njVsrIosTJ4xo»,»tw»:73 «cl»:3,»cr»:3,»id»:»9qKAkP29UPjadM:»,»ml»:»600″:»bh»:90,»bw»:121,»oh»:523,»ou»:» «,»ow»:800,»pt»:»img1labirintru/books/311083/scrn_big_1jpg»,»rh»:»labirintru»,»rid»:»hOp9JHyWd2zzNM»,»rt»:0,»ru»:» «,»sc»:1,»st»:»Лабиринт»,»th»:90,»tu»:» \u003dtbn:ANd9GcRO8XfDHXu5kAu72qyWDLSG8kTKsWnre_EFtpAbjnc3-gb_gLaZJDGhlng»,»tw»:138 «id»:»BFbZGgUW0VYIDM:»,»ml»:»600″:»bh»:90,»bw»:121,»oh»:1201,»ou»:» «,»ow»:2375,»pt»:»fs00infourokru/images/doc/140/163345/hello_html_»,»rh»:»infourokru»,»rid»:»XvNCXvEQMRfdqM»,»rt»:0,»ru»:» «,»sc»:1,»st»:»Инфоурок»,»th»:90,»tu»:» \u003dtbn:ANd9GcTUIjo9mF5GFpZK8o6PcBxY7Ibj0ZkKePfTyGvk19BHX26VYTTV04uYYUkx»,»tw»:178 «id»:»QDiRF7PwiAvr1M:»,»ml»:»600″:»bh»:90,»bw»:64,»oh»:962,»ou»:» «,»ow»:700,»pt»:»fiz1septemberru/2005/24/07-06gif»,»rh»:»fiz1septemberru»,»rid»:»VBbFN7-wEC4_vM»,»rt»:0,»ru»:» \u003d200502407″,»sc»:1,»th»:98,»tu»:» \u003dtbn:ANd9GcSmegQXYLHSrwEvm_qHX_nJpld3hsDPVSq_ytYCg9t0VdDxMqSddv3Ba9U»,»tw»:71 Другие картинки по запросу «контрольные работы по физике 10-11 класс профильный уровень» Жалоба отправлена Пожаловаться на картинки Благодарим за замечания Пожаловаться на другую картинку Пожаловаться на содержание картинки Отмена Пожаловаться Все результаты ТЕТРАДИ ДЛЯ КОНТРОЛЬНЫХ РАБОТ ПО ФИЗИКЕ — eLibrary автор: ВА Касьянов — 2005 10-11 класс ( базовый уровень ), В А Касьянов , И В Игряшова » , а также « Тетради для контрольных работ по физике 10 класс ( профильный Тетради для контрольных работ по физике Похожие Дополнение к УМК к курсу физики ВАКасьянова 10–11 -й классы Тетради для контрольных работ по физике 10 класс Профильный уровень [DOC] Тетради для контрольных работ по физике — fpeduru fpeduru/asp/adocs/a_1471-4doc Похожие «Тетради для контрольных работ по физике 10-11 класс (базовый уровень), ( профильный уровень )» Касьянов ВА (МЭИ(ТУ)), vkasyanov@yahoocom, Физика углубленный уровень 10 класс контрольные работы авт › › Контрольные работы по физике 10 класс Физика Углубленный уровень 10 класс Контрольные работы Характеристики Линия УМК В А Касьянова Физика ( 10-11 ) (У) Класс 10 класс Физика 10-11 класс Контрольные работы (базовый и — My-shopru Купить книгу « Физика 10-11 класс Контрольные работы (базовый и профильный уровни) Пособие для учителя» Профильный уровень Типовые «Физика 10 класс Контрольные работы к учебнику ВА Касьянова Сборник контрольных работ является составной частью учебно- методического комплекса В А Касьянова для углублённого уровня В тетрадь Итоговая контрольная работа по физике, 10 класс, профильный 9 июл 2018 г — Контрольная работа составлена в соответствии с Итоговая контрольная работа по физике , 10 класс , профильный уровень Физика 10 класс Углубленный уровень Контрольные работы к › Книги › Учебная литература Похожие В книжном интернет-магазине OZON можно купить учебник Физика 10 класс Углубленный уровень Контрольные работы к учебнику В А Касьянова от Итоговая контрольная работа для 11 класса (профильный уровень) › Физика Похожие 29 дек 2015 г — Контрольная работа предназначена для учащихся 11 класса , изучающих физику на профильном уровне и проводится в марте – апреле РАБОЧАЯ ПРОГРАММА «Физика 11 класс Профильный уровень › Физика 2 окт 2017 г — авторской программой ВА Касьянова по физике для 10-11 классов Данные задачи могут быть успешно решены, если на занятиях и в [PDF] Физика 10-11 класс Контрольные работы 10 класса профильного (1)pdf Похожие Физика 10-11 класс Контрольные работы 10 класса профильного уровня Контрольная работа № 1 «Кинематика» 1 вариант 1 За сколько времени Физика Углубленный уровень 10 класс Контрольные работы Книга Физика Углубленный уровень 10 класс Контрольные работы автора Касьянов ВА, Мошейко Серия:Линия УМК Касьянова Физика ( 10-11 ) (У) Физика 10 класс Контрольные работы к учебнику ВАКасьянова Похожие Сборник контрольных работ является составной частью учебно- методического комплекса В А Касьянова для углубленного уровня В тетрадь В А Касьянов, В А Коровин / Физика профильный уровень wwwvixriru/?p=9358 Похожие 1 нояб 2013 г — В А Касьянов, В А Коровин / Физика профильный уровень Тетрадь для лабораторных работ 11 класс Рубрика: Самостоятельные и контрольные работы Автор: Л А Кирик Аннотация: Пособие содержит самостоятельные и А Ю Калинин, Д А Терёшин / Геометрия 10—11 классы ЕГЭ каждый месяц — Учительская газета wwwugru/archive/9748 Похожие 18 окт 2005 г — 10-11 класс (базовый уровень ), ВАКасьянов, ИВИгряшова», «Тетради для контрольных работ по физике 10 класс ( профильный [PDF] профильный уровень stupenidvru/images/stories/RAB_prog/Физика_10_класс_профиль2017-2018pdf Физика Углубленный уровень 10—11 классы Автор Касьянов ВА Сборник Данные задачи могут быть успешно решены, если на занятиях и в Контрольные работы по физике для учащихся 11 класса 13 янв 2015 г — Контрольные работы по физике для учащихся 11 класса (учебник Работы рассчитаны на учеников изучающих предмет на базовом уровне Рабочая программа по физике 11 класс ( профильный уровень ) ФГОС самостоятельные и контрольные работы по физике касьянов 10 magnachipcom/userfiles/20181027171946xml 27 окт 2018 г — самостоятельные и контрольные работы по физике касьянов 10 класс Касьянов , 9 класс Громцева Контрольные Работы По Физике 10-11 Класс ФИЗИКА • В А Касьянов Физика 11 класс Профильный уровень Контрольная работа по физике за 1 полугодие — 11 класс Похожие Контрольная работа по физике за 1 полугодие — 11 класс Тест содержит 14 заданий (10 ( Физика -11 , профильный уровень ) Инструкция учащемуся [PDF] Рабочая программа по физике (базовый уровень) 10-11 класс лицей176рф//10-11class/Рабочая%20программа%20по%20физике%20(базовый уровень, 10-11 классы НС Пурышевой, НЕ Важеевской, ДА Исаева Текущий контроль ( контрольные работы ) по темам в 10 классе : Контрольная 8 Физика Колебания и волны 11 класс Профильный уровень : учеб для [DOC] профильный уровень Рабочая программа по физике для 10 класса ( профильный уровень ) составлена среднего (полного) общего образования по физике 10-11 классы Предусмотрено в 10 классе : лабораторных работ – 5, контрольных работ – 7 [PDF] Профильный уровень — МАОУ СОШ № 15 гБелебея shkola-15ucozru/Rabochie_progr/11klass_prof_fizika_ni_korovinapdf Эта углубленная программа по физике для 11 класса рассчитана на 170 часов из Тексты контрольных работ взяты из сборника « Физика 10-11 кл [DOC] Учебно-методические комплекты (УМК) В govcapru/home/121/raznoe/end/fizika/umk_kasjanov/умк(проф)doc Учебно-методический комплект (УМК) ВАКасьянова по физике по физике для 10-11 классов общеобразовательной школы для базового и профильного уровня Учебники ВАКасьянова « Физика 10 класс ( профильный уровень )», содержащее два варианта контрольных и самостоятельных работ по [PDF] Рабочая программа по физике 11 класс — МБОУ СОШ № 109 s-109edusiteru/sveden/files/e4af6dcc-abf5-4aa6-a4e7-f2bfd27e99d8pdf А ПРымкевич Задачник 10-11 класс -М: Дрофа,2009 Курс физики Цели и задачи курса Примерная программа по физике на профильном уровне [PDF] базовый и профильный уровни (10 – 11 классы) ИОГромцева « Контрольные и самостоятельные работы по физике 10 класс » и Содержание курса физики 10 класс ( профильный уровень ) Тема по [PDF] 10 класс (профильный уровень, Грачев АВ) — Лицей № 11 г wwwl-11ru/filedocs/teaching/program/wp_physic_10_prof_grachevpdf 10 – 11 классы / сост Грачев АВ Физика 10 класс : базовый уровень: профильный уровень : учебник для учащихся определяют задачи обучения: Физика rlodessaua/indexphp/ru/biblioteka/fizika Похожие ИВЛукашик, ЕВИванова Сборник задач по физике для 7-9 класов (2004) Самостоятельные и контрольные работы (PDF) Базовый и профильный уровень Отлично подходит для физических классов Ришельевского лицея РП по физике 11 класс (профильный уровень) — УП по физике sch37pskoveduru › › УП по физике › РП по физике 7 класс Рабочая программа по физике ( профильный уровень ) 11 класс образования в книге « ФИЗИКА 10-11 классы » Автор программы: ГЯ Мякишев, самостоятельная работа, контрольная работа , тестовая работа, наблюдение, Книга Физика 11 класс Базовый уровень, 978-5-358-10010-7 › › Физика › Учебники › Школа › 10-11 классы Только в 10-11 классы Показать клавиатуру Расширенный Тетрадь для контрольных работ является составной частью учебно-методического комплекта по физике ВАКасьянова для 11 класса профильного уровня В тетрадь 11 класс :: ZUBRILANET zubrilanet/books/fizika/11-klass/ Похожие 11 класс Тематические контрольные и самостоятельные работы по физике Профильный уровень Скачать бесплатно Физика 10-11 классы Результаты контрольных работ wwworenipkru/rmo_2007/RMO_site/3_2/fiz/fizhtm 2 «Тетради для контрольных работ по физике 10-11 класс (базовый уровень), ( профильный уровень )» Касьянов ВА 3 УЧЕБНЫЕ ТАБЛИЦЫ ПО [DOC] Календарно-тематическое планирование (170часов, 5 часов/нед) Похожие Мякишев, Буховцев » Физика 10-11 » профиль стр1 из 21 с43] – Тестовые задания для подготовки к Единому государственному экзамену 10-11 классы и соответствующая страница Тематическое планирование профильного уровня стандарта по физике Контрольная работа по теме «Динамика» [DOC] «Физика 10 класс» и — Просвещение oldprosvru/metod/myak1doc автор: НН Тулькибаева — Цитируется: 1 — Похожие статьи **На изучение курса физики для обеспечения профильного уровня стандарта РАЗДЕЛЫ КУРСА ФИЗИКИ 10 – 11 КЛАСС Контрольная работа [PDF] Физика (профильный уровень) — СРЕДНЯЯ s10vbgru/wp-content/uploads/2015/10/fizika__profil_10-11_klasspdf образования 10-11 классы , профильный уровень » и авторской программы В А Орлов, О Тематические контрольные работы в формате ЕГЭ [PDF] по физике (профильный уровень) для 10-11 классов 14gimnaziacom/NEW2016/rabochie/rp_i_ktp_po_fizike__10-11profilpdf Похожие физике 10-11 классы ( профильный уровень ) и авторской программы ГЯ Мякишева по Контрольная работа №7 по теме «Законы постоянного тока » Касьянов ВА Лучшие книги — LiveLib Серия: УМК Касьянова Физика ( 10-11 ) (Б) Касьянов ВА — Физика Контрольные работы 11 класс ВЕРТИКАЛЬ Учебник предназначен учащимся 11 классов , в которых физика изучается на профильном уровне , и является Мошейко Людмила Петровна «Физика 10 класс Контрольные От 136,00 р до 172,00 р Книга Мошейко Людмила Петровна » Физика 10 класс Контрольные работы к учебнику ВА Касьянова » Физика Углубл ур» Вертикаль ФГОС» — купить сегодня c доставкой Касьянов ВА » Физика 10 класс Профильный уровень Мониторинг учебных достижений (ФИЗИКА — 10 класс) Вариант 01 ФИЗИКА 10 (Вариант 01 1/8) Мониторинг учебных достижений ( ФИЗИКА — 10 класс ) Вариант 01 На выполнение работы по физике отводится 1,5 часа Промежуточная аттестация по физике 10 класс ( профильный уровень ) и зарядом 2 10 11 Кл, создано однородное горизонтальное электрическое поле Физика Контрольные работы 11 класс (Углублённый уровень Физика Контрольные работы 11 класс (Углублённый уровень ) ВЕРТИКАЛЬ ДРОФА 3003965 в интернет-магазине Wildberriesru Тетрадь является РП физика 10 кл —профильdocx — РАБОЧАЯ ПРОГРАММА по РАБОЧАЯ ПРОГРАММА по физике для «10» класса прфильный уровень обучения Механика ( профильный уровень ) 10 класс Дрофа класс ДрофаАП Рымкевич Сборник задач по физике 10 – 11 класс – М: Дрофа, 2016; 5 Годова ИВ Контрольные работы в Новом стандарте по физике 10 класс –М: [PDF] РАБОЧАЯ ПРОГРАММА по физике 10 класс Составитель ciurru/igr/igr_s04/DocLib2//10%20класс/физика%2010pdf Программа по физике для 10-11 классов общеобразовательных учреждений (базовый и профильный уровень ) Авторы программы ВСДанюшенков, ▷ входная контрольная работа по химии 10 класс профильный ecole-artefactcom//vkhodnaia-kontrolnaia-rabota-po-khimii-10-klass-profilnyi-uro входная контрольная работа по химии 10 класс профильный уровень 10 класс и учащихся 10 — 11 классов профильного уровня , рассчитан на 68 [PDF] Рабочая программа по физике 10-11 классы физике 10-11 классы ( профильный уровень ) и авторской программы ГЯ Мякишева по обеспечению пропедевтической работы, направленной на раннюю Контрольная работа №1 «Прямолинейное равномерное движение» [DOC] Физика (MS Word) wwwksturu/servlet/contentblob?id=89966 ФИЗИКА Механика Кинематика Механическое движение ВА, Игряшова ИВ Физика Тетрадь для контрольных работ 10–11 кл Базовый уровень Методические рекомендации к учебникам ГЯ Мякишева, ББ windoweduru/catalog/pdf2txt/981/27981/11203 Похожие 6 Тематическое планирование ( профильный уровень стандарта) учеб- ное время на проведение самостоятельных и контрольных работ ФИЗИКИ 10 – 11 КЛАСС уровень ный уровень стандарта) стандарта) 10 класс Физика [PDF] Рабочая программа учебного предмета ФИЗИКА Уровень лицей135екатеринбургрф/file/download/907 Уровень — среднего (полного) общего образования ( 10 – 11 классы ) Рабочая программа учебного предмета физика на профильный уровень Мини- контрольные работы по физике : учебное издание для поступающих в вузы [PDF] УМК средней школы по математике, физике, информатике, химии school1minobr63ru/wp-content/uploads/2015//UMKmatem-2016-2017-10-11pdf Задачник 10-11 кл Базовый уровень М, «Мнемозина», 2012 г ВИ Глизбург Контрольные работы 10 класс Профильный уровень М Мнемозина, 2012 [PDF] Untitled Рабочая программа по физике для 10-11 класса ( профильный уровень ) составлена на основе Контрольная работа по теме «Механическая энергия, Вместе с контрольные работы по физике 10-11 класс профильный уровень часто ищут контрольные работы по физике 10 класс профильный уровень касьянов физика 10 класс контрольные работы ответы контрольные работы по физике 11 класс касьянов касьянов физика 10 класс контрольные работы скачать итоговая контрольная работа по физике 10 класс профильный уровень контрольные работы по физике 11 класс профильный уровень контрольная работа по физике 10 класс кинематика профильный уровень итоговая контрольная работа по физике 11 класс профильный уровень Навигация по страницам 1 2 3 4 Следующая Ссылки в нижнем колонтитуле Россия — Подробнее… Справка Отправить отзыв Конфиденциальность Условия Аккаунт Поиск Карты YouTube Play Новости Почта Контакты Диск Календарь Google+ Переводчик Фото Ещё Документы Blogger Hangouts Google Keep Подборки Другие сервисы Google
Яндекс Яндекс Найти Поиск Поиск Картинки Видео Карты Маркет Новости ТВ онлайн Музыка Переводчик Диск Почта Коллекции Все Ещё Дополнительная информация о запросе Показаны результаты для Нижнего Новгорода Москва 1 Физика 10 — 11 класс edutatarru › upload/storage/org1554/files/Физика… Показать ещё с сайта Пожаловаться Информация о сайте Официальный сайт по данным ЯндексСправочника Подробнее о сайте Сайт – выбор пользователей Подробнее о сайте Профильный уровень 10 контрольных работ 9 контрольных работ Контрольная работа № 1 «Кинематика» внутреннее сопротивление батареи Контрольные работы для 11 класса профильного уровня Контрольная работа № 1 по теме: «Магнитное поле» 1 вариант 1 Как изменится сила Читать ещё Профильный уровень 10 контрольных работ 9 контрольных работ Контрольная работа № 1 «Кинематика» 1 вариант 1 За сколько времени ракета пройдет полностью шахту глубиной 250 м, если длина ракеты 50 м, а скорость – 54 км/ч? внутреннее сопротивление батареи Контрольные работы для 11 класса профильного уровня Контрольная работа № 1 по теме: «Магнитное поле» 1 вариант 1 Как изменится сила, действующая на проводник, при увеличении магнитной индукции в 4 раза и уменьшении Скрыть pdf Посмотреть Сохранить на ЯндексДиск 2 Материал по физике ( 10 , 11 класс ) на тему nsportalru › …kontrolnye…fizike-10-11-klass…uroven Сохранённая копия Показать ещё с сайта Пожаловаться Информация о сайте Сайт – выбор пользователей Подробнее о сайте 11 класс Контрольная работа № 1 «Магнитное поле Электромагнитная индукция» Контрольная работе по физике по теме «Кинематика» в 10 классе (базовый уровень ) в двух вариантах (плюс вариант для подготовки к контрольной работе ) Контрольная работа по теме «Эволюция» 11 класс Читать ещё 11 класс Контрольная работа № 1 «Магнитное поле Электромагнитная индукция» Контрольная работе по физике по теме «Кинематика» в 10 классе (базовый уровень ) в двух вариантах (плюс вариант для подготовки к контрольной работе ) Контрольная работа по теме «Эволюция» 11 класс (базовый уровень ) Контрольная работа состоит из 16 тестовых заданий и двух заданий : выбрать три правильных ответа и установить соответствие Итоговая контрольная работа по органической химии 10 класс (базовый уровень ) Скрыть 3 Рабочая программа по физике 10 — 11 классы gigabazaru › doc/47290html Сохранённая копия Показать ещё с сайта Пожаловаться Информация о сайте 10 — 11 классы Профильный уровень Пояснительная записка Рабочая программа по физике для 10 — 11 классов составлена на основе примерной Контрольная работа по теме «Механика» Анализ контрольной работы Читать ещё 10 — 11 классы Профильный уровень Пояснительная записка Рабочая программа по физике для 10 — 11 классов составлена на основе примерной программы среднего (полного) общего образования ( профильный уровень ), которая соответствует Федеральному компоненту государственного стандарта основного общего образования Федеральный базисный учебный план для общеобразовательных учреждений Российской Федерации отводит 350 часов для изучения физики на профильном уровне В 10 — 11 классах по 175 учебных часов из расчета 5 учебных часа в неделю Контрольная работа по теме «Механика» Анализ контрольной работы Коррекция знаний Скрыть 4 Контрольные работы 10 класс ( профильный уровень ) torgunovaucoznet › …kontrolnye…10_klass_profilnyj… Сохранённая копия Показать ещё с сайта Пожаловаться Информация о сайте Физика вокруг нас Приветствую Вас Гость Главная » Файлы » Контрольные работы » Контрольные работы Контрольные работы 10 класс ( профильный уровень ) 05 11 2015, 22:30 К рабочей программе 10 класса (профиль) Читать ещё Физика вокруг нас Приветствую Вас Гость Меню сайта Главная » Файлы » Контрольные работы » Контрольные работы Контрольные работы 10 класс ( профильный уровень ) [ Скачать с сервера (1962 Kb) ] 05 11 2015, 22:30 К рабочей программе 10 класса (профиль) 1 2 Скрыть 5 Контрольные работы к УМК Мякишева Г Я 10 — 11 кл artfizru › ?p=3024 Сохранённая копия Показать ещё с сайта Пожаловаться Информация о сайте Контрольные работы по физике 10 — 11 Физика : контроль знаний, умений и навыков учащихся 10 — 11 кл Сборник содержит контрольные и самостоятельные работы как базового, так и профильного уровней и нацелен на контроль знаний Читать ещё Контрольные работы по физике 10 — 11 Физика : контроль знаний, умений и навыков учащихся 10 — 11 кл общеобразовательных учреждений : базовый и профильный уровни : книга для учителя / В А Заботин, В Н Комиссаров — М : Просвещение, 2008 — 64 с, ил — ISBN 978-5-09-017173-1 Сборник содержит контрольные и самостоятельные работы как базового, так и профильного уровней и нацелен на контроль знаний, умений и навыков учащихся при изучении курса физики по учебно-методическому комплекту «Классический курс» Может использоваться при преподавании по любым параллельным курсам физики Пособие предназ Скрыть 6 Профильная школа — Физика | 11 класс school-russiaprosvru › umk/profile-school/… Сохранённая копия Показать ещё с сайта Пожаловаться Информация о сайте Марон А Е, Марон Е А Контрольные работы по физике : 10 — 11 классы В учебниках реализуются профильный и базовый уровни В учебнике для 10 класса представлена преимущественно классическая физика Читать ещё Марон А Е, Марон Е А Контрольные работы по физике : 10 — 11 классы — 112 с: ил — Обл Громов С В, Шаронова Н В Физика : 10 — 11 классы : Книга для учителя — 112 с: ил — Обл Шаронова Н В, Важеевская Н Е Дидактический материал по физике : 7— 11 классы В учебниках реализуются профильный и базовый уровни В учебнике для 10 класса представлена преимущественно классическая физика Материал учебника 11 класса дает представление о теории относительности, квантовой теории, физике атомного ядра и элементарных частиц Мякишев Г Я, Буховцев Б Б, Сотский Н Н Физика : 10 класс — 368 с: ил — Пер Шилов В Ф Тетрадь для лабораторных работ по физике : 10 класс —80 с: ил Скрыть 7 Физика Контроль знаний, умений и навыков учащихся allengorg › d/phys/phys357htm Сохранённая копия Показать ещё с сайта Пожаловаться Информация о сайте 10 — 11 классы Сборник содержит контрольные и самостоятельные работы как базового, так и профильного уровней и нацелен на контроль знаний, умений и навыков учащихся при изучении курса физики по учебно-методическому комплекту Читать ещё 10 — 11 классы Заботин ВА, Комиссаров ВН М: 2008 — 64 с Сборник содержит контрольные и самостоятельные работы как базового, так и профильного уровней и нацелен на контроль знаний, умений и навыков учащихся при изучении курса физики по учебно-методическому комплекту «Классический курс» Может использоваться при преподавании по любым параллельным курсам физики Пособие предназначено для учителей физики Формат: pdf Скрыть 8 Контрольные работы по физике 10 класс ya-uchitelru › …kontrolnye…po_fizike_10…profilnyj… Сохранённая копия Показать ещё с сайта Пожаловаться Информация о сайте 10 класс Профильный уровень Данные контрольные работы предназначены для проверки знаний учащихся по курсу физики 10 класса Контрольные работы ориентированы на учебник Физика : учебник для 10 класса общеобразовательных Читать ещё 10 класс Профильный уровень (404 Mb) 04062014, 19:30 Бочкова Елена Владимировна учитель физики , МАОУ СОШ № 9 гБоровичи Новгородской области Данные контрольные работы предназначены для проверки знаний учащихся по курсу физики 10 класса физико-математического профиля Контрольные работы ориентированы на учебник Физика : учебник для 10 класса общеобразовательных учреждений: базовый и профильный уровни ГЯ Мякишев, ББ Буховцев, НН Сотский; М: Просвещение, 2008 Все контрольные работы рассчитаны на 2 учебных часа Весь текст материала находится в приложенном файле Категория: Разное | Добавил: Elena0509 Скрыть 9 Контрольные работы по физике 10-11 класс профильный уровень — смотрите картинки ЯндексКартинки › контрольные работы по физике 10-11 класс Пожаловаться Информация о сайте Ещё картинки 10 Контрольные работы по физике для 11 -го класса easyenru › …11_klass/kontrolnye_raboty_11…klassa…1… Сохранённая копия Показать ещё с сайта Пожаловаться Информация о сайте Контрольные работы 11-го класса: 1Состоят из 3-х уровней : 1-й уровень — решить задачи (1б – запись дано, 1б По кнопке ниже вы можете скачать Контрольные работы по физике для 11-го класса категории Физика 11 класс бесплатно Будем благодарны, если вы оставите отзыв или посмотрите еще другие Читать ещё Контрольные работы 11-го класса: 1Состоят из 3-х уровней : 1-й уровень — решить задачи (1б – запись дано, 1б – запись формулы или вывод формулы для расчета искомой величины и запись ее единицы измерения, 1б – математический расчет и запись ответа) 2-й уровень — решить задачи (1б – запись дано, 2б – вывод формулы для расчета искомой величины и запись ее единицы измерения, 1б – математический расчет и запись ответа) По кнопке ниже вы можете скачать Контрольные работы по физике для 11-го класса категории Физика 11 класс бесплатно Будем благодарны, если вы оставите отзыв или посмотрите еще другие материалы на нашем сайте Документ является задачи Скрыть 10 — 11 КЛАСС ( профильный уровень ) infourokru › …po-fizike…klassovsostavlena…polnogo… Сохранённая копия Показать ещё с сайта Пожаловаться Информация о сайте Рабочая программа по физике 10 — 11 КЛАСС ( профильный уровень ) Данная рабочая программа по физике для 10 — 11 класса составлена на основе Примерной программы 10 класс Контрольные работы в НОВОМ формате Читать ещё Рабочая программа по физике 10 — 11 КЛАСС ( профильный уровень ) Пояснительная записка Статус документа Данная рабочая программа по физике для 10 — 11 класса составлена на основе Примерной программы среднего (полного) общего образования: “ Физика ” 10 — 11 классы ( профильный уровень ) и авторской программы ГЯ Мякишева для общеобразовательных учреждений 10 — 11 классы , 2004г, рекомендованной Департаментом образовательных программ и стандартов общего образования Министерства образования Российской Федерации 10 класс Контрольные работы в НОВОМ формате – М: «Интеллект-Центр», 2011 – 96 с Скрыть Итоговая контрольная работа по физике , 10 класс multiurokru › Обо мне › …-po-fizike-10-klass… Сохранённая копия Показать ещё с сайта Пожаловаться Информация о сайте Просмотр содержимого документа «Итоговая контрольная работа по физике , 10 класс , профильный уровень » контрольно -измерительных материалов для проведения промежуточной аттестации по физике ( профильный уровень обучения) в 10 классе Содержание контрольной работы Читать ещё Просмотр содержимого документа «Итоговая контрольная работа по физике , 10 класс , профильный уровень » 1 вариант На рисунке приведен график зависимости проекции скорости тела от времени контрольно -измерительных материалов для проведения промежуточной аттестации по физике ( профильный уровень обучения) в 10 классе Содержание контрольной работы определяется Федеральным компонентом государственного образовательного стандарта по физике , (базовый и профильный уровни ) программы 10 класса Каждый вариант контрольной работы включает в себя контролируемые элементы содержания из всех разделов программы физики 10 класса Скрыть Физика , Контроль знаний, 10 — 11 класс , Заботин nasholcom › 2012051865338/fizika…10-11-klass…v-a…v… Сохранённая копия Показать ещё с сайта Пожаловаться Информация о сайте Сборник содержит контрольные и самостоятельные работы как базового, так и профильного уровней и нацелен на Содержание Введение 3 Часть 1 Физика 10 класс 4 Механика — Контрольная работа 1 Кинематика — Контрольная работа 2 Динамика Силы в природе 5 Контрольная работа 3 Законы Читать ещё Сборник содержит контрольные и самостоятельные работы как базового, так и профильного уровней и нацелен на контроль знаний, умений и навыков учащихся при изучении курса физики по учебно-методическому комплекту «Классический курс» Может использоваться при преподавании по любым параллельным курсам физики Содержание Введение 3 Часть 1 Физика 10 класс 4 Механика — Контрольная работа 1 Кинематика — Контрольная работа 2 Динамика Силы в природе 5 Контрольная работа 3 Законы сохранения 7 Контрольная работа 4 Механические колебания и волны 8 Молекулярная физика 10 Контрольная работа 1 Молекулярно-кинетическая теория газов — Самостоятельная работа Скрыть Контрольная работа по физике в 10 классе kopilkaurokovru › Физика › Уроки › …po_fizikie_v_10_klassie… Сохранённая копия Показать ещё с сайта Пожаловаться Информация о сайте Просмотр содержимого документа « Контрольная работа по физике в 10 классе ( профильный уровень ) «Основы кинематики»» 3 Линейная скорость точек на окружности колеса 10 м/с, а точек, находящихся на 20 см ближе к центру, — 5 м/с Сколько оборотов за 6,28 с сделает колесо? 4 Пуля вылетает из Читать ещё Просмотр содержимого документа « Контрольная работа по физике в 10 классе ( профильный уровень ) «Основы кинематики»» Вариант 1 1 Тело движется согласно уравнению х = At + Bt2, где А = 4 м/с, В = — 0,05 м/с2, t — время в секундах 3 Линейная скорость точек на окружности колеса 10 м/с, а точек, находящихся на 20 см ближе к центру, — 5 м/с Сколько оборотов за 6,28 с сделает колесо? 4 Пуля вылетает из орудия в горизонтальном положении со скоростью 1000м/с Скрыть Физика 10 класс Контрольные работы в новом формате school-boxru › …fizike-10-klass-kontrolnie-raboti… Сохранённая копия Показать ещё с сайта Пожаловаться Информация о сайте В пособие по физике включены контрольные работы по всем темам традиционного курса физики 10 класса Обязательным объемом контрольной работы для классов базового уровня и гуманитарного профиля является Для классов (групп) расширенного и профильного физико-математического уровня предполагается выполнение контрольной работы в полном объеме ( 11 заданий ) Читать ещё В пособие по физике включены контрольные работы по всем темам традиционного курса физики 10 класса В сборник включены контрольные работы по шести темам традиционного курса физики 10 класса ; каждая работа в четырех вариантах Обязательным объемом контрольной работы для классов базового уровня и гуманитарного профиля является выполнение частей А и В ( 10 заданий ) При этом задачи части С учащиеся могут выполнять по желанию Для классов (групп) расширенного и профильного физико-математического уровня предполагается выполнение контрольной работы в полном объеме ( 11 заданий ) Скрыть 10 — 11 класс ( профильный уровень ) pandiaru › text/79/460/34209php Показать ещё с сайта Пожаловаться Информация о сайте Контрольные работы по алгебре и началам математического анализа 10 — 11 класс ( профильный уровень ) В статье содержатся по два варианта контрольных работ по курсу «Алгебра и начала математического анализа 10 — 11 ( профильный Читать ещё Контрольные работы по алгебре и началам математического анализа 10 — 11 класс ( профильный уровень ) Контрольные работы по алгебре и началам математического анализа 10 — 11 класс ( профильный уровень ) В статье содержатся по два варианта контрольных работ по курсу «Алгебра и начала математического анализа 10 — 11 ( профильный уровень )», ориентированных на учебный комплект, опубликованный в 2007 году издательством «Мнемозина» и включенный в Федеральный перечень учебников с грифом «Рекомендовано»: , Алгебра и начала анализа-10 ( профильный уровень ), часть 1 Учебник , Алгебра и начала анализа-11 ( п Скрыть Вместе с « контрольные работы по физике 10-11 класс профильный уровень » ищут: контрольные работы по математике 3 класс контрольная работа по физике 9 класс контрольные работы по математике 2 класс самостоятельные работы по физике 7 класс перышкин 1 2 3 4 5 дальше Браузер Для безопасных прогулок в сети 0+ Скачать
Кто этот Крошка? — The New York Times
Глядя на полоски «Фрица», которые были нарисованы на предкислотной стадии Крамба, можно сразу понять, в чем его существенное возражение против версии фильма. Хотя Бак Ши был верен образу Фрица как фальшивого студента, ищущего секса и дешевых революционных острых ощущений, этот взгляд на Фрица для Крамба представляет собой этап в его творчестве, от которого он теперь чувствует себя вынужденным отказаться. Существа, которых он сейчас рисует, после того как начал употреблять ЛСД в 1965 году, не так безобидны, как Фриц; они более зверины, маниакальны — и даже опасны.Кроме того, в недавних работах Крамба усиливается напряжение насмешек над собой, метафизических страданий, цинизма и отчаяния по поводу человеческого положения, которое и забавная сатира фальшивости, которую можно наблюдать в докислые дни Фрица.
Роберт Крамб родился в Филадельфии 30 августа 1943 года и был вторым из пяти детей в римско-католической семье. Его отец был морским пехотинцем, который теперь утверждает, что его сын опозорил фамилию. В основном из-за своего старшего брата Чарльза Роберт начал рисовать комиксы карандашом в 6 лет.К началу пятидесятых годов братья Крамб выпустили большую партию комиксов, все они были нарисованы в линейных тетрадях с композициями с такими названиями, как «Веселые друзья» и «Панда Бромбо», явно взлетевшие на тогдашний рынок. ‐Популярные комиксы в стиле «забавное животное». «Кот Феликс» был одним из любимцев Роберта в детстве. А как отреагировал его отец? «Он сказал:« Да, вы, ребята, перестанете рисовать комиксы, когда станете подростком, и пойдете играть в футбол ». Но, конечно, этого не произошло.В 1958 году братья Крамб нарисовали и в частном порядке напечатали три выпуска «Фу», вопиющей пародии на «Жук» Харви Курцмана и некоторых вдохновленных Курцем выпусков «Безумия». Они пытались продать их от двери к двери, но без особого успеха. «Это было очень обескураживающе», — вспоминает Крамб. «После этого я просто рисовал комиксы для себя, но никогда не думал о том, чтобы попасть в книгу комиксов
Когда Роберту было 12 лет, его семья переехала в Милфорд, штат Делавэр, где он учился в средней школе, а после окончания школы вернулся в Филадельфию. .В школе он был отличником. «Я был прилежным, делал уроки, но родился упрямым», — говорит он. Хотя его учителя выступали против машинного мультфильма, он настойчиво рисовал комиксы. «Это было похоже на чистую настойчивость, которая привела меня туда, где я нахожусь сегодня», — говорит он. Это — наряду с сильным влиянием его брата, который постоянно критиковал его работы — способствовало художественному росту и развитию Крамба; у него никогда не было формального художественного образования, кроме средней школы. «Если бы Чарльз все еще рисовал мультфильмы, он был бы лучше, чем сейчас.
После окончания школы Крамб провел дома, по его словам, «удручающий» год. Затем однажды он перебрался в Кливленд и нашел работу в American Greetings Corp. за 60 долларов в неделю, занимаясь цветоделением. Это было в 1962 году. Следующие четыре года он время от времени работал в отделе карточек Hi-Brow компании, вытаскивая сотни шуток. «Босс постоянно говорил мне, что мой рисунок слишком гротескный», — вспоминает он. «Он заставил меня нарисовать эти милые вещи, которые повлияли на мою технику, и даже сейчас в моих работах есть такая привлекательность.Эти карты, выполненные в узнаваемом стиле Крамб, все еще можно купить сегодня.
Устал от работы, Крамб какое-то время пробовал работать фрилансером, однажды летом написал портреты на променаде в Атлантик-Сити, а позже, после женитьбы в 1964 году, еще больше заглянул в Европу. Он рисовал карточки с жевательной резинкой для компании Topps в Нью-Йорке, работал в журнале Курцмана Help! и создавал иллюстрации для журнала «Ностальгия», который так и не сдвинулся с мертвой точки.
Примерно в это время Крамб начал рисовать многие истории о коте Фрице, в основном для собственного удовольствия и развлечения.На самом деле, Фриц появлялся — по крайней мере, в прототипе — в нескольких самодельных комиксах братьев Крамб в конце пятидесятых. Но в рассказах, которые он рисовал между 1965 и 1966 годами, которые были опубликованы в журнале Cavalier и в конечном итоге собраны в книгу, Фриц по очереди был студентом колледжа, бросил учебу, грабитель, уличный торговец и, к концу 1968 года, самозванный революционер.
Но Фриц умер еще до того, как Крамб окончательно бросил его в начале 1969 года. К тому времени, когда Крамб переехал в Сан-Франциско в январе 1967 года, оставив свою работу в компании приветствия, Фриц уже был похоронен в своем прошлом.Частично Крамб приписывает это своим экспериментам с ЛСД. «Я начал принимать кислоту в Кливленде в июне 1965 года. Это изменило мою голову. Это заставило меня перестать так серьезно относиться к карикатуре и показало мне совершенно другую сторону меня. Я был женат, работал на этой унылой работе и каждую ночь напивался. Я принимал кислоту по выходным, а по понедельникам возвращался на работу, и они говорили: «Что не так с твоим …» Разница между ранним «Котом Фрицем» и тем, что было в 67-м, заключалась в
Алина Комински-Крамб имеет одно сожаление
Я оставалась в подростковом возрасте, пока мне не исполнилось 50.Я считаю, что 50, когда я перешагнул подростковый возраст.
Я никогда не хотел выходить замуж и заводить детей, и все же я была с одним и тем же мужчиной с 23 лет. У нас всегда были гибкие отношения, мы позволяли друг другу расти и двигаться дальше по жизни. У нас была такая глубокая духовная связь, с самого начала между нами было что-то действительно глубокое. Я не люблю выражать это словами, но мы оба как бы знали, что в этом что-то есть, и мы могли терпеть друг друга изо дня в день.
Очень необычно.Все это очень необычно.
Мне все еще очень нравится жить с Робертом. У нас большой дом; мы не так часто видимся. Он не спит до 5 утра, я встаю в 7 утра. Мы спим вместе около двух часов, так что у нас мало времени на что-либо. И вы знаете, я прихожу домой с занятий йогой и ем гигантский салат, немного кальмаров и какую-то странную вещь, а он ест хлеб с маслом и джем. Он спит по утрам и не ложится спать допоздна. Мы как корабли.
Как вы думаете, именно поэтому он так хорошо работает?
Для меня да — я вообще не могла быть в традиционном браке. Нисколько. Я думала, что быть матерью очень сложно, очень больно. У меня были некоторые послеродовые проблемы, тогда я вошла в глубокую терапию из-за боли, вызванной тем, что я была матерью и так сильно любила этого ребенка, что вместо того, чтобы быть счастливой, мне было больно. Я подумал, почему я не могу просто чувствовать себя счастливым? И это побудило меня еще немного поработать над собой.
Это очень сложно. Иметь внуков — это очень весело, потому что у вас нет этого невротического аспекта. Теперь я очень хорошо лажу с дочерью; она великий человек, которым я восхищаюсь. Она тоже мной восхищается. Знаете, у нас нет культурного разрыва, как у меня с мамой. Нам нравится много одного и того же, хотя с точки зрения вкуса она совершенно сдержанная и не любит цвета. Ей нравится простая обстановка, а я живу во дворце китча. Посмотри на меня! Я как новогодняя елка.
Вы в такой хорошей форме и очень заботитесь о своем здоровье.Как мне согласовать это с вашей работой, которая составляет , а не о совершенстве?
Я был диким, неконтролируемым человеком, но постепенно у меня все получилось. Постепенно я стал более здоровым, частично за счет выражения гнева и боли на работе, частично за счет терапии и частично за счет йоги. Все эти вещи, и наличие детей, и любовь одного мужчины на протяжении почти 50 лет — все это заставляет вас поправляться и объединять. Все это. Я начинал как неконтролируемый, саморазрушительный человек.
Когда я смотрю на картинки, когда я думал, что я уродлив — я был красив! Так грустно, что тогда я этого не оценил. Я был великолепен, и я чувствовал себя таким уродливым, и я думаю, что это такая печальная вещь, знаете ли. Сейчас в моем возрасте я чувствую себя более привлекательной, чем тогда.
Это интервью отредактировано и сжато для ясности.
Перейти к основному содержанию ПоискПоиск
- Где угодно
Поиск Поиск
Расширенный поиск- Войти | регистр
- Подписка / продление
- Учреждения
- Индивидуальные подписки
- Индивидуальные продления
- Библиотекари
- Тарифы, заказы и платежи
- Завершено Пакет для Чикаго
- Полный цикл и охват содержимого
- Файлы KBART и RSS-каналы
- Разрешения и перепечатки
- Инициатива развивающихся стран Чикаго
- Даты отправки и заявки
- Часто задаваемые вопросы библиотекарей
- Агенты
- Тарифы, заказы и платежи
- Полный пакет Chicago
- Полный охват и содержание
- Даты отправки и претензии
- Часто задаваемые вопросы об агенте
- Партнеры по издательству
- О нас
- Публикуйте с нами
- Недавно приобретенные журналы
- Издательская номинация tners
- Новости прессы
- Подпишитесь на уведомления eTOC
- Пресс-релизы
- СМИ
- Книги издательства Чикагского университета
- Распределительный центр в Чикаго
- Чикагский университет
- Условия использования
- Заявление о публикационной этике
- Уведомление о конфиденциальности
- Доступность Chicago Journals
- Доступность университета
- Следуйте за нами на facebook
- Следуйте за нами в Twitter
- Связаться с нами
- Медиа и рекламные запросы
- Открытый доступ в Чикаго
- Следуйте за нами на facebook
- Следуйте за нами в Twitter
(PDF) 📄 Свойства материалов и экологические преимущества горячих асфальтовых смесей, включая местную резиновую крошку, полученную из утильных шин
Окружающая среда 2021, 8, 47 23 из 24
6. Presti, D.L. Битумы, модифицированные переработанной резиной, для дорожно-асфальтовых смесей: обзор литературы. Констр. Строить. Матер. 2013,
49, 863–881.
7. Азнина, С .; Fang, P.H .; Dimah, C .; Али К. Исследование бывших в употреблении шин в районе Кучинга; Совет по природным ресурсам и окружающей среде:
Саравак, Малайзия, 2001 г .; п. 45.
8. Решнер, К. Вторичная переработка утильных шин — Краткое изложение распространенных методов утилизации и переработки; Комплексное проектирование: Берлин, Германия,
2008.
9. Ślusarczyk, B .; Барынь, М .; Кот, С. Продукция шинной промышленности как альтернативное топливо. Pol. J. Environ. Stud. 2016, 25, 1263–1270,
DOI: 10.15244 / pjoes / 61543.
10. Каньякумари, Д. Game Changer? Шоссе Пан-Борнео в Восточной Малайзии вселяет надежду на развитие, но местные жители настроены скептически. Канал
Новости Азии, международное издание; Mediacorp Pte Ltd .: Квинстаун, Сингапур, 2019 г. Доступно в Интернете: https: //www.chan-
nelnewsasia.com/news/asia/malaysia-borneo-highway-development-12086656 (по состоянию на 5 марта 2021 г.).
11. О шоссе Пан Борнео, Саравак. 2015. Доступно на сайте: http://www.panborneo.com.my/about-
us / #: ~: text = The% 20Pan% 20Borneo% 20Highway% 20was% 20официально% 20запущено% 20by% 20the% 20Prime, % 20High-
way% 27s% 20development% 20in% 20Sarawak (по состоянию на 5 марта 2021 г.).
12. Видятмоко, И .; Эллиот, Р. Обзор использования модифицированного асфальтовой крошкой резиновой крошки во всем мире; Программа действий по отходам и ресурсам
(WRAP): Банбери, Великобритания, 2011.
13.Хасан, Н.Б.А. Характеристики горячего асфальта с использованием мелкой резиновой крошки. Магистерская работа, Universiti Teknologi Malaysia,
Джохор-Бару, Малайзия, 2007.
14. JKR / SPJ / REV2008-S4: Стандартные спецификации для дорожных работ; Jabatan Kerja Raya Sarawak: Саравак, Малайзия, 2008.
15. Hamim, A .; Ahmad, S .; Закария, М .; Abgulgadir, M.A.H .; Юсофф, Н.И.М .; Хайнин, М.Р .; Рахмат, Р.А.А.О. Оценка свойств горячего асфальта Malay-
sian при различных градациях агрегатов.Aust. J. Basic Appl. Sci. 2012, 6, 9–14.
16. Waanders, G .; Els, H. Splittmastixasphalt и dränasphalt в ден-нидерланден. erfahrungen und untersuchungen in der
provinz overijsel. Асфальт 1995, 95, 8–17.
17. Агентство по охране окружающей среды Огайо (Огайо EPA). Что такое утильные шины? Методический документ №642. Отдел материалов и отходов
Менеджмент; EPA Огайо: Колумбус, Огайо, США, 2018; п. 2. Доступно в Интернете: https://www.epa.ohio.gov/portals/34/docu-
ment /idance / gd_642.pdf #: ~: text = A% 20scrap% 20tire% 20is% 20any% 20tire% 20 that% 20has, con-
tain% 20wire.% 20Are% 20used% 20tires% 20also% 20scrap% 20tires? (доступ 26 февраля 2021 г.).
18. Buss, A.H .; Kovaleski, J.L .; Pagani, R.N .; Silva, V.L.d; Сильва, J.d.M. Предложение по повторному использованию резиновых отходов из отработанных шин с использованием термореактивной смолы
. Sustainability 2019, 11, 6997.
19. WBCSD — Всемирный деловой совет по устойчивому развитию. Global ELT Management — Глобальный уровень знаний о сборе
Скорости, пути восстановления и методы управления; WBCSD: Женева, Швейцария, 2018 г.
20. Alfayez, S.A .; Сулейман, А.Р .; Нехди, М. Переработка резины покрышек в асфальтовом покрытии: современное состояние. Sustainability 2020, 12,
9076.
21. Thomas, B.S .; Gupta, R.C .; Паникер, В.Дж. Переработка отработанной резины покрышек в качестве заполнителя в бетоне: характеристики, связанные с долговечностью.
J. Clean. Prod. 2016, 112, 504–513.
22. Cotana, F .; Vittori, S .; Marseglia, G .; Medaglia, C.M .; Coccia, V .; Петроцци, А .; Nicolini, A .; Кавалаглио, Г. Выбросы загрязняющих веществ от
газификатора биомассы внутри многотопливной энергетической установки.Атмос. Загрязнение. Res. 2019, 10, 2000–2009.
23. Shakya, P.R .; Shrestha, P .; Tamrakar, C.S .; Бхаттараи, П. Исследования потенциального выброса опасных газов в результате неконтролируемого сжигания отработанных шин транспортных средств на открытом воздухе
и их возможного воздействия на окружающую среду. Атмос. Environ. 2008, 42, 6555–6559.
24. Downard, J .; Сингх, А .; Bullard, R .; Jayarathne, T .; Rathnayake, C.M .; Simmons, D.L .; Wels, B.R .; Спак, С.Н .; Peters, T .; Beardsley,
D .; Станье, К.O .; Стоун, Э.А. Неконтролируемое сжигание шинкованных шин на свалке — Часть 1: Характеристика газообразных выбросов и выбросов
твердых частиц. Атмос. Окружающая среда, 2015, 104, 195-204.
25. Sienkiewicz, M .; Janik, H .; Borzędowska-Labuda, K .; Кучиньска-Липка, Ю. Экологически чистые полимерно-резиновые композиты
, полученные из отработанных шин: обзор. J. Clean. Prod. 2017, 147, 560–571.
26. Sunthonpagasit, N.R .; Даффи, М. Из старых шин в резиновую крошку: Технико-экономическое обоснование для перерабатывающих предприятий.Ресурс. Консерв. Re-
цикл. 2001, 40, 281–299.
27. Gong, F .; Guo, S .; Chen, S .; Ты, З .; Liu, Y .; Дай, К. Прочность и долговечность асфальтобетона с каменной матрицей, прошедшего сухую обработку, содержащего
цементных частиц с предварительно нанесенным покрытием из утильных шин. Констр. Строить. Матер. 2019, 214, 475–483.
28. Kim, H.H .; Mazumder, M .; Ли, С.-Дж .; Ли, М.-С. Влияние технологического процесса на эксплуатационные свойства теплых прорезиненных связующих
. J. Транспортировка трафика. Англ. 2019, 6, 589–597, DOI: 10.1016 / j.jtte.2018.04.004.
29. Mashaan, N.S .; Ali, A.H .; Карим, М.Р .; Абдельазиз М. Влияние времени перемешивания и содержания резиновой крошки на свойства крошки
вяжущее асфальтобетонное, модифицированное каучуком. Int. J. Phys. Sci. 2011, 6, 2189–2193.
30. Ibrahim, M.R .; Katman, H.Y .; Карим, М.Р .; Котинг, С .; Машаан, Н. Обзор влияния добавления резиновой крошки на реологию
модифицированного битума резиновой крошкой. Adv. Матер. Sci. Англ. 2013, 2013, 415246.
31.Ли, С.-Дж .; Akisetty, C.K .; Амирханян, С. Влияние модификатора резиновой крошки (CRM) на эксплуатационные свойства связующих, нанесенных на руб.
, в дорожных покрытиях из HMA. Констр. Строить. Матер. 2008, 22, 1368–1376.
32. Hassan, N.A .; Хайнин, М.Р .; Yaacob, H .; Ismail, C.R .; Юнус, Н.З.М. Оценка состава смеси и колейостойкости сухих
смешанных прорезиненных асфальтобетонных смесей. J. Teknol. 2013, 65, 115–120.
33. Mashaan, N.S .; Ali, A.H .; Котинг, С .; Карим, М.R. Оценка эффективности асфальтовой мостовой из искусственной мастики, модифицированной резиновой крошкой —
в Малайзии. Adv. Матер. Sci. Англ. 2013, 2013, 304676.
Crumbs организует транспортные механизмы, регулируя апикальные уровни PI (4,5) P2 у Drosophila
Рецензент № 1:
В статье Латтнера, Ленга, Кнуста, Бранкачка и Флореса-Бенитеса описывается роль крохи в организации апикальной мембраны клеток слюнных желез дрозофилы.
Crumbs — известный апикальный большой трансмембранный белок, который взаимодействует с Stardust и связывает белки FERM через свой связывающий домен FERM.Он также связывает β-Spectrin.
В первой части рукописи авторы показывают, что в слюнных железах потеря Crumbs не влияет на локализацию цитоплазматических апикальных маркеров, но влияет на доставку общего белка TM CD8-RFP. Потеря крошек не влияет на AJ, но немного влияет на SJ, хотя и не в степени нарушения целостности эпителия.
Однако потеря Crumbs приводит к появлению апикальных мешков плазматической мембраны (PAMS) на апикальной PM. PAMS имеет все характеристики PM, включая наличие некоторых микроворсинок.
Потеря звездной пыли приводит к аналогичным дефектам. Потеря β-Спектрина также, хотя и в меньшей степени. Крошки сейчас присутствуют в этих PAMS.
Moe связывает Crumbs, и потеря Moe в определенной степени приводит к сходному фенотипу. Результаты не столь убедительны.
У нас сложилось впечатление, что рецензент ошибается в этом пункте. Хотя это, безусловно, интересная идея, мы не приводили и не показываем никаких данных о подавлении молчания Moesin, но о подавлении Myosin V. Мы использовали Moesin или фосфо-Moesin в качестве маркера для апикальной коры.
Во второй части рукописи, что выглядит как переход от одного субъекта к другому, авторы исследуют локализацию многих Rab и обнаружили, что локализация 3 особенно затронута у мутанта Crumbs. А именно, локализация Rab6, Rab11 и Rab30 около апикальной коры теряется, и они оказываются на базальной стороне.
Rab6 и Rab11 имеют сложное клеточное распределение, поскольку эти белки локализуются близко к апикальной плазматической мембране, но также обнаружено, что они связаны с точечными компартментами по всей клетке (Dunst et al., 2015). При нокдауне Crumbs утрачивается исключительно апикальная часть Rab6, 11 и 30, не влияя на их локализацию в другом месте клетки. Таким образом, мы хотели бы уточнить, что мы не наблюдали и не заявляли, что они «заканчиваются у основания».
В третьей части авторы обращаются к роли PI (4,5) P 2 в апикальной мембране. Для этого они используют зонд, который специфически связывает PI (4,5) P 2 и показывает, что зонд локализуется в основном на апикальной мембране.В отсутствие Crumbs PI (4,5) P 2 больше не локализуется на вершине. Ингибирование Pten фармакологически и генетически модулирует пул PI (4,5) P 2 на апикальной мембране. Важно отметить, что истощение Pten подавляет образование PAM, которое вызвано истощением Crumbs.
Наши результаты показывают, что апикальные уровни PI (4,5) P 2 увеличиваются в отсутствие Crumbs. Это было указано в первой версии рукописи и также проиллюстрировано (старый рисунок 5).Однако, чтобы закрепить наши выводы, мы добавили количественные характеристики (рис. 5 текущей версии) наших данных микроскопии.
Они пришли к выводу, что Crumbs посредством связывания с Stardust, β-Spectrin и Moesin контролирует целостность апикальной мембраны, подавляя активность Pten. Когда Pten больше не подавляется, это приводит к расширению апикальной мембраны, что приводит к PAMS.
Рукопись представляет собой большой объем работы, сочетающий в себе довольно много методов от генетики мух до световой и электронной микроскопии.Он также хорошо выполнен. Однако в настоящее время трудно понять, о чем идет речь, о чем идет речь, что нового и важного, и в целом, как Crumbs требуется для поддержания микроворсинок апикальной мембраны и предотвращает образование микроворсинок апикальной мембраны. мешочки с плазматической мембраной (PAMS). Рассказ кажется несвязным. Истощение многих факторов приводит к образованию PAMS, но читателю не дается механистического представления о том, как эти факторы связаны в содействии образованию PAMS.
Вкратце, Crb — это хорошо охарактеризованный детерминант, необходимый для установления апико / базальной полярности. Однако менее ясно, в какой степени Crb необходим для поддержания апикальной идентичности в поляризованных клетках и если да, то как Crb механистически регулирует домен апикальной мембраны. Здесь мы показываем в клетках слюнной железы Drosophila , что Crb отрицательно регулирует фосфатазу Pten, необходимую для поддержания апикального соотношения PI (4,5) P 2 / PI (3,4,5) P 3 , необходимого для мембраны. личность.Более того, нарушение регуляции активности Pten изменяет локализацию (по крайней мере) апикального Rab-аппарата и нарушает связь между плазматической мембраной и цитоскелетом. Вследствие этого нарушается апикально-направленная секреция белков, что приводит к последствиям для всего организма.
Во-вторых, взаимосвязь между апикальной секрецией и образованием PAMs не ясна. В результате рецензент не понимает своей роли. Как они связаны с апикальным секретом образования слюны?
Рецензент прав, нелегко объяснить формирование PAMS с нашими результатами.PAMS — это мембранные мешочки, обогащенные PI (4,5) P 2 и фосфо-моэзином, которые никогда не присутствуют в контрольных клетках слюнных желез (см. Подраздел «Crb регулирует уровни PI (4,5) P 2 в апикальной мембране». ). Мы рассматриваем PAMS как морфологическое проявление нарушения транспорта через апикальную мембрану, хотя мы не можем полностью исключить возможность того, что ослабленная апикальная цитокортекс способствует их формированию. Фактически, связь между PAMS, секрецией и уровнями PI (4,5) P 2 такова, что, когда уровни PI (4,5) P 2 снижаются в SGs, обедненных Crb (путем снижения уровня Pten или используя его ингибитор VO-OHpic), подавляется образование PAMS (Рисунок 5), а также дефекты секреции (Рисунок 6).
Правда личинки на пару часов медленнее растут, но какое это имеет значение?
Рецензент даже не уверен, что такое PAMS. Являются ли они следствием расширения PM? Если да, то почему он инвагинирует внутрь? Также не образуются микроворсинки. Это как выглядит вытянутый ПМ? Почему не образуются микроворсинки? Белки TM, такие как Prominin, не доставляются должным образом? Связано ли это отсутствие доставки с уровнем PI (4,5) P2? Как Crumbs регулирует активность Pten?
В-третьих, ни одна микроскопия количественно не оценивается.В частности, PAMS кажутся довольно неоднородными, по крайней мере, от одного генотипа к другому. Они все одинаковые? Как пенетрант?
Наконец, некоторые разделы рукописи написаны напористо, и это следует исправить.
Эти точки подробно описаны ниже:
Подробные ответы на эти вопросы приведены ниже в конкретных комментариях.
Наш экспериментальный подход основан на органо-специфической KD Crb. Фактически, индуцированный системный нокдаун Crb смертелен.Дефекты секреции SG, вызванные потерей Crb, действительно имеют значение на уровне всего организма, как мы показываем путем количественной оценки влияния на скорость развития (Рисунок 1H, Рисунок 1 — добавление к рисунку 1KK и Рисунок 6W) и потребление пищи (Рисунок 6V). ). В то время как другие предполагали, что SGs могут быть незаменимыми для выживания личинок (Jones et al., 1998), наши анализы достаточно чувствительны, чтобы сообщить об этих эффектах. Важно отметить, что в работе Jones et al. (1998), некоторые технические детали анализов, представленных в таблице 2, отсутствуют (например, стадия выделения личинок, продолжительность анализа и условия инкубации), но, тем не менее, они сообщают о летальности 72.8% у трансгетерозиготных eyg C1 / eyg C53 личинок без протоков, что подчеркивает важность SG в выживании личинок.
Мы изменили структуру нашей рукописи, чтобы улучшить доставку нашего сообщения. Мы рассмотрели роль белков Rab в формировании PAMS (Рисунок 4 — рисунок в приложении 3) и важность правильной секреции для скорости окукливания и потребления пищи (Рисунок 6V, W). Мы включили анализ плотности микроворсинок (рис. 2M), а также размера и частоты PAMS (рис. 5 — приложение к рисунку 1E и подраздел «Crb регулирует уровни PI (4,5) P 2 в апикальной мембране») и включили эти пункты в нашу дискуссию об их значении и их связи с дефектами секреции.
Вместо Проминина мы проанализировали локализацию эндогенного Cadherin99C, белка TM, регулирующего структуру микроворсинок (Рисунок 1I, J и Рисунок 1 — приложение к рисунку 1CC, DD).
Мы предоставляем дополнительные доказательства того, что Crb регулирует уровни PI (4,5) P 2 , регулируя апикальную локализацию Ocrl (рис. 5L-Q), и обновили наше обсуждение связи между Crb, β Heavy -спектрином и MyosinV с Pten2. и о роли Crb в поддержании локализации Pten на апикальной мембране (Рисунок 5I-K).Мы предоставляем количественные оценки (и соответствующие исходные данные) наиболее важных данных микроскопии.
1) Выбор апикального груза проблематичен. Оба полагаются на универсальные зонды.
1.1) Первый — это CD8-RFP, который не является эндогенным белком и по умолчанию транспортируется к апикальной мембране.
Мы включаем анализ двух разных апикальных белков. Путем иммунолокализации эндогенного Cadherin99C и визуализации в реальном времени меченой Венерой версии Stranded at Second мы подтвердили наши предыдущие результаты с использованием CD8-RFP (рисунок 1, рисунок 1 — приложение к рисунку 1, рисунок 2 и рисунок 3).
Какие точки наблюдаются у мутанта Crumbs?
Скорее всего, они представляют собой эндосомы и лизосомы. Подобные точки также наблюдались в моделях для MVID (см., Например, Mosa et al., 2018). Другая опубликованная работа также предполагает, что нарушение секреции приводит к усилению лизосомальной активности по разложению накопленного материала. Мы включили этот пункт в подраздел «Crb регулирует организацию апикальной мембраны через апикальную цитокортекс».
1.2) Второй — лектин, ПНК, который связывает углеводную последовательность Gal-β (1-3) -GalNAc.
Рецензент, возможно, лучше поймет эту цифру, если меченую ПНК использовать в качестве инструмента маркировки (в качестве антитела). Вместо этого PNA экспрессируется как слитый белок GFP под контролем UAS. Поскольку у него нет сегмента TM, он локализуется в цитоплазме клеток слюнной железы.
Если это так, обозреватель не понимает, как он может связываться с гликопротеинами, поскольку их сахарные фрагменты находятся в просвете органелл (Гольджи) и обращены во внеклеточную среду, то есть вдали от ПНК.
В результате рецензент сильно озадачен тем, что точки представляют собой слюнные железы дикого типа. Более того, рецензент не понимает паттерн PNA, наблюдаемый у мутанта Crumbs? Яркие пятна PNA обращены к просвету трубки. Почему гликопротеины теперь присутствуют в ПМ? Рецензент не имеет представления о том, что наблюдается на этом рисунке с точки зрения транспорта гликопротеинов. ПНК вообще секретируется? Как?
Это не имело бы большого значения, но эти два инструмента используются во многих местах рукописи, и сделанные выводы убедительны.Следовательно, они должны быть задокументированы гораздо лучше и установить хороший стандарт для использования этого прокси.
Мы использовали линию PNA, перечисленную в Bloomington Stock Center, в качестве инструмента для анализа гликопротеинов. Однако у FlyBase нет дополнительной информации, чтобы прояснить опасения, поднятые рецензентом. Поэтому мы решили использовать другие доступные линии для анализа апикальной секреции. После тестирования разных линий мы решили повторить все эксперименты с использованием конструкции, содержащей хитин-связывающий домен серпентина, меченного GFP (UAS-SerpCBD-GFP).Эта конструкция является хорошо зарекомендовавшим себя апикальным секретируемым грузом и использовалась в качестве прокси для анализа апикальной секреции (Luschnig et al., 2006; Kakihara et al., 2008; Förster et al., 2010; Petkau et al., 2012; Dong et al., 2013; Dong et al., 2014; Bätz et al., 2014). Используя этот инструмент, мы подтвердили результаты, полученные с помощью линии PNA, и, таким образом, обменяли все цифры с цифрами, полученными с помощью SerpCBD-GFP (рисунок 1, рисунок 1 — дополнение к рисунку 1, рисунок 3, рисунок 3 — приложение к рисунку 2, рисунок 6). .
1.3) Кроме того, хотя большая часть рукописи выполнена с использованием эндогенных белков слюны (или эндогенно помеченных в геноме), почему авторы не исследовали эндогенный груз, такой как белки слюны Sgs1-8 (по крайней мере, некоторые из них). Или ORF, кодируемая геном Saliva.
Это явно апикальные грузы, и они были бы намного предпочтительнее искусственных, использованных в рукописи. Их секрецию следует наблюдать у мутанта Crumbs. Это было сделано косвенно при взвешивании личинок, которые не могут питаться пищей.
Как мы описали в рукописи, мы проанализировали слюнные железы на стадии, когда личинки питаются, то есть почти за два дня до того, как будет обнаружена экспрессия белков Sgs1-8. Следовательно, ни один из белков клея не пригоден для наших анализов, и действительно, потеря Crb не влияет на секрецию клея (см. Видео 1 и видео 2). Что касается предполагаемой ORF, кодируемой геном Saliva, важно отметить, что продукт этого гена не является частью слюны, но является трансмембранным переносчиком сахара, который высоко экспрессируется в слюнной железе (FlyBase).Из-за этого он был назван слюной, но не прогнозируется, что это секретируемый белок. См. Также ответ рецензенту №3, пункт 2.
1.4). Кроме того, что любопытно, ремоделирование апикальной PM происходит только у личинок, собирающих пищу, а не у блуждающих личинок, когда они начинают синтезировать и выделять клей. Тем не менее, нарушена ли секреция белка Glu у мутанта Crumbs?
Секреция клея (отслеживаемая после Sgs3-GFP) происходит нормально (см. Видео 1 и Видео 2). На самом деле куколки правильно прикрепляются к стенкам пузырьков.
2) Одним из явных фенотипов потери Crumbs в отношении выбора груза является потеря микроворсинок.
2.1) Это как выглядит вытянутый ПМ? Потеряв микроворсинки?
Мы количественно определили плотность микроворсинок (рис. 2M). К сожалению, мы не можем измерить абсолютных количества апикальных и боковых мембран, включая количество мембран в микроворсинках. Для этого потребуются специальные алгоритмы и вычислительный анализ, который выходит за рамки нашего исследования.Что касается того, как и почему не образуются микроворсинки, мы включили различные возможности в обновленный раздел «Обсуждение».
2.2) Почему не образуются микроворсинки? Белки TM, такие как Prominin, не доставляются должным образом? У млекопитающих он явно необходим для образования микроворсинок. Проминин и подобные проминину обязательно должны соблюдаться у мутантов WT и Crumbs (на самом деле проминин, по-видимому, генетически взаимодействует с Crumbs). Предполагается, что он должен доставляться к апикальной мембране и WT, а не к мутантам Crumbs.
Мы ценим предложения об использовании Проминина для анализа фенотипа микроворсинок, однако, согласно данным FlyBase, этот белок практически не экспрессируется в слюнных железах. Действительно, сообщалось о генетическом взаимодействии между Проминином и Крамбсом в глазах, где Проминин очень распространен. Вместо этого мы решили проанализировать локализацию Cadherin99C, белка, который регулирует длину микроворсинок (Chung and Andrew, 2014 и ссылки внутри). Наши результаты показывают, что Cad99C не локализуется должным образом в апикальном аспекте Crb дефицитных клеток (Рисунок 1 и Рисунок 1 — Приложение 1 к рисунку), и мы включили раздел Обсуждения об этих результатах.
2.3) Необходимо количественно определить плотность микроворсинок у мутантов WT и Crumbs. Только в этом случае авторы могут сказать, что это резкое снижение.
Мы количественно определили плотность микроворсинок (рис. 2M).
3) Фенотип Crumbs явно отличается от эмбрионов, у которых Crumbs выполняет функцию сохранения неповрежденной апико-базальной полярности, а также клеточной адгезии. Рецензент не понимает, почему это так и в чем заключается разница? Это из-за отсутствия микроворсинок?
Можно это проверить? Можно ли выдвинуть другую гипотезу для объяснения различий? А как насчет другого эпителия, такого как клетки фолликула?
Если рецензент ссылается на работу Chartier et al., 2011, который предполагает, что Crumbs контролирует целостность эпителия путем ингибирования Rac1 и PI3K, трудно дать конкретный ответ. Эта работа в основном опирается на генетические взаимодействия и анализ фенотипов кутикулы и не анализирует маркеры для PI (4,5) P 2 , компонентов цитоскелета, внутриклеточного трафика и не демонстрирует какой-либо ЭМ, чтобы получить представление о дефектах на клеточном уровне. Следовательно, трудно предположить, какая часть механизмов, описанных в нашей работе, может или не может быть вовлечена в эмбриональный фенотип.См. Также комментарий в пункте 6.1 ниже.
Что касается клеток фолликулов, взаимодействия между Crumbs, Moesin, aPkc и цитоскелетом оказались очень динамичными во время морфогенеза фолликулов. В этом случае роль Crb более сложна, поскольку этот белок, по-видимому, играет другие роли в морфогенезе эпителия, например в дорсальном закрытии у эмбриона Drosophila (Flores-Benitez and Knust, 2015, eLife ). Кроме того, хорошо известно, что Crb и другие белки полярности обладают тканеспецифическими функциями (Tepass, 2012; Flores-Benitez and Knust, 2016), некоторые из которых упоминаются в нашем введении и в разделе «Обсуждение».
4) PAMS — это инвагинации внутрь. Но степень их появления зависит от генетического фона. Иногда они кажутся большими и глубокими, а иногда нет.
4.1) Это требует серьезной количественной оценки для каждого фона, например, сколько клеток демонстрируют неглубокую инвагинацию, более глубокую и очень глубокую ямку с четким морфологическим определением? Например, некоторое истощение WT приводит к неглубоким инвагинациям. Это важно?
Мы количественно определили морфологию и частоту PAMS в различных генетических фонах, и результаты показаны на рисунке 5 — рисунок в приложении 1E, а также в подразделе «Crb регулирует уровни PI (4,5) P в апикальной мембране 2 » Мы также рассмотрели важность этих результатов в разделе «Обсуждение».Важно отметить, что на некоторых изображениях может показаться, что PAMS имеют разную глубину, но это также связано с перспективой, создаваемой в отдельных оптических сечениях и максимальных проекциях. Морфологию PAMS можно лучше понять в новом видео 8.
4.2) Некоторые PAM обнаружены полностью запечатанными и более недоступными? Это также должно быть определено количественно, так как это в большей степени связано с заболеванием.
Как показывает недавняя работа, эти тельца включения динамичны и могут образовываться на апикальной или базолатеральной мембране, а также в цитоплазме (см. Mosa et al., 2018). Мы включили этот момент в раздел «Обсуждение» в контексте динамики образования тел включения. См. Также ответ рецензенту №3, пункт 3.
4.3) Если большинство из них являются продолжением ПМ, в чем их актуальность? На что влияет секреция? Или два фенотипа не связаны? В этом отношении изучение проминина или любых других белков TM, участвующих в образовании микроворсинок, приведет к более четкому пониманию сообщения.
См. Ответ в пункте 2 выше.
5) В подразделе «Crb контролирует гомеостаз апикальной мембраны, отрицательно регулируя активность Pten», авторы заявляют, «кроме того, эти результаты показывают, что белковый комплекс Crb необходим для регуляции активности Pten в SG».
«…. Предполагает, что накопление PI (4,5) P 2 в железах Crb KD, вероятно, связано с увеличением активности Pten, а не с изменением его локализации».
Чтобы заявить об этом, активность Pten следует измерять напрямую, используя экстракты мутантных слюнных желез WT и Crumbs с известными субстратами, такими как PI (3,4,5) P3.Зонд, оценивающий уровень PI (3,4,5) P3, должен работать, если это невозможно сделать in vitro.
Несмотря на то, что имеются коммерчески доступные наборы для измерения уровней PI (4,5) P 2 и PI (3,4,5) P 3 , они требуют большого количества материала образца, который невозможно изолировать с помощью ручное рассечение личиночных слюнных желез. Кроме того, фосфоинозитиды — это очень временные молекулы с коротким временем жизни ex vivo. Мы использовали зонд для количественного определения уровней PI (3,4,5) P 3 , и результаты показаны на рисунке 5 — в приложении к рисунку 2D-F.Мы также количественно определили уровни PI (4,5) P 2 путем визуализации в реальном времени желез, экспрессирующих зонд для этого фосфолипида. Точно так же мы количественно оценили распределение Pten2-GFP и Ocrl-RFP (рисунок 5). По этим измерениям мы сделали более консервативные заявления и обновили наши выводы.
6) Pten участвует во многих различных путях. Это опухолевый супрессор, который негативно регулирует путь AKt.
6.1) Есть ли связь между PAMS и другим фенотипом?
Pten является основным негативным регулятором пути инсулина, и его активность предотвращает рекрутирование протеинкиназы B / AKT на плазматическую мембрану.Мы провели Вестерн-блоттинг, чтобы выяснить, изменяется ли фосфорилирование (активность) AKT в слюнных железах Crb KD. Мы проверили специфичность нашего анализа путем сверхэкспрессии PI3K, предполагая, что высокие уровни PI3K увеличивают уровни PI (3,4,5) P 3 и активируют AKT (т.е. GOF). В самом деле, усиление функции PI3K увеличивает как размер слюнных желез (как ожидалось, исходя из его роли в росте клеток — Scanga et al., 2000), так и количество фосфорилированного AKT (см. Изображение ответа автора 1, дорожка 1).Однако клетки слюнной железы дикого типа и Crb KD не проявляют детектируемой активности AKT (дорожки 3 и 4, соответственно), хотя фермент явно присутствует. Таким образом, мы заключаем, что увеличение PI (4,5) P 2 в Crb дефицитных клетках слюнных желез, по-видимому, не влияет существенно на передачу сигналов AKT.
Что касается роли Pten в качестве супрессора опухолей, мы не нашли никаких доказательств того, что пролиферация клеток модифицируется за счет потери Crb, и поскольку наши результаты предполагают, что активность Pten усиливается за счет потери Crb, можно было бы ожидать, что туморогенез подавляется, что трудно проверить в контексте нашей работы, которая проводилась в непролиферирующем эпителии.
6.2) Есть ли какие-нибудь мысли или данные о том, как Crumbs регулирует активность Pten? Они образуют комплекс
Мы провели эксперименты по иммунопреципитации и не обнаружили комплекса, содержащего Crumbs и Pten2. Мы также повторно проанализировали образцы масс-спектрометрических экспериментов по извлечению Crb и Sdt, проведенных в предыдущих исследованиях нашей лаборатории, и не нашли пептидов для Pten2 или каких-либо других явных кандидатов, которые могли бы опосредовать регуляцию Pten. Известно, что регуляция Pten чрезвычайно сложна (см., Например: PTEN Methods and Protocols, под редакцией Леонардо Салмена, DOI 10.1007 / 978-1-4939-3299-3), и мы рассмотрели этот вопрос в разделе «Обсуждение» и предоставили ссылки, которые идентифицировали β Heavy -Spectrin и MyosinV как взаимодействующие с Pten.
7) Раб:
7.1) Рецензент предлагает поместить эту часть после раздела PI (4,5) P 2 / Pten, поскольку переход от Myo5 к Rabs действительно резкий и не имеет большого смысла.
Спасибо за предложение, мы сделали переход более понятным.
7.2) Почему Rab35 не рассматривался, поскольку он также теряет свою апикальную локализацию у мутанта Crumbs?
Потеря апикального Rab35 не воспроизводима. Следовательно, соответствующая панель на рис. 4 — приложение 1 к рисунку заменена репрезентативным изображением, на котором апикальная локализация Rab35 видна в железах с дефицитом Crb.
7.3) Какую роль играют эти Rab возле апикальной мембраны? Они активны? Rabs опосредуют шаги мембранного трафика, и они, в частности, от TNG к PM (Rab6) или от эндосом к PM (Rab11), но ничего из этого не описывается и не тестируется.Как потеря Crumbs приводит к их неправильной локализации? Это только композиция PI (4,5) P2? Как? Приводит ли какое-либо истощение Rab к образованию PAMs?
Обнаруженные нами флуоресцентно меченные YFP белки Rab являются мембранно-ассоциированными активными белками Rab. Они связаны с GTP и регулируют множество этапов мембранного переноса. Цитоплазматические неактивные GDP-Rab образуют комплекс с «эскорт-белками», получившими название GDI. Для этого Rab-белки представляют собой локализованные связывающие платформы, способные рекрутировать специфические эффекторные белки (Caviglia et al., 2017). Интересно, что активированные Rab6, Rab11 и, вероятно, Rab30, как обнаружено, связывают MyoV (Lindsay et al., 2013). Таким образом, белки Rab и Crb могут иметь общие прямые взаимодействия. С другой стороны, Crb принимает непосредственное участие в организации ассоциированной с мембраной апикальной цитокортекса (см. Рисунок 2 и рисунок 2 — приложение к рисунку 1). Большая часть везикулярного транспорта осуществляется моторными белками, которые связаны с сетью тубулина (кинезин / динеин) или актина (миозины). Следовательно, локализация Rab белков близко к мембранному домену зависит также от организации цитоскелета (Eaton and Martin-Belmonte, 2014).
Известно, что фосфоинозитидный состав плазматической мембраны регулирует каждый шаг механизма мембранного движения (Mayinger, 2012; Martin, 2015; Posor, Eichhorn-Grünig and Haucke, 2015). Как мы пишем во введении, «PI (4,5) P 2 непосредственно участвует в регуляции экзоцитоза (Milosevic et al., 2005; Gong et al., 2005; Massarwa et al., 2009; Rousso et al., al., 2013) и при всех формах эндоцитоза (Antonescu et al., 2011; Mayinger, 2012; Jost et al., 1998) ».Однако, как мы также пишем в разделе «Обсуждение», мы не идентифицировали дефекты локализации Rab белков, участвующих в эндоцитарном пути.
Что касается роли белков Rab в формировании PAMS, мы показываем, что KD Rab11 ведет к образованию PAMS, подтверждая вывод, что дефектная апикальная секреция приводит к образованию PAMS (Рисунок 4 — приложение к рисунку 3).
Итак, в целом, рукопись представляет собой описание ряда факторов (связанных с сетью cytocortex-Rab), истощение которых приводит к PAMS.Но здесь очень мало механистических представлений или ощущения того, что является новым.
Связь между Crb и регуляцией фосфоинозитидов, а также потребность Crb в организации апикального аппарата секреции ранее не были описаны. Мы сделали это сообщение более ясным в рукописи. Более того, мы расширили доказательства, подтверждающие эти выводы, включив несколько новых экспериментов и количественных оценок, которые показывают, что эти взаимодействия важны для физиологии и развития личинок.
Рецензент № 2:
В этой статье авторы удаляют функцию Crb (или др. Комплексного белка Crb) в SG личинок среднего возраста и определяют последствия. Они отмечают, что многие аспекты организации SG остаются неизменными; общая морфология SG, полярность клеток, барьерная функция, а также локализация ряда белков, специфичных к мембранным доменам, кажутся в основном нормальными. Апикальная секреция как апикального мембранного белка (CD8-RFP), так и гликопротеинов (обнаруживаемых по связыванию PCNA) снижается, однако, с уменьшением Crb или с уменьшением Sdt (компонента комплекса Crb).Снижение Crb также приводит к снижению апикального накопления F-актина, βHeavy-Spectrin и MyoV (миозина, участвующего в секреции). Также наблюдается уменьшение апикальной локализации трех белков Rab, которые ранее участвовали в апикальной секреции: Rab6, Rab11 и Rab30. Снижение Crb также приводит к инвагинации апикального домена с образованием структур, которые авторы называют PAMS (PI (4,5) P2 и обогащенные Phospho-Moesin мешочки апикальной мембраны). Чтобы понять наблюдаемые молекулярные изменения, авторы также определили эффекты снижения βHeavy-Spectrin, MyoV и ферментов, участвующих в контроле уровней PI (4,5) P2 в клетках: Skittles (киназа PIP, которая вырабатывает PI (4 , 5) P2), Pten (который дефосфорилирует PI (3,4,5) P3 до PI (4,5) P2) и PI3K (который фосфорилирует PI (4,5) P2 с образованием PI (3,4,5) P3).Снижение βHeavy-Spectrin и MyoV также снижает секрецию и способствует образованию PAM, хотя и не до такого же уровня, как уменьшение Crb. Авт. Также показывают, что снижение активности Pten, а также увеличение P13K может снижать образование PAMs, связанных со сниженной функцией Crb, а также восстанавливать апикальную локализацию Rab6 и Rab11. Основываясь на этих экспериментальных результатах, авторы предлагают следующую модель: Crb необходим для поддержания надлежащего количества и организации апикального домена путем стабилизации апикальной цитокортекса (через βHeavy-Spectrin и F-actin), что Crb-βHeavy-Spectrin комплекс способствует апикальной секреции в SG личинки, поддерживая апикальный MyoV.Авторы также приходят к выводу, что Crb обычно ограничивает накопление PI (4,5) P2, ограничивая активность Pten (но не накопление Pten, поскольку уровни кажутся неизменными между контролями и нокдауном Crb).
1) Большинство фенотипов не поддается количественной оценке, и это необходимо. Когда авторы говорят, что образование PAM уменьшается или увеличивается или что секреция снижается, мы полагаемся на ограниченное количество изображений, которые могут быть показаны, и впечатление авторов о данных, а не на какую-либо количественную оценку.
В новой рукописи мы приводим количественные оценки и соответствующие исходные данные. Все статистические анализы описаны в разделе «Материалы и методы».
2) Авторы приводят веские аргументы в пользу того, что PI (4,5) P2 требуется для образования PAM, но они не представляют собой очень хорошие аргументы в пользу того, что Crb работает через Pten для увеличения уровней PI (4,5) P2. Из представленных изображений совсем не ясно, что общие уровни апикального PI (4,5) P2 выше при нокдауне Crb, чем в контрольных SG WT, хотя апикальное распределение, похоже, меняется — меньше в PM и больше. в PAM.Восстановление PI (4,5) P2 (который, как известно, связывает и активирует моэзин), действительно, по-видимому, снижает образование PAM, а увеличение PI (4,5) P2, по-видимому, увеличивает образование PAM, но это не указывает на то, что Crb обычно действует на ограничить активность Pten; это только говорит о том, что для потери фенотипа Crb требуются высокие уровни PI (4,5) P2. В самом деле, фенотипы сверхэкспрессии Pten, по-видимому, действительно увеличивают площадь апикального домена, но, по-видимому, не создают структуры, которые имеют ту же морфологию, что и PAMs.Итак, либо измените выводы / заголовок рукописи, либо предоставьте более убедительные доказательства того, что уровни PI (4,5) P2 действительно выше с потерей crb.
Мы обеспечиваем количественную оценку уровней PI (4,5) P 2 путем измерения интенсивности флуоресценции с использованием хорошо зарекомендовавшего себя зонда для PI (4,5) P 2 (см., Например, Jouette et al., 2019, eLife ). Кроме того, путем количественной оценки распределения сверхэкспрессированного Pten2, меченного GFP, мы обнаружили, что его распределение (апикально-латеральное отношение) снижается в слюнных железах с дефицитом Crb (Рисунок 5I-K).Кроме того, мы расширили наш анализ, включив в него инозитолполифосфат-5-фосфатазу Ocrl (окулоцереброренальный синдром Лоу), которая регулирует гомеостаз PI (4,5) P 2 путем дефосфорилирования PI (4,5) P 2 . Наши новые результаты показывают, что Ocrl локализуется в апикальной части клеток слюнной железы и что Crb необходим для апикальной локализации Ocrl. Соответственно, мы изменили название и выводы нашей рукописи, чтобы отразить, что Crumbs действительно участвует в регуляции метаболизма PI (4,5) P 2 на разных уровнях.
3) Skittles — не единственная киназа PIP, кодируемая в геноме Drosophila, что, возможно, объясняет относительно мягкие эффекты нокдауна Skittles на потерю фенотипов Crb. Авторы должны признать существование этого другого белка, когда они отмечают относительно мягкие эффекты.
Спасибо за предложение. Как отмечалось в предыдущем пункте, теперь мы включаем Ocrl в наш анализ.
4) Хотя авторы утверждают, что потеря Crb не влияет на AJs (на основе ПЭМ и иммуноокрашивания DE-cad), из изображений действительно видно, что уровни DE-cad, обнаруженные вблизи апикальной поверхности, заметно снижаются (возможно, имеется также усиление везикулярного окрашивания DE-cad).Таким образом, авторам необходимо взглянуть на это более внимательно и указать, что наблюдается некоторое уменьшение DE-cad, локализованного в AJ, или четко продемонстрировать, что уровни не затронуты.
Фактически, D E-cad уровни в AJ кажутся уменьшенными. При этом увеличивается внутриклеточная локализация. Мы думаем, что этот фенотип является проявлением дефектов механизма торговли людьми из-за потери Crb. KD D E-cad-GFP (нокаутный аллель) с использованием gfp RNAi эффективно снижал уровни D E-cad-GFP, но, что удивительно, распределение Dlg-mTagRFP и общее форма слюнных желез не нарушена.Таким образом, мы считаем, что снижение уровней D E-cad-GFP в AJ в железах с дефицитом Crumbs не способствует нарушению секреции, и что эти результаты являются избыточными для основного сообщения нашей рукописи и, следовательно, не добавляйте более актуальной информации к основным выводам. Поэтому мы удалили эти результаты и вместо этого использовали ЭМ-анализ, чтобы упростить рукопись.
5) По-видимому, существуют некоторые PAM с микроворсиноподобными структурами и другие аналогичные большие везикулярные структуры без микроворсинок.Последние встречаются только с нокдауном Crb или они также встречаются в элементах управления? Если они встречаются только в нокдауне Crb, то какими они должны быть?
Эти структуры напоминают лизосомы и также наблюдались в моделях MVID (см., Например, Mosa et al., 2018). В других работах также было высказано предположение, что нарушение секреции приводит к усилению лизосомальной активности по разложению накопленного материала. Мы включили эти точки в наши результаты (Рисунок 2 — приложение к рисунку 3 и подраздел «Crb регулирует организацию апикальной мембраны через апикальную цитокортекс»).
6) Это может быть сложно определить, но было бы полезно знать, действительно ли нокдаун Crb изменяет общую площадь апикальной поверхности. Имеют ли контрольные клетки SG такое же количество апикальной области, если в клетках с нокдауном Crb одна должна была включать апикальную область, обнаруженную внутри PAM? Это связано с наблюдением, что гофрированные перегородки в Crb knockdown SGs кажутся намного более извилистыми, чем у WT (Figure 1 — Figure Supplement 2), предполагая, что может быть увеличение мембраны в этих доменах.Это может указывать на то, что с потерей Crb часть апикальной мембраны превращается в базолатеральную мембрану.
Это прекрасная идея, но реализовать ее крайне сложно. Мы включили оценку плотности микроворсинок в клетках с дефицитом Crb, которые действительно имеют меньше микроворсинок по сравнению с контролем (рис. 2M). Кроме того, мы добавили количественную оценку апикальной поверхности на основе конфокальных z-стеков и ЭМ-анализов (Рисунок 5, Рисунок 5 — приложение к рисунку 1E, подраздел «Crb регулирует организацию апикальной мембраны через апикальную цитокортекс» и подраздел «Crb организует механизм апикальной транспортировки»). контролируя апикальные уровни PI (4,5) P 2 »).Тем не менее, без полной томограммы клетки слюнной железы невозможно узнать точное количество мембраны, присутствующей в каждом домене (конечно, предполагая, что мы разработаем вычислительные методы для извлечения необходимой информации из таких томограмм). Другие подходы к микроскопии сверхвысокого разрешения могут помочь измерить количество мембран в различных доменах, но эти методы ограничены из-за значительного размера клеток слюнных желез. Кроме того, у нас нет способа ответить, была ли часть мембраны, содержащаяся в больших лизосомах в железах с дефицитом Crb, изначально апикальной, латеральной или просто не передавалась в соответствующий домен и вместо этого была нацелена на деградацию.
7) Важно то, что это исследование показывает нам, что Crb делает то, что он, как известно, делает — контролирует баланс апикального и базолатерального доменов и дает некоторые ключи к разгадке механизма, или это исследование действительно раскрывает новую и несвязанную роль для Crb? В любом случае исследование интересно, но стоит изучить первую возможность, поскольку неясно, как Crb обычно контролирует апикальную спецификацию.
Функциональная связь между Crb и регуляцией фосфоинозитидов, а также потребность Crb в организации апикального аппарата секреции ранее не были описаны.Мы постарались сделать это сообщение более ясным в рукописи. Более того, мы расширили доказательства, подтверждающие эти выводы, включив несколько новых экспериментов и количественных оценок, которые показывают, что эти взаимодействия важны для физиологии и развития личинок. Что касается баланса апикальных и базолатеральных доменов, раскрытие молекулярных механизмов, лежащих в основе этой роли Crb, заслуживает рассмотрения в рамках совершенно нового проекта, поскольку мы даже не знаем, одинаковы ли эти механизмы в разных эпителиях и в разных стадиях развития. этапы.Тем не менее, мы добавили наши взгляды на эти моменты в раздел «Обсуждение», и мы также предполагаем, что наша работа могла бы предоставить молекулярные мишени для будущих исследований, понимающих физиологический контроль полярности эпителиальных клеток (подраздел «Crb организует апикальный механизм транспортировки, контролируя апикальный PI ( 4,5) П 2 уровней »). Также смотрите наш ответ на пункт 1 рецензента №3.
Рецензент № 3:
[…]
1) Все выводы относительно фенотипов с потерей функции: crb (e.грамм. «дефекты апикальной секреции не связаны с общим нарушением полярности клеток» или «эта стратегия не влияет на эмбриональное развитие») в настоящее время основаны на экспериментах по нокдауну. Они могут только уменьшать, а не отменять экспрессию Crb, и делают это на неопределенной в настоящее время точке развития. Клональная мутация crb в слюнных железах и / или эксперименты с временным контролируемым нокдауном позволили бы авторам сделать более убедительные выводы о роли Crb (или его отсутствии) в установлении и поддержании общей эпителиальной полярности в слюнной железе, а также об их временных потребностях. .В связи с этим были созданы разные линии fkh-Gal4s с различной экспрессией. Действительно ли выражение того, что использовалось в данном исследовании, ограничивается слюнными железами? Большинство линий также экспрессируются в других частях кишечника.
Линия fkh -GAL4, использованная в нашем исследовании, вызывает сильную экспрессию в слюнных железах и очень слабо в части задней кишки. Однако у эмбрионов crb NULL мутантов задняя кишка не поражается (Kumichel and Knust, 2014).Следовательно, на наши эксперименты с Crb KD, вероятно, не влияет какая-либо неправильная экспрессия fkh -Gal4.
Что касается нашей стратегии нокдауна, нокдаун Crb-RNAi сильно снижает уровни Crb (см. Рисунок 1 — приложение к рисунку 1). Таким образом, наше исследование больше основано на сенсибилизированном фоне Crb, чем на нулевой настройке crb .Однако пониженные уровни Crb позволяют нам более подробно исследовать процессы, регулируемые этим белком, поскольку полная потеря полярности является крайним фенотипом, при котором трудно анализировать более тонкие процессы. Чтобы исследовать, как полная абляция белка Crb регулирует морфологию слюнных желез, мы решили применить метод нокаута, опосредованный deGradFP. Долгосрочная потеря Crb за счет использования deGradFP-обусловленного нокаута (Caussinus et al., 2012) приводит к дефектам полярности. Мы использовали deGradFP в сочетании с системой GAL80 ts для контроля индукции нанотел путем смещения личинок до 29ºC.Мы использовали мух, экспрессирующих Crb-GFP во внутриклеточном или внеклеточном домене (Crb-GFP intra или CrbGFP extra , оба нокаут-аллеля). В этой экспериментальной установке мы обнаружили, что Crb-GFP intra больше не обнаруживается уже через 4 часа инкубации при 29ºC. Важно отметить, что даже после 7 часов при 29ºC железы не обнаруживают каких-либо серьезных морфологических дефектов. Только через 12 часов при 29ºC мы обнаружили дефекты морфологии слюнных желез (скобка на изображении ответа автора 4).Важно отметить, что высокая эффективность нанотел в слюнной железе также может быть связана с очень низкой скоростью обмена Crb на апикальной мембране слюнных желез личинок (Bajur and Knust, 2019). Как и ожидалось, нанотела не влияют на локализацию Crb-GFP extra .
Чтобы дополнить эти наблюдения и проанализировать возможные дефекты полярности в более ранние времена, мы использовали животных, экспрессирующих D E-cad-mTomato (нокаут-аллель).В этом случае мы использовали опосредованный deGradFP нокаут Crb-GFP без GAL80 ts . Фактически, личинки, выращенные при 29ºC, экспрессирующие нанотела и Crb-GFP intra , меньше, чем их контрольные аналоги, экспрессирующие нанотела с Crb-GFP extra . У этих животных железы выглядят сильно деформированными и дезорганизованными (не показаны). Однако, если мы поддерживали личинок при температуре 19-20ºC, чтобы ограничить активность GAL4, можно было получить личинок с нормально выглядящими слюнными железами.В этих условиях мы контролировали эффекты deGradFP-опосредованного нокаута путем инкубации личинок раннего третьего возраста (кормление животных, не блуждающих) в течение 4 или 7 часов при 29ºC. Как показано на проекциях Z-max на изображении ответа автора 5, через 7 часов Crb-GFP intra не обнаруживается на апикальной мембране. Несмотря на это, D E-cad-mTomato по-прежнему локализован по той же схеме, что и в элементах управления.
В совокупности полная потеря Crb в дифференцированных клетках фатальна и является результатом воздействия многих клеточных процессов.Наш «более мягкий» фенотип crb позволил нам идентифицировать более тонкие дефекты в молекулярных сетях, ранее не связанных с Crb, но важные для физиологии животного.
2) Авторы очень поверхностно исследуют физиологические аспекты Crb-опосредованной секреции слюнных желез. Мне это показалось упущенной возможностью. Если они хотят сделать какие-либо утверждения о том, что Crb регулирует «физиологическую активность слюнной железы» или способствует «эффективной апикальной секреции гликопротеинов» (как в настоящее время заявлено в аннотации), авторам необходимо продемонстрировать влияние на эндогенную секрецию — например, с помощью визуализация эффекта нокдауна crb на белок, обычно секретируемый слюнной железой.В связи с этим авторы предполагают, но не показывают снижения потребления пищи после нокдауна специфического для слюнных желез crb. Снижается ли потребление пищи после нокдауна CRB? Спасает ли Pten knockdown нарушения времени кормления и развития личинок crb knockdown? Наконец, что происходит с экспрессией / локализацией Crb и / или нижележащими мишенями вокруг слюны, чтобы связать переключатель? Другими словами, является ли Crb допустимым или поучительным в контексте секреции слюнных желез?
Мы проанализировали, помогает ли спасение секреции путем нокдауна Pten окукливание и питание личинок (рис. 6).Наши новые результаты подтверждают вывод о том, что дефекты апикальной секреции в слюнных железах опосредуются увеличением PI (4,5) P 2 , поскольку нокдаун Pten подавляет задержку окукливания, в то время как нокдаун Pi3K задерживает окукливание даже больше, чем только нокдаун Crb (рис. 6W). Кроме того, мы оценили потребление пищи, адаптировав протокол, описанный в Deshpande et al., 2014, всего в этом эксперименте было использовано 3060 личинок. Мы обнаружили, что нокдаун Crb имеет тенденцию к снижению потребления пищи, хотя и не является статистически значимым (рис. 6V).Важно отметить, что нокдаун Pten увеличивает потребление пищи, даже когда одновременно подавляется Crb (рис. 6V).
Что касается локализации Crb во время перехода к секреции клея, то белок остается апикальным во время этих стадий (см. Изображение ответа автора 6).
Мы понимаем, что было бы идеально следить за белком, который обычно секретируется слюнными железами.К сожалению, на этапах разработки, которые мы проводили в нашем анализе, эндогенный груз не был охарактеризован. Фактически, секреция клея происходит почти через 2 дня после анализируемых нами стадий (видео 1 и видео 2). Мы пересмотрели транскриптомные данные FlyBase и нашли возможные гены-кандидаты, которые могут кодировать секретируемые белки, включая муцины, лизоцимы и хитиназы (ORF Saliva, предложенная рецензентом № 1, предположительно является трансмембранным переносчиком сахара, а не секретируемым белком). Однако ни один из муцинов, лизоцимов и хитиназ не был охарактеризован, и нет доступных антител или линий вставки (т.е.е. MiMIC), что позволит нам легко генерировать белки, меченные GFP. Таким образом, установление, характеристика и проверка этих возможных секретируемых белков выходит за рамки нашей рукописи.
Как также отметил рецензент №1, зонд PNA-GFP, который мы использовали в качестве заместителя для секреции, недостаточно охарактеризован. Поэтому мы провели скрининг других линий, используемых для отслеживания апикальной секреции, и решили повторить весь эксперимент, проведенный с зондом PNA-GFP, используя вместо этого конструкцию, содержащую хитин-связывающий домен серпентина, помеченный GFP (UAS-SerpCBD-GFP).Эта конструкция является хорошо зарекомендовавшим себя апикальным секретируемым грузом и использовалась в качестве прокси для анализа апикальной секреции (Luschnig et al., 2006; Kakihara et al., 2008; Förster et al., 2010; Petkau et al., 2012; Dong et al., 2013; Dong et al., 2014; Bätz et al., 2014). Используя этот инструмент, мы подтвердили результаты, полученные с помощью линии PNA, и, таким образом, заменили все цифры на полученные с помощью SerpCBD-GFP (Рисунок 1, Рисунок 1 — дополнение к рисунку 1, Рисунок 3, Рисунок 3 — Приложение 2, Рисунок 6).
3) Авторы должны попытаться исключить повышенный эндоцитоз (а не снижение апикальной секреции) как одну из причин наблюдаемых фенотипов; мне кажется, что по крайней мере некоторые из мишеней Rab участвуют в рециркуляции, а также в секреции. Кроме того, появление этих новых внутриклеточных микроворсинок, содержащих мешочки, и одновременное снижение плотности микроворсинок на поверхности клетки также могут быть совместимы с повышенным эндоцитозом; Я не специалист в этом, но, насколько я знаю, микроворсинки не «передаются» на мембрану в секреторных отделах? В связи с этим может быть информативным проверить Rab-сигнатуру мешочков PAM в обоих нокдаунах Crb / β-Spectrin — может ли это пролить свет на происхождение этих компартментов?
Мы исследовали роль эндоцитоза тремя способами.Используя термочувствительный аллель динамина ( Shi ts ), инкубацию ex vivo желез с Dynasore (клеточно-проницаемый ингибитор динамина) и сверхэкспрессию доминантно активной (DA) или доминантно неактивной (DN) форм Rab5 .
Для первого захода мы сгенерировали следующие мухи:
— Ши тс ; UAS-crb [RNAi]
— Ши тс ;; fkh-GAL4> UAS-SerpCBD-GFP
— Ши тс ;; fkh-GAL4> UAS-PLC d -PH-EGFP
Все поголовья содержались при температуре 19-20ºC, так как жизнеспособность взрослых особей очень быстро снижается при температуре> 24ºC.Чтобы проанализировать роль динамина в фенотипах Crb, мы поставили кресты (указанные ниже) и держали их при 19-20ºC. Яйца собирали в течение ночи, а затем переносили при 28ºC ( Shi ts личинок погибают при 29ºC), где их инкубировали в течение 2 дней. Важно отметить, что создание этих запасов, а также тестирование различных итераций для этого эксперимента потребовало нескольких месяцев. Слюнные железы иссекали на третий день на ледяной среде Грейса, а затем анализировали с помощью визуализации в реальном времени:
Для SerpCBD-GFP:
Control w *: w * ;; fkh-GAL4> UAS-SerpCBD-GFP X w * / ⦢
crb RNAi w *: w * ;; fkh-GAL4> UAS-SerpCBD-GFP X w * / ⦢; UAS-crb [RNAi] Control Shi ts : Shi ts ;; fkh-GAL4> UAS-SerpCBD-GFP X Shi ts / ⦢
crb RNAi Shi ts : Shi ts ;; fkh-GAL4> UAS-SerpCBD-GFP X Shi ts / ⦢; UAS-crb [RNAi]
Для UAS-PLCd-PH-EGFP:
Control w *: w * ;; fkh-GAL4> UAS-PLCd-PH-EGFP X w * / ⦢
crb RNAi w *: w * ;; fkh-GAL4> UAS-PLCd-PH-EGFP X w * / ⦢; UAS-crb [RNAi]
Control Shi ts : Shi ts ;; fkh-GAL4> UAS-PLCd-PH-EGFP X Shi ts / ⦢
crbRNAi Shits: Shi ts ;; fkh-GAL4> UAS-PLCd-PH-EGFP X Shi ts / ⦢; UAS-crb [RNAi]
Репрезентативные изображения полученных результатов показаны на изображении ответа автора 7.Таким образом, дефект секреции, оцененный с помощью SerpCBD-GFP, по-видимому, улучшился на фоне Shi ts . Однако на фоне Shi ts образование PAMS не подавляется полностью. Следует отметить, что эти результаты не изменяются при дальнейшей инкубации рассеченных желез в течение 15 минут при 37 ° C (чтобы убедиться, что Shi ts полностью ингибируется).
Для второго подхода, инкубации ex vivo желез с Dynasore, все анализы были противоречивыми, и нельзя было прийти к твердому выводу о роли динамина.
Для третьего подхода мы проанализировали образование PAMS, индуцированное Crb KD в железах, коэкспрессирующих Rab5 DA или Rab5 DN. Однако мы получили противоречивые результаты, поскольку мы обнаружили усиление или подавление фенотипа PAMS с помощью Rab5 DA или Rab5 DN. Это может быть связано с плейотропными эффектами доминантных версий белков Rab, которые имеют тенденцию к титрованию эффекторов и регуляторов, общих с другими белками Rab (например, Rab4).
Эти результаты предполагают, что опосредованный динамином эндоцитоз может быть вовлечен в дефекты, наблюдаемые в железах с дефицитом Crb, и, соответственно, мы добавили эти пункты в наш раздел обсуждения.Однако описание точной роли эндоцитоза в фенотипах, вызванных потерей Crb в слюнных железах, выходит за рамки данной рукописи. В самом деле, мы думаем, что эти наблюдения заслуживают систематического анализа, который сделает текущую рукопись слишком большой, чтобы ее можно было понять. Что касается второй части или вопроса, об образовании внутриклеточных пузырьков, содержащих микроворсинки. Как мы описываем в нашей рукописи, эти включения напоминают включения, обнаруженные в кишечнике пациентов с МВИД.Имеются опубликованные работы, которые предоставляют генетические доказательства, подтверждающие гипотезу о том, что дефекты апикального транспорта приводят к образованию подобных тел микроворсинок с включениями (Feng et al., 2017; Knowles et al., 2014; Knowles et al., 2015; Mosa et al. ., 2018; Müller et al., 2008; Ruemmele et al., 2010; Sato et al., 2007; Schneeberger et al., 2015; Sidhaye et al., 2016; Weis et al., 2016).
Механизм образования этих включений неизвестен, но рецензент ссылается на недавнюю работу (Mosa et al., 2018), в которых кишечные органоиды использовались для анализа образования микроворсинок. Используя живую визуализацию, Mosa et al. показывают, что эти тельца включения динамичны и могут образовываться внутри цитоплазмы или происходить из апикальных или базолатеральных мембран, а также сливаться с апикальной или базолатеральной мембраной или коллапсировать внутри клетки. Временной масштаб от образования этих включений до момента отрыва или схлопывания составляет несколько часов. Их результаты предполагают, что действительно микроворсинки могут собираться внутри цитоплазмы и перемещаться к плазматической мембране.Тем не менее, мы не думаем, что внутриклеточное образование микроворсинок происходит в нашей экспериментальной модели. Вместо этого мы наблюдали некоторые большие внутриклеточные везикулы, но это, вероятно, PAMS, которые отслаивались или отщеплялись от апикальной мембраны. Однако мы не смогли проследить эти события в наших экспериментах по визуализации в реальном времени, так как они могут происходить очень спорадически и в течение длительного периода времени (часы). Мы включили эту дополнительную информацию в наш раздел «Обсуждение».
Наконец, что касается подписи Rab для PAMS, мы не смогли определить подпись Rab для PAMS.Как показано на Рисунке 4 (приложение 1 к рисунку), никакой специфический белок Rab не накапливался в компартменте, аналогичном тому, который отмечен репортером PI (4,5) P 2 или фосфо-моэзином.
https://doi.org/10.7554/eLife.50900.sa2Обсуждение с руководителями передового опыта в резиновой крошке
Редмонд Кларк, генеральный директор CBL Industrial Services, сказал, что переработке или перемещению иерархии EPA уделяется не так много внимания. Он больше ориентирован на устранение проблем, чем на то, чтобы позволить рынкам развиваться самостоятельно.
Он сказал, что к этому рынку приближаются несколько «астероидов».
Новое поколение экологических норм придет в индустрию производства шин, которая перейдет в индустрию переработки шин, сказал Кларк. Кроме того, некоторые фундаментальные изменения повлияют на экономику США, а также на мировую экономику.
«Итак, когда мы говорим об изменении климата, вы должны понимать, что изменение климата на самом деле не просто изменение климата», — сказал Кларк.
«Это признание того, что устойчивое развитие должно стать частью этики деятельности каждой корпорации».
Кларк сказал, что население растет настолько, что город размером с Чикаго можно «строить каждые три недели в течение следующих 35 лет, чтобы не отставать от того, что уже есть в картах для развития населения».
По его словам, поскольку глобальный средний класс продолжает расти, спрос на все экологические системы будет расти. Инициативы в области устойчивого развития признают, что мир не может терпеть рост в том виде, в каком он происходит, и ограничивают углеродное топливо.
По словам Кларка, это повлияет на шинную промышленность, поскольку углеродное топливо будет использоваться для более легких автомобилей, а это означает, что шины будут служить дольше.
«Когда шины будут готовы, он изменит положение шин», — добавил он.
Будет затронуто предложение шинной промышленности, а также утилизация и переработка отходов.
В настоящее время около 57-60 миллионов шин используются для производства резиновой крошки внутри страны, сказал Кларк, из которых около 10 процентов используется для производства асфальта.Он сказал, что существуют и другие возможности для более продуктивного использования большего количества каучука менее экологически чистыми способами, такими как утилизация или сжигание.
«Мы должны найти способ заставить эти системы работать и найти способ добиться их принятия в большом количестве государств», — сказал он.
Кларк сказал, что важно узнать, чего хочет заказчик. Одним из крупных заказчиков рынка прорезиненного асфальта являются государственные службы транспорта.
Существует два способа использования резиновой крошки в асфальте — сухой и мокрый.Мокрый процесс включает смешивание каучука с жидким битумом перед его смешиванием с заполнителем, а затем его обработку и т. Д.
Сухой процесс, известный как заводской процесс, включает одновременное смешивание каучука и асфальта. Кларк сказал, что смеси не нужно сидеть, чтобы она переварилась.
При мокром процессе, по его словам, чем выше процент резины, тем более липкий продукт, поэтому для его укладки требуется специальное оборудование. Однако, если количество резиновой крошки в смеси уменьшается, можно использовать стандартное оборудование для нанесения.
По словам Кларка, для процесса сухой смеси не требуется специального оборудования.
Кларк сказал, что дни размышлений о том, закончились ли работы по производству прорезиненного асфальта. Пока соблюдаются некоторые рекомендации, соединение будет успешным.
«Рынки… говорят нам, что мы делаем правильно, а что — нет», — сказал он.
Например, государственный DOT может диктовать, какие процессы могут выполняться на дорогах. Кларк сказал, что в Калифорнии, штат решил, что резина должна использоваться в асфальте, точка.Другие штаты согласны, в то время как другие решили позволить рынку разобраться.
В 2006 году Департамент транспорта Флориды решил использовать каучук в асфальте, сказал Кларк. Рекомендуется использовать мокрый способ, но можно использовать резину или модифицированный полимером асфальт. По его словам, программа хорошо себя зарекомендовала.
«Что касается Флориды, то дороги постоянно улучшаются», — добавил Кларк.
Пользователи начали понимать, что резина может быть более сложной в мокром процессе. Если раньше смесь состояла на 2/3 из каучука и на 1/3 из полимера, то в 2013 году эти соотношения изменились на противоположные.
Вот почему так важно понимать каждый рынок, сказал Кларк. По словам Кларка, например, прорезиненный асфальт в Джорджии работает лучше, но Департамент транспорта Джорджии разрешает использовать сухой способ.
Фредерик Дуглас о том, как рабовладельцы использовали еду в качестве средства контроля: соль: NPR
Американский писатель, аболиционист и оратор Фредерик Дуглас редактирует дневник за своим столом, конец 1870-х годов.Дуглас остро ощущал себя литературным свидетелем бесчеловечного института рабства, от которого он сбежал в молодости. Он позаботился о том, чтобы задокументировать свою жизнь не в одной, а в трех автобиографиях. Архив Халтона / Getty Images скрыть подпись
переключить подпись Архив Халтона / Getty ImagesАмериканский писатель, аболиционист и оратор Фредерик Дуглас редактирует дневник за своим столом, конец 1870-х годов.Дуглас остро ощущал себя литературным свидетелем бесчеловечного института рабства, от которого он сбежал в молодости. Он позаботился о том, чтобы задокументировать свою жизнь не в одной, а в трех автобиографиях.
Архив Халтона / Getty ImagesПрезидент Трамп недавно охарактеризовал Фредерика Дугласа как «пример человека, который проделал потрясающую работу и, как я заметил, получает все большее признание». Беспорядочное напряжение президента — прозвучало так, будто аболиционист 19-го века жив с галопирующим Твиттером — вызвало некоторое веселье в социальных сетях.Но внимание к одному из великих моральных героев Америки приветствуется.
Дуглас родился на плантации в Восточном Мэриленде в 1817 или 1818 году — он не знал своего дня рождения, не говоря уже о том, что у него было полное свидетельство о рождении — от черной матери (с которой его разлучили в детстве) и белой отец (которого он никогда не знал и который, вероятно, был «хозяином» в доме). Его распределили для обслуживания разных членов семьи. Его детство было отмечено голодом и холодом, а подростковые годы прошли в одном долгом периоде каторжных работ, коматозной усталости, рутинных порок, голода и других банальных пыток из справочника рабства.
В 20 лет он сбежал в Нью-Йорк и начал свою новую жизнь в качестве оратора и активиста, выступающего против рабства. Остро осознавая, что является литературным свидетелем бесчеловечного учреждения, из которого он сбежал, он позаботился о том, чтобы задокументировать свою жизнь не в одной, а в трех автобиографиях. Его мемуары оживляют безнравственную механику рабства и его оружие контроля. Главный из них: еда.
Голод был верным спутником юного Фреда в детстве.«Меня часто так мучил голод, что я боролся с собакой -« Старый Нэп »- за мельчайшие крошки, упавшие с кухонного стола, и был рад, когда выиграл хоть одну крошку в бою», — сказал он. написал в My Bondage and My Freedom . «Много раз я нетерпеливым шагом следил за ожидавшей девушкой, когда она выходила встряхивать скатерть, чтобы выбросить крошки и мелкие кости для кошек».
Будучи юным порабощенным мальчиком в Балтиморе, Фредерик Дуглас обменивал куски хлеба на уроки грамотности.Его учителями были белые соседские дети, которые умели читать и писать, но не ели. В 20 лет он сбежал в Нью-Йорк и начал свою новую жизнь в качестве оратора и активиста, выступающего против рабства. Архив Халтона / Getty Images скрыть подпись
переключить подпись Архив Халтона / Getty ImagesБудучи юным порабощенным мальчиком в Балтиморе, Фредерик Дуглас обменивал куски хлеба на уроки грамотности.Его учителями были белые соседские дети, которые умели читать и писать, но не ели. В 20 лет он сбежал в Нью-Йорк и начал свою новую жизнь в качестве оратора и активиста, выступающего против рабства.
Архив Халтона / Getty Images«Ничего, дорогая, наступит лучший день», — говорили старейшины, утешая мальчика-сироту. Ребенку приходилось соревноваться не только с домашними животными. Одна из самых унизительных сцен в первых мемуарах Дугласа «Рассказ о жизни Фредерика Дугласа , » описывает то, как он ел:
«Наша еда была вареной кукурузной мукой грубого помола.Это называлось Mush . Его клали в большой деревянный поднос или корыто и ставили на землю. Затем звали детей, как многие свиньи, и они, как многие свиньи, приходили и пожирали кашу; одни с устричными раковинами, другие с кусочками гонта, третьи — голыми руками, и никто — ложками. Тот, кто ел быстрее всех, получал больше; тот, кто был сильнейшим, получил лучшее место; и мало кто оставил желоб довольными ».
Дуглас ставит своей целью опровергнуть хвастливую ложь рабовладельцев, которая сохраняется и по сей день, о том, что «их рабы пользуются большим физическим комфортом, чем крестьянство любой страны мира.«
По правде говоря, рационы состояли из ежемесячного пособия в размере бушеля кукурузы третьего сорта, маринованной свинины (которая« часто была испорчена ») и« сельди самого низкого качества »- едва хватало на то, чтобы поддерживать взрослых мужчин и женщин в их изнурительном труде. в поле. Однако не все порабощенные были так плохо кормились. Ожидание за «сверкающим столом в большом доме» — столом, загруженным отборным мясом, дарами Чесапикского залива, тарелками фруктов, спаржей и т. д. сельдерей и цветная капуста, сыр, масло, сливки, лучшие вина и бренди из Франции — это группа черных слуг, выбранных за их преданность и красивую внешность.Эти блестящие слуги составляли «своего рода черную аристократию», — писал Дуглас. Возвысив их, рабовладелец разыграл старый трюк «разделяй и властвуй», и это сработало. Разница, писал Дуглас, «между этими избранными и убитыми горем и голодными массами квартала и поля была огромна».
«Оскверненные от голода массы» делали все возможное, чтобы пополнить свой скудный рацион. «Они сделали это путем охоты, рыбалки, выращивания собственных овощей или воровства», — говорит Фредерик Дуглас Опи, профессор истории и кулинарии в колледже Бэбсона, который, конечно же, назван в честь активиста.«В своей моральной вселенной они чувствовали:« Ты украл меня, ты плохо со мной обращался, поэтому воровать у тебя вполне нормально ». «Если поймали, скажем, за поеданием апельсина из обильного фруктового сада хозяина, наказанием была порка. Когда даже это оказалось тщетным, вокруг запретного плода была возведена смоляная ограда. Главный садовник жестоко хлестал любого, на чьем теле был хоть малейший след дегтя.
Но если лишение было одной из форм контроля, то гораздо более коварным и злонамеренным были ежегодные рождественские каникулы, когда обжорство и запой были почти обязательными.В течение этих шести дней порабощенные могли делать то, что они выбрали, и хотя некоторые из них проводили время с далекой семьей, охотились или работали по дому, большинство из них были счастливы заниматься спортом, «играть на скрипке, танцевать и пить виски». Последний способ проведения времени был, безусловно, самым приятным для чувств наших хозяев … Считалось позором не напиться на Рождество ». Чтобы поощрить любителей виски, «мастера» сделали ставки, чтобы увидеть, кто сможет выпить больше всего виски, тем самым «заставив множество людей напиться до избытка».«
Фредерик Дуглас, около 1879 года. Джордж Уоррен / Национальный архив скрыть подпись
переключить подпись Джордж Уоррен / Национальный архивФредерик Дуглас, около 1879 года.
Джордж Уоррен / Национальный архивГнусная цель этих пирушек состояла в том, чтобы приравнять распущенность к свободе. В конце праздников, чувствуя тошноту от чрезмерного употребления алкоголя, мужчины с похмелья почувствовали, «что мы почти так же были рабами человека, как и рома». Итак, писал Дуглас, «мы, пошатываясь, выбрались из грязи нашего валяния, глубоко вздохнули и двинулись в поле — чувствуя, в целом, довольно рады уйти от того, что наш хозяин обманул нас, в убеждение, было свобода, обратно в объятия рабства.
Дуглас еще больше злится на эти обязательные оргии — он называет их «неотъемлемой частью грубого мошенничества, зла и бесчеловечности рабства» — чем на другие, более прямые формы жестокости.
хлеб и цирк, — говорит Опи. — Рабам также давали алкогольные напитки, поэтому у них не было времени думать о побеге. Если не брали, считали неблагодарным. Это была форма социального контроля ».
Когда ему было около 8 лет, Дугласа отправили в Балтимор, что оказалось поворотным моментом.Хозяйка подарила ему самый ценный подарок в его жизни — научила его алфавиту. Но когда муж запретил ей продолжать — учить рабов читать и писать было преступлением — она немедленно прекратила его уроки.
Было уже слишком поздно. Маленький мальчик получил возможность заглянуть в преобразующий мир слов и отчаянно хотел учиться. Он делал это, обменивая куски хлеба — у него был свободный доступ к нему; в Балтиморе городские кодексы рабства были менее суровы, чем в сельском Мэриленде — для уроков грамотности.Его учителями были белые соседские дети, которые умели читать и писать, но не ели. «Этот хлеб я давал голодным маленьким мальчишкам, которые взамен давали мне более ценный хлеб знаний», — написал Дуглас в одной из самых трогательных строк в «Повествовании ».
«Это также показывает изобретательность порабощенных людей, — говорит Опи, — и то, как они обманывали и использовали то немногое, что им приходилось продвигаться вперед».
Сегодня, когда думаешь о Фредерике Дугласе, на ум приходит образ выдающегося седовласого человека в двубортном костюме.Трудно представить его полуголодным мальчиком, одетым только в грубую рубашку до колен, спящим на полу в украденном им кукурузном мешке. Как он писал в «Повествовании » «»: «Мои ноги так потрескались от мороза, что перо, которым я пишу, могло оказаться в ранах».
Это душераздирающий образ, который можно исправить одним коротким словом «перо». Ручка, которой он владел со страстью, ясностью и иронией, чтобы вырвать жизнь из рабства.
Нина Мартирис — журналист из Ноксвилля, штат Теннеси.
.