Курсовая работа: Диагностика стафилококковых инфекций. Реферат на тему стафилококковая инфекция

Стафилококки - (реферат)

Уже сейчас на сайте вы можете воспользоваться более чем 20 000 рефератами, докладами, шпаргалками, курсовыми и дипломными работами.Присылайте нам свои новые работы и мы их обязательно опубликуем. Давайте продолжим создавать нашу коллекцию рефератов вместе!!!

Вы согласны передать свой реферат (диплом, курсовую работу и т.п.), а также дальнейшие права на хранение,  и распространение данного документа администрации сервера "mcvouo.ru"?

Дата добавления: март 2006г.

    Стафилококки    Общая характеристика.

Стафилококки обычно встречаются в виде скоплений, напоминающих виноградную гроздь. Отдельные кокки, приметно 1 мкм в диаметре, имеют тенденцию объединяться в скопления, поскольку их деление происходит в трех взаимно перпендикулярных плоскостях и дочерние клетки сохраняют своеобразное пространственное групповое взаиморасположение. При специальных условиях они могут располагаться поодиночке, попарно, или в виде коротких цепочек. Они грамположительны, неподвижны, не образуют спор и активно растут практически на всех искусственных средах, обычно образуя непрозрачные, гладкие, блестящие колонии.

Поскольку стафилококки продуцируют каталазу, перекись водорода, образующаяся как метаболит при аэробных условиях, для них не токсична, и, большей частью, они лучше растут в присутствии кислорода. Однако, они легко переносят отсутствие кислорода, а некоторые из них даже являются строгими анаэробами. Они лучше растут при температуре 25– 35°С, но могут расти и при 8° и при температуре выше 48°С. При культивировании на кровяном агаре в аэробных условиях образуют пигменты –от золотистого до лимонно желтого и белого цвета. Золотистый пигмент дал название одному из видов стафилококка–Staphylococcus aureus. Однако, при этом, некоторые штаммы золотистого стафилококка могут продуцировать и белый пигмент.

Стафилококки устойчивее других бактерий к действию жара, света, высушивания, экстремальных температур и химических агентов. Они выдерживают 60°С в течение часа, а отдельные штаммы даже 80°С в течение 30 минут, хотя большинство вегетативных форм бактерий погибают при воздействии 60°С в течение 30 минут. Благодаря своей устойчивости к высушиванию стафилококки могут переноситься с частицами пыли, могут недели и месяцы сохраняться в высохшем гное или мокроте. Другой особенностью стафилококков является их устойчивость в солевой среде (не погибают при концентрации NaCl до 15%). В связи с этим способны сохраняться в консервированных продуктах (пресервах). В продуктах питания, сохраняемых путем соления, стафилококки могут расти и продуцировать энтеротоксин. Эти микробы устойчивы к действию фенола и большинству других дезинфектантов, чувствительны к основным красителям. Имеют тенденцию к формированию резистентности к сульфаниламидам и антибиотикам. Около 80% штаммов Staphylococcus aureus резистентны к пенициллину.

    Род Staphylococcus представлен тремя видами:    1. Staphylococcus aureus;    2. Staphylococcus epidermidis;    3. Staphylococcus saprophyticus.

Виды различаются преимущественно по биохимическим свойствам и вырабатываемым ферментам. Staphylococcus aureus ферментирует манит в анаэробных условиях и продуцирует коагулазу, тогда как два других вида лишены этих свойств. Staphylococcus saprophyticus –первично сапрофитический, о чем свидетельствует его название. Он, по-видимому, является потенциально патогенным, обладает ограниченной инвазивностью. Способен вызывать инфекцию мочевого тракта.

    Токсические продукты.

Стафилококк вырабатывает много продуктов с выраженными токсическими свойствами. Вероятно, никакой другой микроб не продуцирует их в таком количестве. Среди них экстрацеллюлярные токсины, гемолизины (стафилолизины), ферменты. Все они, в той или иной степени, обусловливают болезнетворность и вирулентность микроба. Ни один штамм не способен вырабатывать все токсические продукты сразу. Гемолизины –это экзотоксины, действующие непосредственно на клеточную мембрану, вследствие чего происходит лизис эритроцитов, лейкоцитов, тромбоцитов макрофагов и развивается поражение многих тканей. Действием гемолизина, вероятно, объясняются фатальные исходы многих случаев стафилококковых инфекций. При росте культуры стафилококка на кровяном агаре гемолиз проявляется в виде зоны просветления (бета–гемолиз). В отличие от стрептококка, стафилококк не вызывает частичный гемолиз (альфа–гемолиз). Следует отметить, что греческие буквы используются для обозначения иммунологически различающихся типов стафилококковых гемолизинов, в то время как у стрептококков эти буквы обозначают тип гемолиза– полный, или неполный. Например, гемолизин, обозначаемый как альфа – гемолизин (альфа – лизин, альфа –токсин) у стафилококков означает наличие светлой зоны вокруг колоний на кровяном агаре.

Цитотоксин –один из наиболее важных факторов вирулентности стафилококков, вызывает аггрегацию тромбоцитов и избирательно действует на гладкую мускулатуру мелких вен.

Лейкоцидин –негемолитический экзотоксин, разрушающий клетки белой крови. Он вызывает дегрануляцию полиморфонуклеарных нейтрофильных лейкоцитов и макрофагов. Энтеротоксин –внеклеточный токсин, который вырабатывают около 50% коагулазоположительных штаммов и который вызывает большинство случаев пищевого отравления. Токсин действует непосредственно на рвотный центр центральной нервной системы. Продукция токсина обусловлена фаговой конверсией. Различают 5 типов токсина–А, В, С, D, E. Накопление энтеротоксина в зараженной пище приводит к пищевому отравлению с синдромом гастроэнтерита, который не является инфекцией в обычном понимании этого термина, это скорее токсемия. Присутствие токсина в подозреваемой пище можно установить иммунологически, например, в реакции преципитации.

Эксфолиатин (эксфолиативный токсин) –это токсин, продукция которого обусловлена плазмидой. Избирательно повреждает некоторые клетки кожи таким образом, что обширные участки кожного покрова могут отслаиваться полностью. Особенно чувствительны к действию токсина новорожденные и маленькие дети. Это поражение получило название "синдром ошпаренной кожи". Коагулаза, важный экстрацеллюлярный фермент, продуцируемый только некоторыми стафилококками (коагулазоположительные), вызывает образование сгустка плазмы крови. В лаборатории определение коагулазы используется как единственное достоверное доказательство патогенности выделенного штамма. У невирулентных штаммов попытки обнаружить коагулазу обычно заканчиваются неудачей. Эти штаммы обозначают как коагулазоотрицательные. При наличии данного фермента и проявлении его действия отдельные кокки оказываются покрытыми слоем фибрина и, таким образом, они надежно защищены от атаки фагоцитов.

Способность к продукции коагулазы коррелирует с наличием у этих штаммов и других токсических продуктов. Коагулазо + стафилококки также могут иметьфактор склеивания –это связанная с клеткой, но антигенно отличающаяся форма коагулазы, вызывающая быстрое склеивание клеток, эмульгированных в капле плазмы.

Липазы стафилококка –это ферменты, которые разрушают липиды клеточных структур и липопротеины крови. Стафилококки утилизируют метаболиты кожных структур и потому способны интенсивно колонизировать (заселять) поверхность кожи. Образование липазы дает этому микробу способность к инвазии здоровой кожи и подкожной клетчатки с формированием локальных абсцессов. Штаммы без липазы чаще связаны с генерализованной инфекцией.

Гиалуронидаза(фактор распространения, инвазии), которую вырабатывают более 90% патогенных стафилококков, повышает проницаемость тканей для кокков и их токсических субстанций. Вызывает деградацию гиалуроновой кислоты, которая соединяет клетки тканей.

Нуклеаза, имеется у 90 –96% S. aureus, расщепляет ДНК и РНК. Нуклеаза S. aureus термостабильна, нуклеаза коагулазоотрицательных стафилококков– термолабильна.

Стафилокиназарастворяет сгустки фибрина и, соответственно, способствует распространению местной, вначале ограниченной, инфекции.

    Патогенность.

Некоторые стафилококки непатогенны, другие (S. aureus) вызывают тяжелые инфекции. S. epidermidis, хотя иногда и вызывает легкие, ограниченные поражения, в общем, относится к непатогенным, за исключением некоторых необычных медицинских ситуаций, например, при введении в тело с лечебной целью технических устройств, чужеродных для тканей организма. Обычно S. epidermidis является частой причиной эндокардита, развивающегося при протезировании сердечных клапанов и инфекций, осложняющих ортопедическое протезирование или нейрохирургическое шунтирование.

Хорошо известны стафилококковые инфекции кожи и поверхностных тканей тела, такие как пиодермии, фурункулы, абсцессы, карбункулы, паронихии, импетиго (impetigo contagiosa) и инфекционные осложнения хирургических ран. Клиника инфекции кожных покровов зависит от возраста больного. Например, "синдром ошпаренной кожи" наблюдается у маленьких детей.

Стафилококки также способны вызывать заболевания целых систем и поражаться могут практически все органы и ткани. Они могут быть одной из причин пневмонии, гнойного плеврита, эндокардита, менингита, абсцесса мозга, послеродовой лихорадки, флебита, цистита и пиелонефрита. Стафилококковая пневмония является фатальным осложнением эпидемического гриппа. Стафилококки являются наиболее распространенной причиной остеомиелита. Стафилококковые заболевания часто возникают в больницах, особенно у пациентов, уже серьезно больных. Например, стафилококковая пневмония– это суперинфекция, угрожающая больным, принимавшим большие дозы антибиотиков. Стафилококковая септицемия наблюдается в двух формах. Первая –это молниеносная глубокая токсемия, через несколько дней приводящая к смерти. Другая, более частая форма, длится дольше, сопровождается развитием метастазирующих абсцессов в разных частях тела, но не является необратимой. Стафилококковая септицемия может быть первичной, но чаще это результат вторичного проникновения в кровоток микроорганизмов из местного очага инфекции. Часто процесс начинается как тривиальное воспаление волосяного фолликула. Микроб может поступать в кровоток из инфицированной раны, из очага пневмонии, или из инфицированного внутривенного катетера. Катетер внутри вены не должен оставаться дольше 3-4 дней из-за риска возникновения серьезной инфекции. Поверхностные гнойники, фурункулы вокруг носа и губ легко осложняются септицемией, поэтому лучше избегать их травмирования.

Так называемый "опасный треугольник" –это треугольный участок лица от углов рта, верхней губы и до верхней части носа. Из этой области возможно распространение инфекции непосредственно в полость черепа, что может быть опасным для жизни. Такое осложнение связано с особенностями анатомического строения этой части тела: отсутствие надежных механических барьеров, вены, не имеющие клапанов, которые бы затрудняли обратный ток крови, наличие мускулатуры, постоянно находящейся в движении. Даже при таких манипуляциях как прокалывание ушей (в косметических целях), проводимых без соблюдения необходимой стерильности, есть опасность развития вторичной стафилококковой инфекции, которая из открытой ранки может проникать в кровоток и иногда приводить к развитию сепсиса.

Стафилококки могут быть причиной энтерита и энтероколита, осложняющего антибиотикотерапию. Они являются наиболее частой причиной пищевого отравления, так как в пище может накапливаться в большом количестве токсин. Стафилококки могут вызывать иногда гнойно-воспалительные процессы у коров и лошадей. В случае развития мастита микроб может попасть в молоко. Могут возникнуть гнойничковые поражения кожи рук доярок. Возможно заражение других животных в стаде.

    Госпитальная стафилококковая инфекция.

Человек тесно связан с повсеместно распространенными стафилококками (убиквитарный микроорганизм), и поэтому стафилококковая инфекция представляет угрозу в любом месте и в любое время. Пример тому–госпитальная инфекция, уже на протяжении многих лет являющаяся серьезной проблемой для больниц во всем мире.

С этой проблемой связан ряд вопросов, требующих обсуждения. Прежде всего, стафилококковая госпитальная инфекция–это осложнение широкого применения антибиотиков. Эти важнейшие антимикробные агенты очень широко и свободно назначаются, но их действие преимущественно бактериостатическое, а не бактерицидное. Стафилококки наделены хорошей приспособляемостью и среди них возникают устойчивые к антибиотикам штаммы. Во-вторых, особенности медицинского страхования и медицинской службы способствуют раннему выявлению болезни и ранней госпитализации большего числа больных. В-третьих, расширение объема и числа хирургических вмешательств. Сложная хирургическая техника позволяет оставлять ткани открытыми дольше. В-четвертых, отдельные виды терапии могут вызывать угнетение иммунной системы (иммунодепрессию). Например, трансплантация тканей и органов на фоне назначения средств, подавляющих отторжение. В этих случаях подавляется резистентность к инфекции.

С наибольшей частотой при госпитальной стафилококковой инфекции наблюдаются следующие поражения:

1.      Пиодермия –термин, обозначающий гнойные поражения кожи и подкожных тканей. Чаще у новорожденных. Возможны опасные осложнения в виде пневмонии, септицемии. От новорожденного может заразиться мать, у которой развивается абсцесс грудной железы– мастит.

    2.      Раневая инфекция, особенно хирургической раны.

3.      Вторичная стафилококковая инфекция престарелых и лиц, не способных к соблюдению гигиенических норм.

4.      Гастроэнтерит у лиц с угнетенной (например антибиотиками) кишечной микрофлорой.

    Патологическая анатомия.

Наиболее заметное проявление стафилококковой инфекции –абсцесс, основной тип повреждения. В основе образования абсцесса лежит гноеродная активность стафилококка и его довольно ограниченная способность к распространению.

Поскольку микроб постоянно обитает на коже, она чаще всего и поражается. Фурункул–это кожный абсцесс. Формирование абсцесса обусловлено локализацией и уровнем распространения. Стафилококковая пневмония– это множественные абсцессы в легких. Пиелонефрит –это множественные абсцессы экскреторной системы почек. Стафилококковая септицемия–образование множественных абсцессов по всему телу. В этом случае более подходит терминпиемия, буквально означающий "гной в крови".

Когда стафилококки инфицируют рану, они вызывают образование в ней гноя. Стафилококки являются важнейшей причиной раневой инфекции. В целом, они вызывают до 80% всех гнойных процессов у человека.

    Эпидемиология.

Стафилококки в норме обитают на коже человека, а также на слизистой ротовой полости, глотки и носа. Они могут находиться здесь постоянно, пока однажды не преодолеют кожный или слизистый барьер и не вызовут развитие болезни. В другом случае они проникают через неповрежденную кожу в волосяные фолликулы и протоки сальных желез.

В норме способность стафилококка к инвазии и резистентность хозяина хорошо сбалансированы поэтому инфекция не развивается, пока не создастся ситуация, когда встречаются высоковирулентный микроб или макроорганизм со сниженной резистентностью.

Как правило, развивается локальный процесс –абсцесс или фурункул, без распространения инфекции. Но в части случаев микроб выходит за пределы локальной инфекции, попадает в кровоток и поражает разные ткани и органы тела.

Механизм передачи инфекции преимущественно контактный. Например, через руки персонала в больнице. Персонал подвергается риску стать носителями, в этом случае стафилококк может длительно находиться у них на слизистой носа. Носители могут стать источниками инфекции.

    Бактериологическая диагностика.

Бактериологический диагноз стафилококковой инфекции не представляет особых сложностей, если исследуют кровь и другие жидкости организма, в норме стерильные. Выделенную культуру стафилококка необходимо идентифицировать как патогенную, в отличие от обычного микроба, обитающего на коже. Для этого используют ряд тестов. Свежевыделенные культуры стафилококка характеризуются как патогенные по таким признакам как продукция желтого пигмента, гемолизина, ферментация маннита, продукция ДНК-азы и коагулазы.

Фаготипирование. Бактериофаги –вирусы, поражающие бактерий и, в некоторых случаях, вызывающие их лизис. Действие фагов специфично. Только отдельный фаг или группа фагов поражают конкретный штамм бактерий, что позволяет использовать фаги для типирования бактерий (фаготипирование). С этой целью взвесь известного фага вносится в чашку со свежей культурой микроба, подлежащего типированию. Если этот микроб чувствителен к действию данного фага, он лизируется и роста на среде не дает. На чашке появляются прозрачные зоны, так называемые "бляшки" или "негативные колонии".

Фаготипирование стафилококков заслуживает специального упоминания. Было установлено, что специфические бактериофаги (стафилофаги, табл. 1) реагируют с 60% коагулазо+ стафилококков. Коагулазо? стафилококки не так чувствитекльны. Поскольку этот процесс специфический, он используется для определенияфаговароввыделенных стафилококков. Для удобства бактериофагам присвоены определенные номера, и штаммы стафилококка, лизирующиеся определенным фагом имеют номер этого фага и обозначаются как соответствующий фаговар. Это касается только штаммов S. aureus. Большинство других стафилококков относятся к нетипирующимся. По решению международного подкомитета по фаготипированию стафилококков, предложена международная классификация фаговаров S. aureus (табл. 1)

    Таблица 1    Международная классификация фаговаров S. aureus    Группы    Отдельные фаги    Общие фаговары S. aureus    I    29, 52, 52А, 79, 80    29, 52/52А; 52/52А/80/81; 80    II    3А, 3В, 3С, 55, 71    3А/3В/3С; 3С/55    III    6, 7, 42Е, 47, 53, 54, 75    6/7/47/53/54/75/77    IV    42D         Смешанная    81, 187     

Фаготипирование используется в эпидемиологических целях для выявления источника инфекции, так как фаготипирование высокоспецифичный процесс. В случаях, например, внутрибольничных инфекций, метод может точно указать на носителя патогенного штамма (один и тот же фаговар).

    Иммунитет.

У людей имеется значительный естественный иммунитет к стафилококкам. Специфические антитела обнаруживаются в сыворотке крови большинства людей. Появление их связано с перенесенными, так называемыми, "малыми" стафилококковыми инфекциями кожи и слизистых. Приобретенный иммунитет может выполнять определенную защитную функцию, но практически не может служить серьезной защитой против стафилококковой инфекции. Особую группу риска составляют лица со сниженными защитными реакциями, например вследствие диабета или вирусных инфекций.

    Профилактика и контроль за стафилококковой инфекцией.

Основу контроля за стафилококковой инфекцией в больницах (и в любом другом месте) является тщательное соблюдение гигиенических стандартов и неукоснительное соблюдение правил асептики. Циркулирующие патогенные штаммы стафилококка так же чувствительны к дезинфицирующим средствам, как и обычные непатогенные штаммы.

Важное мероприятие –выявление носителей патогенного стафилококка (на слизистой носа) среди персонала, особенно в отделениях новорожденных.

Фаготипирование коагулазо+ стафилококков помогает выявить источник в случае внутрибольничных инфекций.

    © "МЕдицинский Вестник"  № 1`99 (77)

Скачен 208 раз.

mcvouo.ru

Реферат на тему Стафилококки

Общая характеристика.

Стафилококки обычно встречаются в виде скоплений, напоминающих виноградную гроздь. Отдельные кокки, приметно 1 мкм в диаметре, имеют тенденцию объединяться в скопления, поскольку их деление происходит в трех взаимно перпендикулярных плоскостях и дочерние клетки сохраняют своеобразное пространственное групповое взаиморасположение. При специальных условиях они могут располагаться поодиночке, попарно, или в виде коротких цепочек. Они грамположительны, неподвижны, не образуют спор и активно растут практически на всех искусственных средах, обычно образуя непрозрачные, гладкие, блестящие колонии.

Поскольку стафилококки продуцируют каталазу, перекись водорода, образующаяся как метаболит при аэробных условиях, для них не токсична, и, большей частью, они лучше растут в присутствии кислорода. Однако, они легко переносят отсутствие кислорода, а некоторые из них даже являются строгими анаэробами. Они лучше растут при температуре 25 – 35°С, но могут расти и при 8° и при температуре выше 48°С.

При культивировании на кровяном агаре в аэробных условиях образуют пигменты – от золотистого до лимонно желтого и белого цвета. Золотистый пигмент дал название одному из видов стафилококка – Staphylococcus aureus. Однако, при этом, некоторые штаммы золотистого стафилококка могут продуцировать и белый пигмент.

Стафилококки устойчивее других бактерий к действию жара, света, высушивания, экстремальных температур и химических агентов. Они выдерживают 60°С в течение часа, а отдельные штаммы даже 80°С в течение 30 минут, хотя большинство вегетативных форм бактерий погибают при воздействии 60°С в течение 30 минут.

Благодаря своей устойчивости к высушиванию стафилококки могут переноситься с частицами пыли, могут недели и месяцы сохраняться в высохшем гное или мокроте. Другой особенностью стафилококков является их устойчивость в солевой среде (не погибают при концентрации NaCl до 15%). В связи с этим способны сохраняться в консервированных продуктах (пресервах). В продуктах питания, сохраняемых путем соления, стафилококки могут расти и продуцировать энтеротоксин.

Эти микробы устойчивы к действию фенола и большинству других дезинфектантов, чувствительны к основным красителям. Имеют тенденцию к формированию резистентности к сульфаниламидам и антибиотикам. Около 80% штаммов Staphylococcus aureus резистентны к пенициллину.

Род Staphylococcus представлен тремя видами:

1.Staphylococcus aureus;

2.Staphylococcus epidermidis;

3.Staphylococcus saprophyticus.

Виды различаются преимущественно по биохимическим свойствам и вырабатываемым ферментам. Staphylococcus aureus ферментирует манит в анаэробных условиях и продуцирует коагулазу, тогда как два других вида лишены этих свойств.

Staphylococcus saprophyticus – первично сапрофитический, о чем свидетельствует его название. Он, по-видимому, является потенциально патогенным, обладает ограниченной инвазивностью. Способен вызывать инфекцию мочевого тракта.

Токсические продукты.

Стафилококк вырабатывает много продуктов с выраженными токсическими свойствами. Вероятно, никакой другой микроб не продуцирует их в таком количестве. Среди них экстрацеллюлярные токсины, гемолизины (стафилолизины), ферменты. Все они, в той или иной степени, обусловливают болезнетворность и вирулентность микроба. Ни один штамм не способен вырабатывать все токсические продукты сразу.

Гемолизины – это экзотоксины, действующие непосредственно на клеточную мембрану, вследствие чего происходит лизис эритроцитов, лейкоцитов, тромбоцитов макрофагов и развивается поражение многих тканей. Действием гемолизина, вероятно, объясняются фатальные исходы многих случаев стафилококковых инфекций.

При росте культуры стафилококка на кровяном агаре гемолиз проявляется в виде зоны просветления (бета – гемолиз). В отличие от стрептококка, стафилококк не вызывает частичный гемолиз (альфа – гемолиз). Следует отметить, что греческие буквы используются для обозначения иммунологически различающихся типов стафилококковых гемолизинов, в то время как у стрептококков эти буквы обозначают тип гемолиза – полный, или неполный. Например, гемолизин, обозначаемый как альфа – гемолизин (альфа – лизин, альфа – токсин) у стафилококков означает наличие светлой зоны вокруг колоний на кровяном агаре.

Цитотоксин – один из наиболее важных факторов вирулентности стафилококков, вызывает аггрегацию тромбоцитов и избирательно действует на гладкую мускулатуру мелких вен.

Лейкоцидин – негемолитический экзотоксин, разрушающий клетки белой крови. Он вызывает дегрануляцию полиморфонуклеарных нейтрофильных лейкоцитов и макрофагов.

Энтеротоксин – внеклеточный токсин, который вырабатывают около 50% коагулазоположительных штаммов и который вызывает большинство случаев пищевого отравления. Токсин действует непосредственно на рвотный центр центральной нервной системы. Продукция токсина обусловлена фаговой конверсией. Различают 5 типов токсина – А, В, С, D, E. Накопление энтеротоксина в зараженной пище приводит к пищевому отравлению с синдромом гастроэнтерита, который не является инфекцией в обычном понимании этого термина, это скорее токсемия. Присутствие токсина в подозреваемой пище можно установить иммунологически, например, в реакции преципитации.

Эксфолиатин (эксфолиативный токсин) – это токсин, продукция которого обусловлена плазмидой. Избирательно повреждает некоторые клетки кожи таким образом, что обширные участки кожного покрова могут отслаиваться полностью. Особенно чувствительны к действию токсина новорожденные и маленькие дети. Это поражение получило название "синдром ошпаренной кожи".

Коагулаза, важный экстрацеллюлярный фермент, продуцируемый только некоторыми стафилококками (коагулазоположительные), вызывает образование сгустка плазмы крови. В лаборатории определение коагулазы используется как единственное достоверное доказательство патогенности выделенного штамма. У невирулентных штаммов попытки обнаружить коагулазу обычно заканчиваются неудачей. Эти штаммы обозначают как коагулазоотрицательные. При наличии данного фермента и проявлении его действия отдельные кокки оказываются покрытыми слоем фибрина и, таким образом, они надежно защищены от атаки фагоцитов.

Способность к продукции коагулазы коррелирует с наличием у этих штаммов и других токсических продуктов. Коагулазо + стафилококки также могут иметь фактор склеивания – это связанная с клеткой, но антигенно отличающаяся форма коагулазы, вызывающая быстрое склеивание клеток, эмульгированных в капле плазмы.

Липазы стафилококка – это ферменты, которые разрушают липиды клеточных структур и липопротеины крови. Стафилококки утилизируют метаболиты кожных структур и потому способны интенсивно колонизировать (заселять) поверхность кожи. Образование липазы дает этому микробу способность к инвазии здоровой кожи и подкожной клетчатки с формированием локальных абсцессов. Штаммы без липазы чаще связаны с генерализованной инфекцией.

Гиалуронидаза (фактор распространения, инвазии), которую вырабатывают более 90% патогенных стафилококков, повышает проницаемость тканей для кокков и их токсических субстанций. Вызывает деградацию гиалуроновой кислоты, которая соединяет клетки тканей.

Нуклеаза, имеется у 90 – 96% S.aureus, расщепляет ДНК и РНК. Нуклеаза S.aureus термостабильна, нуклеаза коагулазоотрицательных стафилококков – термолабильна.

Стафилокиназа растворяет сгустки фибрина и, соответственно, способствует распространению местной, вначале ограниченной, инфекции.

Патогенность.

Некоторые стафилококки непатогенны, другие (S.aureus) вызывают тяжелые инфекции. S.epidermidis, хотя иногда и вызывает легкие, ограниченные поражения, в общем, относится к непатогенным, за исключением некоторых необычных медицинских ситуаций, например, при введении в тело с лечебной целью технических устройств, чужеродных для тканей организма. Обычно S.epidermidis является частой причиной эндокардита, развивающегося при протезировании сердечных клапанов и инфекций, осложняющих ортопедическое протезирование или нейрохирургическое шунтирование.

Хорошо известны стафилококковые инфекции кожи и поверхностных тканей тела, такие как пиодермии, фурункулы, абсцессы, карбункулы, паронихии, импетиго (impetigo contagiosa) и инфекционные осложнения хирургических ран. Клиника инфекции кожных покровов зависит от возраста больного. Например, "синдром ошпаренной кожи" наблюдается у маленьких детей.

Стафилококки также способны вызывать заболевания целых систем и поражаться могут практически все органы и ткани. Они могут быть одной из причин пневмонии, гнойного плеврита, эндокардита, менингита, абсцесса мозга, послеродовой лихорадки, флебита, цистита и пиелонефрита. Стафилококковая пневмония является фатальным осложнением эпидемического гриппа. Стафилококки являются наиболее распространенной причиной остеомиелита. Стафилококковые заболевания часто возникают в больницах, особенно у пациентов, уже серьезно больных. Например, стафилококковая пневмония – это суперинфекция, угрожающая больным, принимавшим большие дозы антибиотиков.

Стафилококковая септицемия наблюдается в двух формах. Первая – это молниеносная глубокая токсемия, через несколько дней приводящая к смерти. Другая, более частая форма, длится дольше, сопровождается развитием метастазирующих абсцессов в разных частях тела, но не является необратимой.

Стафилококковая септицемия может быть первичной, но чаще это результат вторичного проникновения в кровоток микроорганизмов из местного очага инфекции. Часто процесс начинается как тривиальное воспаление волосяного фолликула. Микроб может поступать в кровоток из инфицированной раны, из очага пневмонии, или из инфицированного внутривенного катетера. Катетер внутри вены не должен оставаться дольше 3-4 дней из-за риска возникновения серьезной инфекции. Поверхностные гнойники, фурункулы вокруг носа и губ легко осложняются септицемией, поэтому лучше избегать их травмирования.

Так называемый "опасный треугольник" – это треугольный участок лица от углов рта, верхней губы и до верхней части носа. Из этой области возможно распространение инфекции непосредственно в полость черепа, что может быть опасным для жизни. Такое осложнение связано с особенностями анатомического строения этой части тела: отсутствие надежных механических барьеров, вены, не имеющие клапанов, которые бы затрудняли обратный ток крови, наличие мускулатуры, постоянно находящейся в движении.

Даже при таких манипуляциях как прокалывание ушей (в косметических целях), проводимых без соблюдения необходимой стерильности, есть опасность развития вторичной стафилококковой инфекции, которая из открытой ранки может проникать в кровоток и иногда приводить к развитию сепсиса.

Стафилококки могут быть причиной энтерита и энтероколита, осложняющего антибиотикотерапию. Они являются наиболее частой причиной пищевого отравления, так как в пище может накапливаться в большом количестве токсин.

Стафилококки могут вызывать иногда гнойно-воспалительные процессы у коров и лошадей. В случае развития мастита микроб может попасть в молоко. Могут возникнуть гнойничковые поражения кожи рук доярок. Возможно заражение других животных в стаде.

Госпитальная стафилококковая инфекция.

Человек тесно связан с повсеместно распространенными стафилококками (убиквитарный микроорганизм), и поэтому стафилококковая инфекция представляет угрозу в любом месте и в любое время. Пример тому – госпитальная инфекция, уже на протяжении многих лет являющаяся серьезной проблемой для больниц во всем мире.

С этой проблемой связан ряд вопросов, требующих обсуждения. Прежде всего, стафилококковая госпитальная инфекция – это осложнение широкого применения антибиотиков. Эти важнейшие антимикробные агенты очень широко и свободно назначаются, но их действие преимущественно бактериостатическое, а не бактерицидное. Стафилококки наделены хорошей приспособляемостью и среди них возникают устойчивые к антибиотикам штаммы. Во-вторых, особенности медицинского страхования и медицинской службы способствуют раннему выявлению болезни и ранней госпитализации большего числа больных. В-третьих, расширение объема и числа хирургических вмешательств. Сложная хирургическая техника позволяет оставлять ткани открытыми дольше. В-четвертых, отдельные виды терапии могут вызывать угнетение иммунной системы (иммунодепрессию). Например, трансплантация тканей и органов на фоне назначения средств, подавляющих отторжение. В этих случаях подавляется резистентность к инфекции.

С наибольшей частотой при госпитальной стафилококковой инфекции наблюдаются следующие поражения:

1. Пиодермия – термин, обозначающий гнойные поражения кожи и подкожных тканей. Чаще у новорожденных. Возможны опасные осложнения в виде пневмонии, септицемии. От новорожденного может заразиться мать, у которой развивается абсцесс грудной железы – мастит.

2. Раневая инфекция, особенно хирургической раны.

3. Вторичная стафилококковая инфекция престарелых и лиц, не способных к соблюдению гигиенических норм.

4. Гастроэнтерит у лиц с угнетенной (например антибиотиками) кишечной микрофлорой.

Патологическая анатомия.

Наиболее заметное проявление стафилококковой инфекции – абсцесс, основной тип повреждения. В основе образования абсцесса лежит гноеродная активность стафилококка и его довольно ограниченная способность к распространению.

Поскольку микроб постоянно обитает на коже, она чаще всего и поражается. Фурункул – это кожный абсцесс. Формирование абсцесса обусловлено локализацией и уровнем распространения. Стафилококковая пневмония – это множественные абсцессы в легких. Пиелонефрит – это множественные абсцессы экскреторной системы почек. Стафилококковая септицемия – образование множественных абсцессов по всему телу. В этом случае более подходит термин пиемия, буквально означающий "гной в крови".

Когда стафилококки инфицируют рану, они вызывают образование в ней гноя. Стафилококки являются важнейшей причиной раневой инфекции. В целом, они вызывают до 80% всех гнойных процессов у человека.

Эпидемиология.

Стафилококки в норме обитают на коже человека, а также на слизистой ротовой полости, глотки и носа. Они могут находиться здесь постоянно, пока однажды не преодолеют кожный или слизистый барьер и не вызовут развитие болезни. В другом случае они проникают через неповрежденную кожу в волосяные фолликулы и протоки сальных желез.

В норме способность стафилококка к инвазии и резистентность хозяина хорошо сбалансированы поэтому инфекция не развивается, пока не создастся ситуация, когда встречаются высоковирулентный микроб или макроорганизм со сниженной резистентностью.

Как правило, развивается локальный процесс – абсцесс или фурункул, без распространения инфекции. Но в части случаев микроб выходит за пределы локальной инфекции, попадает в кровоток и поражает разные ткани и органы тела.

Механизм передачи инфекции преимущественно контактный. Например, через руки персонала в больнице. Персонал подвергается риску стать носителями, в этом случае стафилококк может длительно находиться у них на слизистой носа. Носители могут стать источниками инфекции.

Бактериологическая диагностика.

Бактериологический диагноз стафилококковой инфекции не представляет особых сложностей, если исследуют кровь и другие жидкости организма, в норме стерильные. Выделенную культуру стафилококка необходимо идентифицировать как патогенную, в отличие от обычного микроба, обитающего на коже. Для этого используют ряд тестов. Свежевыделенные культуры стафилококка характеризуются как патогенные по таким признакам как продукция желтого пигмента, гемолизина, ферментация маннита, продукция ДНК-азы и коагулазы.

Фаготипирование. Бактериофаги – вирусы, поражающие бактерий и, в некоторых случаях, вызывающие их лизис. Действие фагов специфично. Только отдельный фаг или группа фагов поражают конкретный штамм бактерий, что позволяет использовать фаги для типирования бактерий (фаготипирование). С этой целью взвесь известного фага вносится в чашку со свежей культурой микроба, подлежащего типированию. Если этот микроб чувствителен к действию данного фага, он лизируется и роста на среде не дает. На чашке появляются прозрачные зоны, так называемые "бляшки" или "негативные колонии".

Фаготипирование стафилококков заслуживает специального упоминания. Было установлено, что специфические бактериофаги (стафилофаги, табл.1) реагируют с 60% коагулазо+ стафилококков. Коагулазо‑ стафилококки не так чувствитекльны. Поскольку этот процесс специфический, он используется для определения фаговаров выделенных стафилококков. Для удобства бактериофагам присвоены определенные номера, и штаммы стафилококка, лизирующиеся определенным фагом имеют номер этого фага и обозначаются как соответствующий фаговар. Это касается только штаммов S.aureus. Большинство других стафилококков относятся к нетипирующимся.

По решению международного подкомитета по фаготипированию стафилококков, предложена международная классификация фаговаров S.aureus (табл.1)

Таблица 1

Международная классификация фаговаров S.aureus

Фаготипирование используется в эпидемиологических целях для выявления источника инфекции, так как фаготипирование высокоспецифичный процесс. В случаях, например, внутрибольничных инфекций, метод может точно указать на носителя патогенного штамма (один и тот же фаговар).

Иммунитет.

У людей имеется значительный естественный иммунитет к стафилококкам. Специфические антитела обнаруживаются в сыворотке крови большинства людей. Появление их связано с перенесенными, так называемыми, "малыми" стафилококковыми инфекциями кожи и слизистых. Приобретенный иммунитет может выполнять определенную защитную функцию, но практически не может служить серьезной защитой против стафилококковой инфекции. Особую группу риска составляют лица со сниженными защитными реакциями, например вследствие диабета или вирусных инфекций.

Профилактика и контроль за стафилококковой инфекцией.

Основу контроля за стафилококковой инфекцией в больницах (и в любом другом месте) является тщательное соблюдение гигиенических стандартов и неукоснительное соблюдение правил асептики. Циркулирующие патогенные штаммы стафилококка так же чувствительны к дезинфицирующим средствам, как и обычные непатогенные штаммы.

Важное мероприятие – выявление носителей патогенного стафилококка (на слизистой носа) среди персонала, особенно в отделениях новорожденных.

Фаготипирование коагулазо+ стафилококков помогает выявить источник в случае внутрибольничных инфекций.

© "МЕдицинский Вестник" № 1`99 (77)

bukvasha.ru

Стафилококковые инфекции - краткая информация о стафилококках

Стафилококки вездесущи – их можно встретить в воде, в пыли, на живых организмах.

Стафилококки весьма устойчивы к нагреванию и высушиванию, и могут выживать в неестественной среде неделями и даже месяцами.

Резистентность к антибиотикам

Производимые такими бактериями ферменты пенициллиназы и бета-лактамазы разрушают антибиотики, не давая им уничтожить микроб. Такие штаммы-монстры ответственны за множество вспышек внутрибольничных инфекций, которые не удается подавить «привычными» антибиотиками, и которые приводят к печальным последствиям.

Метициллин-резистентный золотистый стафилококк (МРЗС) – это глобальная проблема, которая уносит немало жизней даже в развитых странах.

Золотистый стафилококк

Золотистый стафилококк – это наиболее частая причина гнойных инфекций кожи и мягких тканей, импетиго, фурункулов, абсцессов, целлюлита, раневых инфекций. Эта бактерия часто вызывает тяжелую пневмонию, остеомиелит, артрит, эндокардит, менингит и другие заболевания. Выделяемые некоторыми штаммами стафилококка токсины ответственны за тяжело протекающие пищевые отравления, синдром ошпаренной кожи и другие заболевания с выраженной интоксикацией.

Носительство стафилококков

Бессимптомные носители стафилококка выступают отличными разносчиками этой инфекции. Обычное рукопожатие, не говоря уже о поцелуях и более тесном контакте – и бактерия находит себе нового хозяина. «Безвредное» носительство становится серьезной болезнью при наличии факторов риска – ожогов, порезов кожи, кожных заболеваний, установленных катетеров и шунтов, а также при пониженном иммунитете.

Вирусные инфекции, такие как грипп, повреждают слизистые оболочки дыхательных путей, что также открывает ворота вторичной стафилококковой инфекции.

Возникновение и проявления болезни

Симптомы заболевания могут сильно отличаться в зависимости от локализации инфекции. Несмотря на то, что носоглотка у многих людей обсеменена золотистым стафилококком, заболевания дыхательных путей этот микроб вызывает нечасто. Обычно стафилококки вызывают синусит, трахеит или пневмонию у лиц с ослабленным иммунитетом, а также на фоне уже имеющейся острой респираторной вирусной инфекции (ОРВИ).

А вот заболевания кожи довольно распространены, особенно среди лиц из низких социальных слоев, а также среди жителей тропических стран. Стафилококк нередко становится причиной абсцессов, фурункулов, карбункулов, импетиго, фолликулита и других кожных болезней. Обусловленный стафилококком фурункулез может протекать месяцами. Золотистый стафилококк часто становится опасным осложнением различных ранений.

Стафилококк бывает причиной инфекции мышц, суставов, костей, сердца, почек, пищеварительного тракта, нервной системы. При любой локализации стафилококковая инфекция может осложниться сепсисом – заражением крови. Бактерии попадают в кровь, отравляя организм токсинами. Состояние может быть очень тяжелым. У больных наблюдается тошнота, рвота, высокая температура, мышечные боли, нарушение сердечной деятельности.

Многие так называемые пищевые отравления являются последствием употребления стафилококковых энтеротоксинов со старой, недоброкачественной пищей. Через 2-6 часов после употребления зараженной пищи, у больного начинается внезапная, сильная рвота. Может развиться частый, водянистый стул. Температура тела обычно в норме, изредка бывает повышена. Длительность симптомов обычно не превышает сутки. В случае приема большого количества зараженной стафилококком пищи, может развиться шок, возможет летальный исход.

Особенно тяжело такие отравления протекают у маленьких детей.

Профилактика инфекций

Лица с подозрением на стафилококковую инфекцию должны быть немедленно изолированы от окружающих. Носители должны своевременно выявляться и подвергаться санации, для чего необходимо проходить регулярные медицинские осмотры и сдавать анализы. Особенно это касается людей, работающих с продуктами питания, в частности работников детских учреждений. Для предотвращения пищевых отравлений категорически запрещается допускать носителей к приготовлению пищи.

Также следует правильно хранить скоропортящиеся продукты питания – хранение продуктов в низких температурах существенно замедляет размножение бактерий, и снижает риск пищевого отравления.

medbe.ru

Курсовая работа - Диагностика стафилококковых инфекций

ВладивостокскийГосударственный Медицинский  Университет

Кафедра микробиологии,вирусологии и иммунологии

РЕФЕРАТ

Диагностика стафилококковыхинфекций

Выполнил: Новак А.Л.

301 РіСЂ., Р»/С„

Владивосток, 1998.

Предисловие

Несмотря на то, чтостафилококки принадлежат к числу наиболее легко обнаруживаемых и распозна­ваемыхмикроорганизмов, не требующих сложных диагностических приемов для их выявления,в прак­тической работе микробиологи до сих пор испыты­вают определенныетрудности при установлении их причинной роли в ряде различных заболеваний. С од­нойстороны, присутствие патогенных стафилококков, обнаруживаемое в исследуемомматериале, не всегда является убедительным доказательством их этиоло­гическогозначения. С другой, учитывая большое разнообразие проявлений биологическойактивности этих микробов, зависящее от разных, не всегда под­дающихся учетуфакторов, широкую их изменчивость под влиянием лекарственных веществ и самого мак­роорганизма, довольно сложно бывает определить ихпотенциальную патогенность. Наконец, третья причи­на связана с тем, чтостафилококки являются пред­ставителями нормальной микрофлоры из группы условнопатогенных микроорганизмов и, наряду с не­патогенными, патогенные представителиобитают в организме людей, распространяясь при этом весьма неравномерно наразные участки человеческого тела.

Если выделение патогенногостафилококка, из кро­ви больных людей и различных полостей, которые принятосчитать стерильными, в подавляющем боль­шинстве случаев может служитьдоказательством его роли как возбудителя болезни, то присутствие ста­филококковна слизистых зева, носа и т. д. даже при явном болезненном состоянии их требуетбольшой осторожности исследователя в выводах об этиологии данных заболеваний.

Поэтому, естественно, неможет быть общих ре­комендаций,как при диагностикеразличных стафи­лококковых инфекций, так и при микробиологических исследованияхучастков тела человека и разных объ­ектов внешней среды. Широкий обмен мнениями междумикробиолога­ми научных учреждений и практических лаборато­рий, осуществляемыйна съездах и конференциях, посвященных проблемам стафилококковых инфекций, атакже при личных контактах, казалось бы,должен был привести копределенным взглядам на различ­ные методы исследования, предлагаемые для выде­ленияи идентификации стафилококков. Однако боль­шое число запросов, поступающих излабораторий СЭС и лечебных учреждений, свидетельствует о яв­ных затруднениях,которые возникают у исследова­телей при решении разных вопросов микробиологи­ческойдиагностики стафилококков, а в ряде микро­биологических учреждений бытуют ещенекоторые устаревшие методы и приемы, приводящие к непра­вильным оценкам и дажедосадным недоразумениям.

Важным условиемэффективности лабораторной диагностики является сочетанное определение каче­ственныхи количественных критериев содержания патогенных стафилококков в исследуемомматериале. Исходя из этого, я считаю необходимым изложить ряд методов основныхмикробиологических исследо­ваний, наиболее простых и доступных для каждойпрактической и научной лаборатории, которыми мы пользуемся в течение многихлет.

ОСНОВНЫЕ ПРИНЦИПЫОБНАРУЖЕНИЯ И ИДЕНТИФИКАЦИИ ПАТОГЕННЫХ СТАФИЛОКОККОВ

Предварительная диагностикастафилококков мо­жет основываться на бактериоскопическомизучении препаратов — мазков, окрашенных по Граму.Пато­генные стафилококки, помимо гроздевидного распо­ложения,характеризуются правильной сферической формой клеток. Обнаружениестафилококков, нахо­дящихся внутри клеток, позволяет дать ответ о на­личиистафилококковой инфекции. В большинстве же случаев для точного установленияпатогенности об­наруженных стафилококков требуется выделить эти микроорганизмыв чистой культуре путем посева исследуемого материала на плотные питательныесреды.

В настоящее времяассортимент дифференциаль­ных, элективных и накопительных сред, предложен­ныхдля выделения патогенных стафилококков, весь­ма значителен и продолжаетрасширяться. Многие исследователи на основе знания основных биохими­ческиххарактеристик и питательных потребностей патогенных стафилококков при конструированиисред стремятся повысить их высеваемость и обеспечитьвозможность осуществлять их количественный учет, получить надежный способотличать потенциально болезнетворные стафилококки от сапрофитов.

Употребление жидкихнакопительных сред для первичного выделения стафилококков нецелесообраз­но, таккак лишает исследователя возможности количественной оценки содержания микробовв об­следуемых объектах, а при случайных загрязненияхспособствует ошибкам. Особенно это относится к та­ким исследованиям, какобнаружение носительства патогенных стафилококков, где доказательством яв­ляетсялишь массивный рост, либо определение этио­логической роли этих микроорганизмов«при пищевых отравлениях или наружных воспалительных процес­сах. Если жеречь идет об исследовании крови, а так­же о тех немногих случаях, когда бываетнеобходимо выявить даже единичные жизнеспособные особи этих микробов, напримерпри контроле эффективности дезинфекции, проверке на стерильность или титрационных посевах, то в подобных случаях ис­пользованиенакопительных сред вполне оправ­дано.

Из большого числаразнообразных питательных сред, опробованных для первичного выделения ста­филококков,в практике оправдал,;1' себя немногие. Обычный питательный агар(рН 7,2 7,4), приготов­ленный путем добавления 2% агар-агара к мясопептонномубульону или к триптическому перевару Хоттингера, может быть использован при исследова­нииэкссудатов из закрытых полостей. Стафилококки вырастают через 18—24 ч инкубациипри 37° С в виде гладких блестящих с ровными краями непрозрачных и слегкавыпуклых колоний. Характер пигмента вы­является лучше после дополнительногосуточного выдерживания чашек при комнатнойтемпературе (20° С) на свету. Если в исследуемом материале при­сутствуетпосторонняя флора, то по внешнему виду колонии стафилококков могут быть трудно отличимы.

Употребление кровяного агара дает возможность, кроме выявления пигмента,определить и гемолитическую активность стафилококков.При этом необхо­димо помнить, что гемолитическаяспособность, определяемая на чашках с кровяным агаром,зависит от многих факторов — вида крови, ее концентрации, наличия в нейантитоксинов, толщины слоя среды, содержания углекислого газа в атмосферекультиви­рования, густоты посева, присутствия и характера со­путствующей флорыи т. д.

При отборе колоний скровяного агара необходи­мо отвивать как гемолитические, так и не дающие гемолиза,особенно если исследование проводится на среде с человеческой или лошадинойкровью, а от­сутствие гемолиза на таких средах непозволяет за­ключить об отсутствии вообще гемолитическойактив­ности. Поэтому использование кровяного агарадля первичного посева целесообразно только при обсле­довании объектов, несодержащих посторонней мик­рофлоры, и желательно добавлять в питательную средукровь кролика или барана.

Если же проводитсяисследование гноя открытых ран или отделяемого язв или свищей, то следуетпользоваться элективно-дифференциальной средойдля  стафилококков — желточно-солевым  агаром (ЖСА) Г. Н. Чистовича. Элективность этойсреды обеспечивается высоким содержанием хлористого натрия, а добавленныйяичный желток позволяет вы­являть лецитовителлазную   активность,  которая является одним из показателей патогенности стафило­кокков и всилу этого ЖСА более четко дифференци­рует патогенных представителей, чемкровяной агар. Приготовление ЖСА несложно.

Заготовляют впрок истерилизуют в автоклаве при 120 °С» в течение 20 мин питательный агар (МПА или Хоттингера) рН 7,2—7,4, содержащий 10% поваренной соли. Передупотреблением солевой питательный агар растапливают,остужают до 45—50 °С и добавляют к нему 20% по объему стерильной желточной взве­си(1 желток куриного яйца на 200 мл физиологического рас­твора). Для лучшего эмульсирования желательно иметь колбы со стекляннымибусами. После тщательного перемешивания среду разливают по 20—25 мл в чашки,которые могут храниться в хо­лодильнике в течение нескольких дней.

Следует производитьмассивный посев исследуе­мого материала на чашки с ЖСА, а инкубацию вести втечение 2 суток при 35—37° С. Посторонняя флора резко подавляется, стафилококкиже на ЖСА выра­стают практически в чистой культуре. Непосредст­венно припросмотре чашек вокруг колоний отме­чается образование радужных венчиков имутной зоны — лецитовителлазная  реакция. Такие колонии, не менее двух из каждого посева, отвивают на скошенный мясо-пептонный агар для последую­щейпроверки выросших культур в реакции плазмо-коагуляции.

Чтобы избежать ошибок вопределении желточ­ной реакции, необходимо иметь в виду, что иногда наблюдаетсяпомутнение среды без радужного обод­ка, в этом случае проба на лецитовителлазу считает­ся отрицательной. Если же колонии,выросшие на ЖСА, не дают лецитовителлазной реакции,т. е. не окружены радужным венчиком, но имеется рост ста­филококков, то их тожесчитают подозрительными и также отвивают не менее двух из каждого такого посевана чашки с простым питательным агаром пятнамидиаметром 5—10 мм. После суточного инкубирования при37° С полученные макроколонии про­веряют в реакции плазмоагглютинации, для чего микробную массу размешиваютпетлей на стекле в каплях цитратной кроличьей или человеческой плаз­мы,разведенной 1 :4. Образование хлопьев учиты­вают в течение 30с—1 мин. Приналичии плазмоаг­глютинации такие штаммы считаютподозрительными и отвивают на скошенный агар длядальнейшего изу­чения в коагулазной реакции. Притаком отборе число пропускаемых штаммов патогенных стафило­кокков человеческогопроисхождения невелико, куль­туры же, выделенные от животных, требуется прове­рятьв реакции плазмокоагуляции.

Коагулазнаяпроба является основнымпризнаком, определяющим болезнетворность стафилококков, по­этому ее постановкатребует к себе максимального внимания. Для выявления коагулазнойактивности у стафилококков, выделенных от людей, можно поль­зоваться какцельной кровью, так и плазмой кроли­ков или человека. Можно использовать такжекровь или плазму, взятую непосредственно от человека. Консервированная плазмаили кровь, используемые для переливания, непригодны для реакции, так как к нимчасто добавляются консерванты, которые пре­пятствуютжизнедеятельности стафилококков, прояв­лению коагулазнойактивности. Не следует приме­нять кровь животных или людей, переносящих стафи­лококковыезаболевания, в особенности затяжные, так как она может оказаться нестерильной и содержать антикоагулазу.При работе со стафилококками, выде­ленными от рогатого скота, можнопользоваться бы­чьей кровью.

Асептичновзятую кровь стабилизируютс помощью 1—4% цитрата или 0,1% оксалата. Дляполучения плазмы нитратную кровь центрифугируют или отстаивают на холоду. Но,как уже говорилось, можно пользоваться и цельной кровью. Затем кровь разводятстерильным физиологическим раствором в соотношении 1: 3 или 1: 5 и разливаютпо 0,2—0,3 мл в стерильные пробирки, которые перед стерилизацией должны бытьтщательно вымыты, так как остатки химических веществ могут влиять на результат плазмокоагуляции.

Испытуемые агаровые культурыстафилококков вносят пет­лей в плазму и хорошо перемешивают. Бульонные культурывно­сят пипеткой в объеме 0,1 мл В каждом опыте необходимо ста­вить контроль скультурами заведомо патогенных стафилококков, дающих коагулазнуюреакцию, и штаммами коагулазоотрицатель-ныхмикроорганизмов. Кроме того, часть пробирок с разлитой плазмой следуетоставлять не засеянной микробами и выдержи­вать в термостате на протяжениивсего срока опыта. В случае наступления коагуляции хотя бы в одной из них весьопыт нужно переставить с новой порцией крови. Пробирки с исследуемымикультурами выдерживают в термостате при 37 °С в течение су­ток. Учетрезультатов проводится обязательно дважды: через 2—3 ч и 24 ч. Учитываютсвертывание плазмы и образование сгустков. Обычно культуры, активнопродуцирующие коагулазу, дают положительную реакциюуже через 2—3 ч. а если они обла­дают и выраженной фибринолитическойактивностью, то перво­начально образовавшиеся сгустки могут подвергнуться расплавлению к концу суток. Слабокоагулирующиештаммы могут давать положительную реакцию в поздние сроки—к концу суток. Опыты,давшие сомнительный результат, необходимо повторить.

Некоторые исследователи, получивотрицательный или сомни­тельный результат, оставляют пробирки на столе. Этогоделать нельзя, так как свертывание плазмы в более поздние сроки мо­жет носитьне специфический характер и его не следует прини­мать во внимание.

Стафилококки, дающие положительнуюкоагу­лазную пробу, должны рассматриваться как потен­циальнопатогенные, независимо от наличия или от­сутствия у них гемолитическихсвойств и характера пигмента, их относят к видуSt.aureusи в дальней­шем подвергают фаготипизациии проверке на чув­ствительность к антибио­тикам.

Углубленное изучениестафилококков показало, что основной признак па-тогенности— коагулазная реакция может под­вергаться   изменчивости при воздействии различ­ныхфакторов (Г. Н. Чистович, 1961; Е. М. Паде­рина, 1966), поэтому в ряде случаев, при выде­лении коагулазонегативных стафилококков в мо­нокультуре изпатологи­ческих очагов, целесооб­разно изучить у них дру­гие признакипотенциаль­ной болезнетворности и прежде всего — способ­ность ферментировать маннит в анаэробных условиях. Известно, что среди коагулазоотрицательных часть культур обладает способностьюрасщеплять маннит в анаэробных условиях (8,4% —поданным А. А. Ака­това и М. Л. Хатеневер,1974).

Определение ферментации маннита в анаэробных условиях технически очень просто иосуществляется путем посева уколом исследуемых культур в пробирки с высокимстолбиком полу­жидкого агара Хоттннгера,содержащего 1% маннита и 0,004% индикатора бромкрезолпурпура или бромтимолблау(рН == 7,2). Эту среду перед посевом «регенерируют»,т. е. кипятят в водяной бане, быстро охлаждают, а после посева заливают слоемсте­рильного вазелинового масла. Посевы инкубируют при 37 °С в течение 5 дней.Однако в значительном числе случаев результаты могут быть учтены уже черезсутки.

Наряду с реакцией плазмокоагуляции, большое значение приобрела еще однаважная способность стафилококков, характеризующая их потенциальнуюпатогенность, —дезоксирибонуклеазная   активность. Многие исследователи сообщают овысокой корреля­ции этого признака с коагулазнойактивностью и токсигенностью изучаемых культур;отмечают, что стафилококки, выделенные из патологического мате­риала, какправило, обладают ДНК-азой. Коагула-зопозитивныештаммы, полученные от носителей, могут не иметь этого фермента, и обычноотсутствие дезоксирибонуклеазной активностисочетается с низ­кой биохимической способностью и атоксигенностьютаких культур стафилококков.

По наблюдениям некоторыхисследователей, сре­ди коагулазонегативных штаммовстафилококков, но обладавших другими признаками патогенности, вы­деленных вряде случаев от больных с различными гнойными инфекциями, дезоксирибонуклеазнуюак­тивность проявляли от 10 до 29% таких культур (И. И. Панышеваи сотр., 1967;Franklinи соавт., 1966;LierdиGolde,1970).

В настоящее время этот тестможет служить на­дежным дифференциальным признаком между пато­генными инепатогенными стафилококками и в то же время может помочь в дифференциациистепени патогенности коагулазопозитивных штаммов и,без­условно, привлечет внимание к коагулазонегативным,но обладающим этим ферментом культурам ста­филококков и в ряде случаев позволитотнести по­следние к болезнетворным формам с большей уве­ренностью.

Методика определения дезоксирибонуклеазной активности не­сложна, в основу ееположен метод Джеффриса. Готовят впрок 2% МПА (рН—8,6), содержащий ДНК (2 мг/мл среды), разли­вают пофлаконам и стерилизуют текучим паром в течение 30 мин. Перед разливом в чашки ксреде добавляютCaCIa(0,8 мг/мл). На подсушеннуюсреду засевают суточные культуры стафилокок­ков. После инкубации в течение18—20 ч при 37°, на поверхность среды наливаютINраствор НС1 и через 7—10мин учитывают зоны просветления, которые оценивают крестами (Н. Б. Морд­винова и соавт., 1967).

Нами предложен болееэкономичный метод для обнаружения ДНК-азы у микроорганизмов. Этот спо­соб,помимо уменьшения в 2 раза расхода ДНК на каждый опыт, позволяет использоватьболее деше­вую низкополимерную нуклеиновую кислоту,изго­товляемую Олайнским заводом химических реакти­вов.Предлагаемая методика широко апробирована на кафедре микробиологии ЛСГМИ и покачеству результатов не уступает общепринятой. Поэтому мы приводим ее подробноеописание.

Для приготовления рабочегораствора ДНК, навеску нуклеи­новой кислоты из расчета 10 мг/мл помещают вдистиллирован­ную воду, добавляют 0,5 мл 0,2% (или 0,8%) раствораNaOHна каждые 10 мл воды. Для лучшего растворения ДНКсмесь либо нагревают до кипения в водяной бане при постоянном перемеши­ваниистеклянной палочкой, либо оставляют на ночь при 37 °С в термостате. Красплавленному и остуженному до 50 °С МПА добавляют рабочий раствор ДНК израсчета 1 мг/мл (на 9 мл МПА—1 мл раствора ДНК), перемешивают, разливаютпо10л(л в пробирки, стерилизуют текучим паром в течение 30 мин или в автоклавепри 0,5 атмосферы в течение 20 мин. Срок хранения— 1—2 мес.

При постановке опытастолбики агара с ДНК растапливают, в водяной банедобавляют 0,1 мл официнального стерильного 10% р-ра СаСЬ, перемешивают ивыливают на слой хорошо под­сушенного питательного агарав чашки Петри и вновь подсуши­вают. Суточную агаровую культуру засеваютмаленькими бляш­ками (диаметр равен 2—2,5 мм) или штампом-репликатором не более20—25 бляшек, во избежание слияния зон деполимериза­ции ДНК. После18—20-часовой инкубации поверхность агара за­ливают 5млINраствора НС1 и через 3—5 мин учитывают зоны просветления. Реакцииоценивают в крестах.

При этом следует учесть, чтоинтенсивность зоны деполиме­ризации на плотной среде не всегда совпадает сколичеством про­дукции этого фермента у исследуемых стафилококков в жидких средах.

Для обнаружения фибринолизина исполь­зуют несколько усовершенствованныйметод Кристи с сотр.

Среда Кристи—Чепмена имеетследующий состав: мясной экстракт—0,45 г, пептон—0,75 г, хлористый натрий—1,2г, агар—2,75 г, вода—130 мл, рНсреды == 7,0. Стерилизуется в автоклаве и сохраняется впрок.

Перед опытом средурастапливают, остужают до 50 °С и до­бавляют 15—20% стерильной цитратнойчеловеческой плазмы. Смесь прогревается в водяной бане при 65—70°С в течение 2—5 мин до появления ясной мути, а затем разливается в чашки. Испытуемые культурызасевают «пятнами» по 15—20 на чашку.                                            Посевы инкубируют при 37 °С. Учитывается образование зон про­светлениявокруг колонии первоначально через 14 ч, затем через 24 и 48 ч, так как реакцияу различных культур течет неодина­ково быстро и у ряда штаммов она развиваетсяв более поздние сроки.

Фибринолитическийтест мы считаем весьма при­годнымдля определения потенциальной болезнетворности стафилококков, но оцениваемтолько в комп­лексе с другими признаками активности.

Гиалуронидазнаяактивность опреде­ляется   по методу Мак-Клинав модификации М. Ш. Могилевского и Л. С. Коган (1949).

Раствор гиалуронатадающий в присутствии 2 N уксусной кислоты типичный сгусток, разливается по 0,5мл в стерильные пробирки. Добавляется 0,5 мл суточной культуры стафилококка в пептонной воде. Контролями служат: гиалуропат+ дистилли­рованная вода и гиалуропат + незасеяннаясреда. Смеси встря­хиваются и выдерживаются при 37 °С 15—20 мин. Затем в каж­дуюпробирку добавляется по две капли 2 N раствора уксусной кислоты ивстряхивается. В контролях должен образоваться сли­зистый комочек. В опыте приналичии гиалуронидазы он отсут­ствует, чтосвидетельствует о деполимеризации гиалуроновой кис­лотымикробным ферментом.

Для изучения токсигенности стафи­лококков удобно пользоваться методом,предло­женным Илеком и Леви (1950), позволяющим опре­делитьтипы гемолизинов.

С этой целью готовятся чашкис питательным агаром, содер­жащим 5% отмытыхфизиологическим раствором эритроцитов барана, кролика и человека.

На поверхность питательнойсреды по диаметру помещают стерильную полоску фильтровальной бумаги, смоченную альфа-антитоксической сывороткой. Отступив 1—2 мл от краяполоски, перпендикулярно к ней засеивают штрихами исследуемые куль­туры. Посевыинкубируют при 37 °С в течение суток, после чего учитывают результаты.

Альфа-гемолизпроявляется в виде полногопросветления среды вокруг штриха культуры и нейтрализуется альфа-антиток­сическойсывороткой. Он выявляется на средах с кроличьими и бараньими эритроцитами

Бета-гемолизна агарес бараньей кровью дает частичное просветление, зона которого имеетбуровато-пурпурный оттенок. Это «тепло-холодовый»токсин и лучше выявляется после до­полнительного суточного выдерживаниячашек в холодильнике при температуре +4 °С по характерному послойному гемолизу бараньих эритроцитов и не централизуется альфа-антитоксиче­ской сывороткой. На кроличьих эритроцитахон не активен. Дельта-гемолизин определяется по узкойполоске гемолиза бараньих и кроличьих эритроцитов, ненейтрализуется альфа-антитоксической сывороткой.Однако образование дельта-гемоли-зина на этих чашкахможет быть замаскировано действием аль­фа-токсина ипоэтому его следует проверять на средах с эритро­цитами человека или лошади.Таким образом, для определения всех 3 типов гемолизиновдостаточно использовать эритроциты барана и человека или лошади.

Для определениявирулентности ста­филококков существуют несколько различных методов заражениябелых мышей.

Наиболее простым являетсявведение 0,1 мл суточной бульон­ной культуры испытуемого стафилококка вхвостовую вену. Учет гибели животных осуществляется в течение 10 суток,регистри­руют наличие абсцессов в почках.

Удобно пользоваться способомBadenskiи сотр. (1958), Су­точнаябульонная культура центрифугируется при 3000 об/мин — 30 мин. Полученный осадокресуспендируется в половинном объ­еме декантата и в количестве 0,05 мл вводится 6 мышам позадиглазного яблока в окологлазничную клетчатку. Культуру, вызы­вающую гибельполовины и более зараженных мышей в течение 6 дней, считают вирулентной.

При этих методах заражениявирулентной куль­турой у животных развивается общин септический процесс спреимущественным поражением почек. Основная гибель мышеи происходит на 3—5-йдень после заражения.

Другие способы заражениябелых мышей (внутрибрюшинный и интраназальный)требуют в десятки

раз большей заражающей дозы,максимум гибели мышей приходится на 1—2-е сутки, что характери­зуетпреимущественно токсический компонент про­цесса (С. А. Анатолий, И. И. Антоновская, 1967).

В то же время рядисследователей отдают пред­почтение более простому технически внутрибрюшинномуспособу заражения мышей, который одновре­менно позволяет изучать клеточные игуморальные механизмы развития инфекции.

Сопоставление вирулентностистафилококков для белых мышей с отдельными факторами их патогенности показало,что вирулентность штаммов, по дан­ным большого числа исследователей, коррелирует с уровнем альфа-гемотоксина.Что касается других признаков патогенности и их корреляции с вирулент­ностью,то получены разноречивые сведения. Так, по данным С. А. Анатолия (1969),вирулентность штам­мов коррелировала с продукцией бета-гемолизина, летального фактора, лецитовителлазы,гиалуронидазы и коагулазы.А. К. Акатов (1968) не отмечает кор­реляциивирулентности с коагулазной, лециговител-лазной,фибринолитической активностью, не установ­ленакорреляция с дельта-токсигенностью.

Для сравнения вирулентностистафилококковых культур можно использовать их способность вызы­вать дермонекротическую реакцию у кроликов.

Готовят 4-миллиардную взвесьсуточной агаровой культуры стафилококка в физиологическом растворе, а изполученной гу­стоты делают разведения, чтобы получить 2- и 1-миллиардныевзвеси. Из каждого разведения в объеме 0,1 мл, что составляет 100, 200, 400миллионов микробных тел, вводят кролику в вы­стриженную или депилированнуюнакануне кожу. На одном кро­лике можно одновременно поставить до 8 внутрикожныхпроб. Ежедневно отмечают проявления дермонекротическойреакции, а окончательно на 4-е сутки. За минимальную дермонекротиче­скуюдозу принимают то наименьшее количество культуры, кото­рое дает некроз на 4-есутки (Г. В. Выгодчиков, 1963).

Список использованнойлитературы

1.<span Times New Roman"">В В В В 

2.<span Times New Roman"">В В В В 

3.<span Times New Roman"">В В В В 

4.<span Times New Roman"">В В В В 

    5.  Методическая разработкакафедры. 

www.ronl.ru

Реферат - Стафилококковые кишечные инфекции

Пищевая токсикоинфекция — у детей старшего возраста.

-инкубационный период- 2-5 ч.;

-острое, внезапное начало с болей в эпигастрии, повторной рвоты;

— бурное развитие заболевания с прогрессирующей интоксикацией до развития ИТШ;

-может по типу гастроэнтерита: стул частый, жидкий, водянистый с прожилками крови;

— болезнь заканчивается в течение 1-3 сут. полным выздоровлением.

Первичные стафилококковые энтериты и энтероколиты — у детей 1-го года жизни;

-характерный эпид. анамнез: мастит у матери, наличие гнойных очагов у ребенка, употребление инфицированных продуктов;

-острое начало;

-симптомокомплекс гастроэнтерита, энтероколита с умеренной интоксикацией;

-редко развивается токсикоз с эксикозом;

-длительность дисфункции кишечника до 2-3 нед. и более.

Вторичная стафилококковая кишечная инфекция — на фоне др. проявлений стафилококковой инфекции или как следствие дисбактериоза кишечника;

-длительная лихорадка;

-рвота 1-2 раза в день;

-стул частый, жидкий, с прожилками крови;

-течение длительное, волнообразное, выздоровление параллельно с ликвидацией септических очагов;

— при прогрессировании м.быть язвенный энтероколит с перфорацией язв и перитонитом.

Холецтститы и ангиохолециститы — носят вторичный характер;

-торпидное течение, длительный субфебрилитет;

-боли в области правого подреберья, диспепсия.

Остеомиелиты — первичные и вторичные;

-острое начало с повышения температуры, интоксикации;

-болевой синдром: боли в костях при перемене положения тела, ограничение подвижности конечности;

-на 3-5 день местные прявления воспаления;

-рентгенологические изменения — к концу первой недели;

-у детей раннего возраста чаще сочетанное поражение костей, особенно тазобедренной и плечевой.

Гнойный менингит — чаще проявление септического процесса или осложнение отита, синусита, остеомиелита верхней челюсти, реже первичный;

-обычно у детей 1-х месяцев жизни, имеющих неблагоприятный преморбидный фон;

-начало острое с повышения температуры до 39-40С, выраженной интоксикации;

-у детей раннего возраста общемозговые, энцефалитические симптомы: беспокойство сменяется сонливостью, возможно нарушения сохнания, тремор рук, гиперестезия, выбухание большого родничка, судороги, очаговая симптоматика, поражение III, V, VII, ХI пар ЧМН;

-у детей старшего возраста преобладают симптомы поражения оболочек мозга: повышение температуры, рвота, адинамия, гиперестезия, головная боль, менингиальные знаки резко выражены, судороги редко;

-течение затяжное, волнообразное, склонность к абсцедированию мозга.

Поражение мочевыводящих путей — процесс вторичный, может локализоваться в различных отделах мочевыводящих путей;

-чаще симптомокомплекс цистита, пиелонефрита;

-в моче: лейкоциты, повышенное содержание белка, гиалиновые цилиндры, значительная бактериурия;

-для диагностики имеет значение определение степени бактериурии, повторный высев из мочи патогенного стафилококка.

Стафилококковая инфекция со скарлатиноподобным синдромом -

-начало острое с повышения температуры, различной степени выраженности интоксикации, болей в горле;

-наличие первичного септического языка: инфицированная рана, панариций, флегмона и др.;

-мелкоточечная сыпь на коже внутренней поверхности рук и ног, внизу живота с насыщенностью в естественных складках кожи, может появляться на 3-4 день возникновения стафилококкового очага или ранее, в период реконвалесценции-пластинчатое шелушение кожи;

-возможна ангина;

-язык в первые 2-3 дня обложен белым налетом, затем очищается с кончиков, “сосочковый”.

Стафилококковый сепсис — генерализованная форма инфекции, возникающая преимущественно у детей раннего возраста;

-на месте внедрения формируется первичный септический очаг: пупочная ранка, инфицированные раны, ожоговые поверхности, пиодермия и др.;

-сетицемия протекает с преобладанием общих токсических явлений, на коже различные высыпания (геморрагические, пятнисто-папулезные), температура 39-40С;

-при септикопиемии процесс длительный, волнообразный, гепатоспленомегалия, полилимфоаденопатия;

-периферическая кровь- высокий лейкоцитоз, нейтрофилез со сдвигом формулы влево, ускоренная СОЭ;

-особенности стафилококкового сепсиса у недоношенных новорожденных — в основном в виде септикопиемии, могут быть очаги-остеомиелит верхней челюсти и костей конечностей, флегмона, гнойный менингит, пневмония, вторичный энтероколит. Интоксикация проявляется вялостью, отказом от груди, срыгиванием, диспепсией, задержкой прибавки массы тела. Кожа бледная с серым оттенком или с желтушным. Гепатомегалия, токсический гепатит. Температура тела м.б. нормальной.

-особенности стафилококкового сепсиса у детей старшего возраста- выражены симптомы интоксикации, температура-гектическая, полилимфоаденопатия, гепатоспленомегалия, возможно формирование вторичных очагов- пневмонии, отиты, кардиты, поражение кишечника, пиелонефриты.

Методы диагностики:

1. Микробиологический — высев стафилококка с определением патогенности и чувствительности к антибиотикам из очагов и крови.

2. Серологический- РА с ауто- и высоко агглютинабильными штаммами, РПГА с антигенами стафилококка, определение в крови анти-a-токсина по методу Выгодчикова, определение антилейкоцидина в сыворотке крови.

3. ИФА для выявления стафилококковых антигенов в различных биологических субстратах.

4. Латекс-тест для решения вопроса о патогенности стафилококка.

Лечение:

1. Антибактериальные препараты преимущественно широкого спектра действия, нередко назначают комбинации 2-х антибиотиков с учетом чувствительности.

Основные антибактериальные препараты указаны в таблице (см. ниже). Можно также использовать тетрациклины, левомицетин, рифампицин, однако терапевтические возможности этих препаратов вследствии побочных эффектов ограничены.

www.ronl.ru

Реферат : Стафилококки

Стафилококки

Общая характеристика.

Стафилококки обычно встречаются в виде скоплений, напоминающих виноградную гроздь. Отдельные кокки, приметно 1 мкм в диаметре, имеют тенденцию объединяться в скопления, поскольку их деление происходит в трех взаимно перпендикулярных плоскостях и дочерние клетки сохраняют своеобразное пространственное групповое взаиморасположение. При специальных условиях они могут располагаться поодиночке, попарно, или в виде коротких цепочек. Они грамположительны, неподвижны, не образуют спор и активно растут практически на всех искусственных средах, обычно образуя непрозрачные, гладкие, блестящие колонии.

Поскольку стафилококки продуцируют каталазу, перекись водорода, образующаяся как метаболит при аэробных условиях, для них не токсична, и, большей частью, они лучше растут в присутствии кислорода. Однако, они легко переносят отсутствие кислорода, а некоторые из них даже являются строгими анаэробами. Они лучше растут при температуре 25 – 35°С, но могут расти и при 8° и при температуре выше 48°С.

При культивировании на кровяном агаре в аэробных условиях образуют пигменты – от золотистого до лимонно желтого и белого цвета. Золотистый пигмент дал название одному из видов стафилококка – Staphylococcus aureus. Однако, при этом, некоторые штаммы золотистого стафилококка могут продуцировать и белый пигмент.

Стафилококки устойчивее других бактерий к действию жара, света, высушивания, экстремальных температур и химических агентов. Они выдерживают 60°С в течение часа, а отдельные штаммы даже 80°С в течение 30 минут, хотя большинство вегетативных форм бактерий погибают при воздействии 60°С в течение 30 минут.

Благодаря своей устойчивости к высушиванию стафилококки могут переноситься с частицами пыли, могут недели и месяцы сохраняться в высохшем гное или мокроте. Другой особенностью стафилококков является их устойчивость в солевой среде (не погибают при концентрации NaCl до 15%). В связи с этим способны сохраняться в консервированных продуктах (пресервах). В продуктах питания, сохраняемых путем соления, стафилококки могут расти и продуцировать энтеротоксин.

Эти микробы устойчивы к действию фенола и большинству других дезинфектантов, чувствительны к основным красителям. Имеют тенденцию к формированию резистентности к сульфаниламидам и антибиотикам. Около 80% штаммов Staphylococcus aureus резистентны к пенициллину.

Род Staphylococcus представлен тремя видами:

1.Staphylococcus aureus;

2.Staphylococcus epidermidis;

3.Staphylococcus saprophyticus.

Виды различаются преимущественно по биохимическим свойствам и вырабатываемым ферментам. Staphylococcus aureus ферментирует манит в анаэробных условиях и продуцирует коагулазу, тогда как два других вида лишены этих свойств.

Staphylococcus saprophyticus – первично сапрофитический, о чем свидетельствует его название. Он, по-видимому, является потенциально патогенным, обладает ограниченной инвазивностью. Способен вызывать инфекцию мочевого тракта.

Токсические продукты.

Стафилококк вырабатывает много продуктов с выраженными токсическими свойствами. Вероятно, никакой другой микроб не продуцирует их в таком количестве. Среди них экстрацеллюлярные токсины, гемолизины (стафилолизины), ферменты. Все они, в той или иной степени, обусловливают болезнетворность и вирулентность микроба. Ни один штамм не способен вырабатывать все токсические продукты сразу.

Гемолизины – это экзотоксины, действующие непосредственно на клеточную мембрану, вследствие чего происходит лизис эритроцитов, лейкоцитов, тромбоцитов макрофагов и развивается поражение многих тканей. Действием гемолизина, вероятно, объясняются фатальные исходы многих случаев стафилококковых инфекций.

При росте культуры стафилококка на кровяном агаре гемолиз проявляется в виде зоны просветления (бета – гемолиз). В отличие от стрептококка, стафилококк не вызывает частичный гемолиз (альфа – гемолиз). Следует отметить, что греческие буквы используются для обозначения иммунологически различающихся типов стафилококковых гемолизинов, в то время как у стрептококков эти буквы обозначают тип гемолиза – полный, или неполный. Например, гемолизин, обозначаемый как альфа – гемолизин (альфа – лизин, альфа – токсин) у стафилококков означает наличие светлой зоны вокруг колоний на кровяном агаре.

Цитотоксин – один из наиболее важных факторов вирулентности стафилококков, вызывает аггрегацию тромбоцитов и избирательно действует на гладкую мускулатуру мелких вен.

Лейкоцидин – негемолитический экзотоксин, разрушающий клетки белой крови. Он вызывает дегрануляцию полиморфонуклеарных нейтрофильных лейкоцитов и макрофагов.

Энтеротоксин – внеклеточный токсин, который вырабатывают около 50% коагулазоположительных штаммов и который вызывает большинство случаев пищевого отравления. Токсин действует непосредственно на рвотный центр центральной нервной системы. Продукция токсина обусловлена фаговой конверсией. Различают 5 типов токсина – А, В, С, D, E. Накопление энтеротоксина в зараженной пище приводит к пищевому отравлению с синдромом гастроэнтерита, который не является инфекцией в обычном понимании этого термина, это скорее токсемия. Присутствие токсина в подозреваемой пище можно установить иммунологически, например, в реакции преципитации.

Эксфолиатин (эксфолиативный токсин) – это токсин, продукция которого обусловлена плазмидой. Избирательно повреждает некоторые клетки кожи таким образом, что обширные участки кожного покрова могут отслаиваться полностью. Особенно чувствительны к действию токсина новорожденные и маленькие дети. Это поражение получило название "синдром ошпаренной кожи".

Коагулаза, важный экстрацеллюлярный фермент, продуцируемый только некоторыми стафилококками (коагулазоположительные), вызывает образование сгустка плазмы крови. В лаборатории определение коагулазы используется как единственное достоверное доказательство патогенности выделенного штамма. У невирулентных штаммов попытки обнаружить коагулазу обычно заканчиваются неудачей. Эти штаммы обозначают как коагулазоотрицательные. При наличии данного фермента и проявлении его действия отдельные кокки оказываются покрытыми слоем фибрина и, таким образом, они надежно защищены от атаки фагоцитов.

Способность к продукции коагулазы коррелирует с наличием у этих штаммов и других токсических продуктов. Коагулазо + стафилококки также могут иметь фактор склеивания – это связанная с клеткой, но антигенно отличающаяся форма коагулазы, вызывающая быстрое склеивание клеток, эмульгированных в капле плазмы.

Липазы стафилококка – это ферменты, которые разрушают липиды клеточных структур и липопротеины крови. Стафилококки утилизируют метаболиты кожных структур и потому способны интенсивно колонизировать (заселять) поверхность кожи. Образование липазы дает этому микробу способность к инвазии здоровой кожи и подкожной клетчатки с формированием локальных абсцессов. Штаммы без липазы чаще связаны с генерализованной инфекцией.

Гиалуронидаза (фактор распространения, инвазии), которую вырабатывают более 90% патогенных стафилококков, повышает проницаемость тканей для кокков и их токсических субстанций. Вызывает деградацию гиалуроновой кислоты, которая соединяет клетки тканей.

Нуклеаза, имеется у 90 – 96% S.aureus, расщепляет ДНК и РНК. Нуклеаза S.aureus термостабильна, нуклеаза коагулазоотрицательных стафилококков – термолабильна.

Стафилокиназа растворяет сгустки фибрина и, соответственно, способствует распространению местной, вначале ограниченной, инфекции.

Патогенность.

Некоторые стафилококки непатогенны, другие (S.aureus) вызывают тяжелые инфекции. S.epidermidis, хотя иногда и вызывает легкие, ограниченные поражения, в общем, относится к непатогенным, за исключением некоторых необычных медицинских ситуаций, например, при введении в тело с лечебной целью технических устройств, чужеродных для тканей организма. Обычно S.epidermidis является частой причиной эндокардита, развивающегося при протезировании сердечных клапанов и инфекций, осложняющих ортопедическое протезирование или нейрохирургическое шунтирование.

Хорошо известны стафилококковые инфекции кожи и поверхностных тканей тела, такие как пиодермии, фурункулы, абсцессы, карбункулы, паронихии, импетиго (impetigo contagiosa) и инфекционные осложнения хирургических ран. Клиника инфекции кожных покровов зависит от возраста больного. Например, "синдром ошпаренной кожи" наблюдается у маленьких детей.

Стафилококки также способны вызывать заболевания целых систем и поражаться могут практически все органы и ткани. Они могут быть одной из причин пневмонии, гнойного плеврита, эндокардита, менингита, абсцесса мозга, послеродовой лихорадки, флебита, цистита и пиелонефрита. Стафилококковая пневмония является фатальным осложнением эпидемического гриппа. Стафилококки являются наиболее распространенной причиной остеомиелита. Стафилококковые заболевания часто возникают в больницах, особенно у пациентов, уже серьезно больных. Например, стафилококковая пневмония – это суперинфекция, угрожающая больным, принимавшим большие дозы антибиотиков.

Стафилококковая септицемия наблюдается в двух формах. Первая – это молниеносная глубокая токсемия, через несколько дней приводящая к смерти. Другая, более частая форма, длится дольше, сопровождается развитием метастазирующих абсцессов в разных частях тела, но не является необратимой.

Стафилококковая септицемия может быть первичной, но чаще это результат вторичного проникновения в кровоток микроорганизмов из местного очага инфекции. Часто процесс начинается как тривиальное воспаление волосяного фолликула. Микроб может поступать в кровоток из инфицированной раны, из очага пневмонии, или из инфицированного внутривенного катетера. Катетер внутри вены не должен оставаться дольше 3-4 дней из-за риска возникновения серьезной инфекции. Поверхностные гнойники, фурункулы вокруг носа и губ легко осложняются септицемией, поэтому лучше избегать их травмирования.

Так называемый "опасный треугольник" – это треугольный участок лица от углов рта, верхней губы и до верхней части носа. Из этой области возможно распространение инфекции непосредственно в полость черепа, что может быть опасным для жизни. Такое осложнение связано с особенностями анатомического строения этой части тела: отсутствие надежных механических барьеров, вены, не имеющие клапанов, которые бы затрудняли обратный ток крови, наличие мускулатуры, постоянно находящейся в движении.

Даже при таких манипуляциях как прокалывание ушей (в косметических целях), проводимых без соблюдения необходимой стерильности, есть опасность развития вторичной стафилококковой инфекции, которая из открытой ранки может проникать в кровоток и иногда приводить к развитию сепсиса.

Стафилококки могут быть причиной энтерита и энтероколита, осложняющего антибиотикотерапию. Они являются наиболее частой причиной пищевого отравления, так как в пище может накапливаться в большом количестве токсин.

Стафилококки могут вызывать иногда гнойно-воспалительные процессы у коров и лошадей. В случае развития мастита микроб может попасть в молоко. Могут возникнуть гнойничковые поражения кожи рук доярок. Возможно заражение других животных в стаде.

Госпитальная стафилококковая инфекция.

Человек тесно связан с повсеместно распространенными стафилококками (убиквитарный микроорганизм), и поэтому стафилококковая инфекция представляет угрозу в любом месте и в любое время. Пример тому – госпитальная инфекция, уже на протяжении многих лет являющаяся серьезной проблемой для больниц во всем мире.

С этой проблемой связан ряд вопросов, требующих обсуждения. Прежде всего, стафилококковая госпитальная инфекция – это осложнение широкого применения антибиотиков. Эти важнейшие антимикробные агенты очень широко и свободно назначаются, но их действие преимущественно бактериостатическое, а не бактерицидное. Стафилококки наделены хорошей приспособляемостью и среди них возникают устойчивые к антибиотикам штаммы. Во-вторых, особенности медицинского страхования и медицинской службы способствуют раннему выявлению болезни и ранней госпитализации большего числа больных. В-третьих, расширение объема и числа хирургических вмешательств. Сложная хирургическая техника позволяет оставлять ткани открытыми дольше. В-четвертых, отдельные виды терапии могут вызывать угнетение иммунной системы (иммунодепрессию). Например, трансплантация тканей и органов на фоне назначения средств, подавляющих отторжение. В этих случаях подавляется резистентность к инфекции.

С наибольшей частотой при госпитальной стафилококковой инфекции наблюдаются следующие поражения:

1.     Пиодермия – термин, обозначающий гнойные поражения кожи и подкожных тканей. Чаще у новорожденных. Возможны опасные осложнения в виде пневмонии, септицемии. От новорожденного может заразиться мать, у которой развивается абсцесс грудной железы – мастит.

2.     Раневая инфекция, особенно хирургической раны.

3.     Вторичная стафилококковая инфекция престарелых и лиц, не способных к соблюдению гигиенических норм.

4.     Гастроэнтерит у лиц с угнетенной (например антибиотиками) кишечной микрофлорой.

Патологическая анатомия.

Наиболее заметное проявление стафилококковой инфекции – абсцесс, основной тип повреждения. В основе образования абсцесса лежит гноеродная активность стафилококка и его довольно ограниченная способность к распространению.

Поскольку микроб постоянно обитает на коже, она чаще всего и поражается. Фурункул – это кожный абсцесс. Формирование абсцесса обусловлено локализацией и уровнем распространения. Стафилококковая пневмония – это множественные абсцессы в легких. Пиелонефрит – это множественные абсцессы экскреторной системы почек. Стафилококковая септицемия – образование множественных абсцессов по всему телу. В этом случае более подходит термин пиемия, буквально означающий "гной в крови".

Когда стафилококки инфицируют рану, они вызывают образование в ней гноя. Стафилококки являются важнейшей причиной раневой инфекции. В целом, они вызывают до 80% всех гнойных процессов у человека.

Эпидемиология.

Стафилококки в норме обитают на коже человека, а также на слизистой ротовой полости, глотки и носа. Они могут находиться здесь постоянно, пока однажды не преодолеют кожный или слизистый барьер и не вызовут развитие болезни. В другом случае они проникают через неповрежденную кожу в волосяные фолликулы и протоки сальных желез.

В норме способность стафилококка к инвазии и резистентность хозяина хорошо сбалансированы поэтому инфекция не развивается, пока не создастся ситуация, когда встречаются высоковирулентный микроб или макроорганизм со сниженной резистентностью.

Как правило, развивается локальный процесс – абсцесс или фурункул, без распространения инфекции. Но в части случаев микроб выходит за пределы локальной инфекции, попадает в кровоток и поражает разные ткани и органы тела.

Механизм передачи инфекции преимущественно контактный. Например, через руки персонала в больнице. Персонал подвергается риску стать носителями, в этом случае стафилококк может длительно находиться у них на слизистой носа. Носители могут стать источниками инфекции.

Бактериологическая диагностика.

Бактериологический диагноз стафилококковой инфекции не представляет особых сложностей, если исследуют кровь и другие жидкости организма, в норме стерильные. Выделенную культуру стафилококка необходимо идентифицировать как патогенную, в отличие от обычного микроба, обитающего на коже. Для этого используют ряд тестов. Свежевыделенные культуры стафилококка характеризуются как патогенные по таким признакам как продукция желтого пигмента, гемолизина, ферментация маннита, продукция ДНК-азы и коагулазы.

Фаготипирование. Бактериофаги – вирусы, поражающие бактерий и, в некоторых случаях, вызывающие их лизис. Действие фагов специфично. Только отдельный фаг или группа фагов поражают конкретный штамм бактерий, что позволяет использовать фаги для типирования бактерий (фаготипирование). С этой целью взвесь известного фага вносится в чашку со свежей культурой микроба, подлежащего типированию. Если этот микроб чувствителен к действию данного фага, он лизируется и роста на среде не дает. На чашке появляются прозрачные зоны, так называемые "бляшки" или "негативные колонии".

Фаготипирование стафилококков заслуживает специального упоминания. Было установлено, что специфические бактериофаги (стафилофаги, табл.1) реагируют с 60% коагулазо+ стафилококков. Коагулазо  стафилококки не так чувствитекльны. Поскольку этот процесс специфический, он используется для определения фаговаров выделенных стафилококков. Для удобства бактериофагам присвоены определенные номера, и штаммы стафилококка, лизирующиеся определенным фагом имеют номер этого фага и обозначаются как соответствующий фаговар. Это касается только штаммов S.aureus. Большинство других стафилококков относятся к нетипирующимся.

По решению международного подкомитета по фаготипированию стафилококков, предложена международная классификация фаговаров S.aureus (табл.1)

Таблица 1

Международная классификация фаговаров S.aureus

Фаготипирование используется в эпидемиологических целях для выявления источника инфекции, так как фаготипирование высокоспецифичный процесс. В случаях, например, внутрибольничных инфекций, метод может точно указать на носителя патогенного штамма (один и тот же фаговар).

Иммунитет.

У людей имеется значительный естественный иммунитет к стафилококкам. Специфические антитела обнаруживаются в сыворотке крови большинства людей. Появление их связано с перенесенными, так называемыми, "малыми" стафилококковыми инфекциями кожи и слизистых. Приобретенный иммунитет может выполнять определенную защитную функцию, но практически не может служить серьезной защитой против стафилококковой инфекции. Особую группу риска составляют лица со сниженными защитными реакциями, например вследствие диабета или вирусных инфекций.

Профилактика и контроль за стафилококковой инфекцией.

Основу контроля за стафилококковой инфекцией в больницах (и в любом другом месте) является тщательное соблюдение гигиенических стандартов и неукоснительное соблюдение правил асептики. Циркулирующие патогенные штаммы стафилококка так же чувствительны к дезинфицирующим средствам, как и обычные непатогенные штаммы.

Важное мероприятие – выявление носителей патогенного стафилококка (на слизистой носа) среди персонала, особенно в отделениях новорожденных.

Фаготипирование коагулазо+ стафилококков помогает выявить источник в случае внутрибольничных инфекций.

© "МЕдицинский Вестник"  № 1`99 (77)

topref.ru

Смотрите также

• 
  Реферат на тему сказка колобок
• 
  Реферат на тему рельеф евразии
• 
  Реферат на тему правила слушания
• 
  Реферат на тему плевральная пункция
• 
  Реферат на тему железное дерево
• 
  Реферат на тему достопримечательности челябинска
• 
  Реферат на тему бтр 80
• 
  Реферат на тему альбер камю
• 
  Реферат война в персидском заливе
• 
  Реферат возрастные особенности становления личности
• 
  Реферат введение в специальность менеджмент